エキソソームによるαシヌクレインの末梢組織から中枢神経への拡散機序の解明

阐明外泌体从外周组织到中枢神经系统的α-突触核蛋白扩散机制

• 批准号: 21K07444
• 负责人: 常深 泰司
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07444/
• 关键词: パーキンソン病; アルファシヌクレイン; 血管脳関門; iPS細胞

シヌクレイノパチーはシナプス前タンパク質であるα-シヌクレイン(a-syn)の異常凝集を特徴とする疾患群である。パーキンソン病(PD)やレヴィ小体型認知症は末梢組織に蓄積したα-シヌクレイン(a-syn)の異常構造体がシードとなりが脳内に移行し伝播することが有力視されている。その経路として当初は自律神経の軸索を経た輸送経路が考えられたが、マウスを用いた動物実験では脳幹までしか広がらなかった。一方、PD患者の剖検脳や動物実験から、PDにおいて血液脳関門(BBB)の破綻が報告されており、ここを介して液性因子による伝播の可能性も考えられる。これから、申請者らは末梢組織に蓄積したシードがBBBを通過して脳内に侵入すると仮説した。この仮説の実証とPDの重要な背景因子である遺伝子の影響を解明するためにはヒトiPS細胞を用いたBBBモデル(iPSC-derived BBB; iBBB)の構築が必須と考えた。健常人とSNCA A53T変異を有するPD患者のiPS細胞からプロトコールに則りBBB構成細胞である血管内皮細胞、壁細胞、星状細胞への分化を行なった。各々の細胞への分化は免疫染色にて確認した。さらに機能解析にて血管内皮細胞は、サイズ依存性の透過性、選択的透過性及びエンドサイトーシス機能を有していた。これらの３種類の細胞を共培養して作成したiBBBはバリア機能が増加し、これまでの不死化細胞を用いたBBBの細胞モデルと同等のモデルをヒトiPS細胞を用いて作成することに成功した。さらにSNCA A53T変異を有するiBBBは健常人と比べて透過性が変化していることを見出した。またエキソソームはBBBをより通過しやすいことが判明した。

シ ヌ ク レ イ ノ パ チ ー は シ ナ プ ス before タ ン パ ク qualitative で あ る alpha シ ヌ ク レ イ ン (a - syn) abnormal の agglutinate を 徴 と す る disease group で あ る. パ ー キ ン ソ ン disease (PD) や レ ヴ ィ small body size of cognitive disorder は peripheral tissue に accumulation し た alpha シ ヌ ク レ イ ン (a - syn) の abnormal constructs が シ ー ド と な り が 脳 に in transitional し 伝 sowing す る こ と が powerful visual さ れ て い る. そ の 経 road と し て は self-discipline first god 経 の axon を 経 た conveying が 経 road test え ら れ た が, マ ウ ス を with い た animals be 験 で は 脳 dry ま で し か hiroo が ら な か っ た. Side and PD patients の 検 脳 や animals be 験 か ら, PD に お い て blood 脳 masato door (BBB) flaw の が report さ れ て お り, こ こ を interface し て liquidity factor に よ る 伝 sowing の possibility も exam え ら れ る. こ れ か ら, applicants ら は peripheral tissue に accumulation し た シ ー ド が BBB を through し て in 脳 に intrusion す る と 仮 said し た. こ の 仮 said の card be と PD の な background factors で あ る posthumous son 伝 の influence を interpret す る た め に は ヒ ト iPS cells を using い た BBB モ デ ル (iPSC - derived BBB; iBBB) の build が must と え た. The healthy human と SNCA A53T - different を have す る PD patients の iPS cells か ら プ ロ ト コ ー ル に is り BBB component cells で あ る vascular endothelial cells, parietal cells, stellate cells へ の differentiation を line な っ た. Each 々 <s:1> cell へ <s:1> differentiation へ immunostaining にて confirmation of <s:1> た. さ ら に function analytical に て は vascular endothelial cells, サ イ ズ dependency の permeability and permeability, sentaku び エ ン ド サ イ ト ー シ ス function を have し て い た. を こ れ ら の 3 kinds の cell co-culture し て made し た iBBB は バ リ ア function が raised し, こ れ ま で の die change cells を using い た BBB の cells モ デ ル と equal の モ デ ル を ヒ ト iPS cells を using い て made す る こ と に successful し た. さ ら に SNCA A53T - different を have す る iBBB は healthy normal と than べ て permeability が variations change し て い る こ と を shows し た. Youdaoplaceholder0 またエキソソ ム ム ム BBBをよ determine た by <s:1> やす とが とが とが とが.

项目成果

Altered levels of exosomal secretion affect α-synuclein accumulation and propagation in brains

外泌体分泌水平的改变影响 α-突触核蛋白在大脑中的积累和传播

• 发表时间: 2021
• 作者: Taiji Tsunemi;Yuta Ishiguro;Asako Yoroisaka;Nobutaka Hattori
• 通讯作者: Nobutaka Hattori

21.Blood-brain barrier: a novel therapeutic target for neurological disorders.

21.血脑屏障：神经系统疾病的新治疗靶点。

• 发表时间: 2022
• 作者: 松下拓也;西村由宇慈;眞崎勝久;松瀬大;山口浩雄;吉良潤一;磯部紀子;藤岡伸助;岩崎 靖;Taiji Tsunemi AND Nobutaka Hattori
• 通讯作者: Taiji Tsunemi AND Nobutaka Hattori

Establishment of iPSC derived-Blood Brain Barrier

iPSC衍生血脑屏障的建立

• 发表时间: 2022
• 作者: Tomoyo Shimada;Asako Yoroisaka;Taiji Tsunemi;Nobutaka Hattori
• 通讯作者: Nobutaka Hattori

Glial exosomal secretion contributes to α-synuclein accumulation and propagation in brains

胶质细胞外泌体分泌有助于 α-突触核蛋白在大脑中的积累和传播

• 发表时间: 2022
• 作者: Taiji Tsunemi;Yuta Ishiguro;Asako Yoroisaka;Tomoyo Shimada;Wado Akamatsu;Nobutaka Hattori
• 通讯作者: Nobutaka Hattori

Exosomal alpha-synuclein filaments as a novel biomarker for Parkinson's disease

外泌体α-突触核蛋白丝作为帕金森病的新型生物标志物

• 发表时间: 2021
• 作者: Yuta Isiguro;Taiji Tsunemi;Asako Yoroisaka;Nobutaka Hattori
• 通讯作者: Nobutaka Hattori