ドーパミンとコトランスミッターから探る学習・忘却メカニズムの解析

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研究計画に沿って、今年度はショウジョウバエに外部刺激を与えたときの、キノコ体周辺回路におけるグルタミン酸とGABAのin vivoイメージング解析を中心に実施した。GABAに関しては刺激に対する応答は得られなかったが、これは本当に刺激に依存したGABAの放出が見られないということなのか、センサーの検出感度不足によるものなのか、薬理学的解析や極端な条件で検出できるか等の実験によって検証したい。一方で、グルタミン酸の放出は匂い刺激によって検出することができたが、学習前後の比較をするには検出感度が不十分であり、最新のセンサー（iGluFnSR3）を導入することとした。また、グルタミン酸がどの細胞から放出されているかを変異体解析などによって試みたが、発生的な要因によりグルタミン酸放出の変異とセンサーの共存ができないことがわかった。これを回避するため、今後は発生後のみに変異導入した個体で測定が可能かどうかを模索していく。ドーパミン放出との相関について探るため、緑色グルタミン酸センサー(iGluSnFR)、赤色ドーパミンセンサー(rDA1m)を用いて２色での測定を試みたが、赤色ドーパミンセンサーの検出感度が低く、現状では実現は難しいことがわかった。これを解決するため、新型の赤色ドーパミンセンサーRdLight1のトランスジェニックフライを作製し、現在その性能評価を行なっている。行動実験に関しては既に論文を投稿し、現在査読中である。