肝微小環境の構造理解に基づく新たな代謝性肝疾患治療の確立

基于肝脏微环境的结构理解建立新的代谢性肝病治疗方法

• 批准号: 21H04823
• 负责人: 本多 政夫
• 金额: $ 26.71万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-05 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H04823/
• 关键词: 肝微小環境; 類洞内皮細胞; Sema6A; 肝再生; 線維化

NASHは脂肪化・炎症・線維化を伴って進行し、肝不全や肝発癌発生の要因となる。本申請では、Sema6Aの肝類洞内皮における本来の生理機能を解き明かすことにより、肝再生機構、肝類洞の細動脈化機構、線維化、炎症の機転を解明することを目的とする。また、Sema6Aの発現低下と自律神経系路の分布異常との関連を明らかにし、自律神経制御異常によって引き起こされる肝の代謝障害の機序を解明する。本年度は肝類洞内皮特異的Sema6A KOマウスに高脂肪食負荷を与え、肝組織の遺伝子発現をscRNA-seqにて解析した。肝星細胞の増加に加え、胆管細胞、クッパー細胞の増加が見られ、未分化な肝類洞内皮細胞の増加も認められた。以上より、Sema6Aは肝類洞内皮細胞及びその周辺細胞の分化に関与していることが示唆された。PlexinA2特異的に結合する分泌型Sema6aを肝線維化モデルであるPDGF-C Tgマウスに投与すると、迷走神経の求心性伝達が有意に抑制されることが解った。Sema6aの自律神経制御との関連が示唆された。Sema6A-PlxnA2シグナル関連パスウェイが亢進もしくは抑制される化合物を探索した。その結果、SEMA6A, SEMA3C, PLXNA2, RND3の４つの遺伝子についてそれぞれ17, 18, 15, 17の化合物が出力され、重複を取り除くと33化合物が得られた。肝細胞選択的なSema6Aのdeliveryシステムの開発に向けて、Sema6A細胞外ドメインのC末に抗ASGR一本鎖抗体scFvを連結する方法について検討し、Sema6AのC末とscFvのC末にそれぞれ別々のペプチドタグを融合したタンパク質をHEK293で発現し、連結可能であることを確認できた。さらに、ヒトASGRとマウスASGR（類似性80％）の両方に結合するVHドメイン抗体を取得することに成功した。

NASH steatosis inflammation is associated with progression, liver insufficiency is associated with the development of liver cancer. In this application, the physiological mechanism of Sema6A liver cavity endothelial cell test can be used to understand the mechanism of liver regeneration, the mechanism of liver regeneration, the mechanism of liver cavity movement, the mechanism of maintenance, and the mechanism of inflammation. Low levels of self-regulation and Sema6A are found in the system of self-discipline. The distribution of self-discipline is very common. The system of self-discipline is used to control the disease of liver disease. This year, the high-fat diet of Sema6A KO patients with hepatoendotheliosis was analyzed, and the scRNA-seq profile of liver tissue samples was analyzed. Hepatic stellate cells, bile duct cells, bile duct cells, undifferentiated liver endothelial cells, undifferentiated liver cells and undifferentiated liver cells. The differentiation of endothelial cells and peripheral blood cells in the liver of the above patients and Sema6A patients showed that they were instigated. The combination of PlexinA2 and secretory Sema6a to maintain the connection of the liver, the PDGF-C Tg, the vagus, the heart, the heart. Sema6a, the god of self-discipline, is responsible for the control and instigation of the gods. Sema6A-PlxnA2 was found to be highly active, suppressed, compound explored. The results showed that SEMA6A, SEMA3C, PLXNA2, RND3 4 compounds were isolated from compounds 17, 18, 15, 17, 18, 15, 17, and 33 compounds were obtained. The Sema6A delivery filter selected by the liver cell is used for detection, Sema6A and extracellular detection. The anti-ASGR antibody is linked to an anti-ASGR antibody at the end of the computer, and the Sema6A terminal is used to verify that the HEK293 is detected and the link is confirmed. The combination of the ASGR antibody antibody and the VH antibody was successful.

项目成果

Semaphorin6Aを介した肝類洞内皮と星細胞のクロストークによる肝線維化抑制機序

Semaphorin6A介导的肝窦内皮与星状细胞串扰抑制肝纤维化的机制

• 发表时间: 2022
• 作者: Nagai H;Nagai M;Numa C;Yamashita T;Kawashima Y;Ohno N;Kataoka Y;Shimma S;Mimori-Kiyosue Y;Kato T;Soga T;Furuyashiki T;武部貴則;岡田光，本多政夫，金子周一
• 通讯作者: 岡田光，本多政夫，金子周一

長鎖ノンコーディングRNA、HULCによるC型肝炎ウイルス感染制御

使用长非编码RNA（HULC）控制丙型肝炎病毒感染

• 发表时间: 2021
• 作者: 島上哲朗;本多政夫;金子周一
• 通讯作者: 金子周一

Application of human syncytin1-derived fusogenic peptide to direct intracellular delivery of Cas9 protein-gRNA complex

应用人合胞素1衍生的融合肽指导Cas9蛋白-gRNA复合物的细胞内递送

• 发表时间: 2021
• 作者: Furuya;T.;Fujiwara;K.;Doi;N.
• 通讯作者: N.

Restorative effect of adipose tissue-derived stem cells on impaired hepatocytes through Notch signaling in non-alcoholic steatohepatitis mice

• DOI: 10.1016/j.scr.2021.102425
• 发表时间: 2021-06-10
• 期刊: STEM CELL RESEARCH
• 影响因子: 1.2
• 作者: Ishida，Kosuke;Seki，Akihiro;Sakai，Yoshio
• 通讯作者: Sakai，Yoshio

Endothelial cells affect HBV replication in hepatocytes in a non-contact manner

内皮细胞以非接触方式影响肝细胞内的HBV复制

• 发表时间: 2021
• 作者: Tetsuhiro Shimode;Kazunori Kawaguchi;Masao Honda;Yoshio Sakai;Tatsuya Yamashita;Eishiro Mizukoshi;Shuichi Kaneko
• 通讯作者: Shuichi Kaneko