Growth mechanism in animal eye development regulated by placental C3 and analysis of placenta derived factors for precocial neonates

ニワトリでは胎生期に補体因子C3aと受容体C3aRが網膜の細胞分化に関わることが知られている。我々は以前に、妊娠マウスにおいて補体因子が様々な組織で産生されていることを示している。母体由来のC3aが胎子の眼球形成に寄与するか、その可能性を検討した。眼胞～眼杯の形成期に相当する胎齢10～14日のマウス胎子、および同時期の母体を用いた。胎子頭部、母体の肝臓、胎盤、乳腺について、ウェスタンブロットで前駆体C3とC3aを検出し、10～14日における動態変化を調べた。同じサンプルについてmRNAを抽出し、リアルタイムPCRでC3aRの遺伝子発現を解析した。免疫染色によりC3とC3aの局在部位について調べた。母体組織ではC3タンパクが妊娠10～14日で持続的に検出された。C3aも同様に妊娠10日で検出され、とくに胎盤と乳腺組織で著明であった。胎子組織においてもC3が含まれていることが10日齢から確認できたが、C3aが検出できるようになったのは14日齢であった。C3aの受容体であるC3aR遺伝子は、胎子において発現頻度が非常に低かった。調査期間で発現が高かった時期は12日であったが、すでに眼胞期には終了しており、網膜細胞の初期分化には影響しないことが予測された。C3aタンパクの陽性反応は網膜において認められず、水晶体に局在していた（14日齢）。前駆体を含むC3タンパクは12・14日齢の眼球において、硝子体血管と網膜最内層が強い陽性反応を示し、閉鎖しつつある水晶体腔の周囲においても弱陽性反応が見られた。ニワトリの網膜分化に重要と考えられているC3a/C3aRは、マウスの網膜の細胞分化には関与性が低いと考えられた。一方で、マウス胎子は母体組織からC3の供給を受けており、眼球においても血行性に分布していることが予測された。細胞分化以外のC3に依存した生理機序、例えばマクロファージによる貪食誘導機序などが、眼球の発生・成長過程に関与する可能性が考えられた。

ニワトリでは胎生期に補体因子C3aと受容体C3aRが網膜の細胞分化に関わることが知られている。我々は以前に、妊娠マウスにおいて補体因子が様々な組織で産生されていることを示している。母体由来のC3aが胎子の眼球形成に寄与するか、その可能性を検討した。眼胞～眼杯の形成期に相当する胎齢10～14日のマウス胎子、および同時期の母体を用いた。胎子頭部、母体の肝臓、胎盤、乳腺について、ウェスタンブロットで前駆体C3とC3aを検出し、10～14日における動態変化を調べた。同じサンプルについてmRNAを抽出し、リアルタイムPCRでC3aRの遺伝子発現を解析した。免疫染色によりC3とC3aの局在部位について調べた。母体組織ではC3タンパクが妊娠10～14日で持続的に検出された。C3aも同様に妊娠10日で検出され、とくに胎盤と乳腺組織で著明であった。胎子組織においてもC3が含まれていることが10日齢から確認できたが、C3aが検出できるようになったのは14日齢であった。C3aの受容体であるC3aR遺伝子は、胎子において発現頻度が非常に低かった。調査期間で発現が高かった時期は12日であったが、すでに眼胞期には終了しており、網膜細胞の初期分化には影響しないことが予測された。C3aタンパクの陽性反応は網膜において認められず、水晶体に局在していた（14日齢）。前駆体を含むC3タンパクは12・14日齢の眼球において、硝子体血管と網膜最内層が強い陽性反応を示し、閉鎖しつつある水晶体腔の周囲においても弱陽性反応が見られた。ニワトリの網膜分化に重要と考えられているC3a/C3aRは、マウスの網膜の細胞分化には関与性が低いと考えられた。一方で、マウス胎子は母体組織からC3の供給を受けており、眼球においても血行性に分布していることが予測された。細胞分化以外のC3に依存した生理機序、例えばマクロファージによる貪食誘導機序などが、眼球の発生・成長過程に関与する可能性が考えられた。