VIrome analysis of bats in Indonesia

コウモリは人に致死的な肺炎、出血熱、脳炎、狂犬病 等の自然宿主と考えられている。現在の国際社会のCOVID-19の感染状況において、飛行機等による交通は制限されており、出入国の際には検疫が必要である。斯かる状況において、私達が海外において疫学活動を実施し、コウモリの検体を入手すること、および、海外からコウモリの検体を日本に輸送することは極めて困難である。そこで本研究計画では、申請者の所属する研究施設に保管されているインドネシアのコウモリから採集した検体を使用することによって、海外に渡航する困難を克服できる。コウモリは3つの島 （スマトラ、ジャワ、スラウェシ）から採集しており、インドネシア地域でのウイルスの多様性を確認することが可能である。多くのウイルスの自然宿主であるコウモリにおいて、新規・既知のウイルスの存在を明らかにすることを計画する。公衆衛生学的に重要と考えられるコウモリ由来のウイルスの存在を明らかにすることを本研究の目的とする。令和4年度においては我々の研究グループが2010年から2014年にかけて、スマトラ、ジャワ、スラウェシで採集したコウモリを対象とし血清(133検体）、糞便(96検体）および肺（172検体）を用いて、ネルソンベイオルソレオウイルスの血清疫学調査、ゲノムの検出、ウイルスの単離を試みた。その結果、血清(133検体）の内119検体で中和抗体が陽性であること、nested RT-PCR法を用いて、糞便96検体中6検体からウイルスゲノムを検出した。肺172検体からはゲノムは検出出来なかった。さらに、ゲノムが陽性であった糞便検体を、ウイルス感染を増強させることを目的として、セリンプロテアーゼであるTMPRSS2を強制発現させたVero細胞に接種してウイルスを単離した。最終的に単離したウイルスゲノムの分子系統学的解析、細胞での増殖の解析、マウスへの病原性の解析を実施した。

コウモリは人に致死的な肺炎、出血熱、脳炎、狂犬病 等の自然宿主と考えられている。現在の国際社会のCOVID-19の感染状況において、飛行機等による交通は制限されており、出入国の際には検疫が必要である。斯かる状況において、私達が海外において疫学活動を実施し、コウモリの検体を入手すること、および、海外からコウモリの検体を日本に輸送することは極めて困難である。そこで本研究計画では、申請者の所属する研究施設に保管されているインドネシアのコウモリから採集した検体を使用することによって、海外に渡航する困難を克服できる。コウモリは3つの島 （スマトラ、ジャワ、スラウェシ）から採集しており、インドネシア地域でのウイルスの多様性を確認することが可能である。多くのウイルスの自然宿主であるコウモリにおいて、新規・既知のウイルスの存在を明らかにすることを計画する。公衆衛生学的に重要と考えられるコウモリ由来のウイルスの存在を明らかにすることを本研究の目的とする。令和4年度においては我々の研究グループが2010年から2014年にかけて、スマトラ、ジャワ、スラウェシで採集したコウモリを対象とし血清(133検体）、糞便(96検体）および肺（172検体）を用いて、ネルソンベイオルソレオウイルスの血清疫学調査、ゲノムの検出、ウイルスの単離を試みた。その結果、血清(133検体）の内119検体で中和抗体が陽性であること、nested RT-PCR法を用いて、糞便96検体中6検体からウイルスゲノムを検出した。肺172検体からはゲノムは検出出来なかった。さらに、ゲノムが陽性であった糞便検体を、ウイルス感染を増強させることを目的として、セリンプロテアーゼであるTMPRSS2を強制発現させたVero細胞に接種してウイルスを単離した。最終的に単離したウイルスゲノムの分子系統学的解析、細胞での増殖の解析、マウスへの病原性の解析を実施した。