癌促進型分岐点の制御に着目した新規食道癌治療の分子基盤

新型食管癌治疗的分子基础，重点是控制促癌分支点

• 批准号: 21K07971
• 负责人: 増田 清士
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kawasaki Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07971/
• 关键词: RNA結合蛋白質; 食道扁平上皮癌; TIA1

(1) TIA1遺伝子のスプライシングを制御する因子の同定これまで癌の発生や進展に関与すると報告のあるスプライシング制御因子をリスト化し、siRNAを用いて各々をノックダウンした細胞でTIA1aとTIA1bの発現量をqPCRおよびウェスタンブロット法を用いて検討した。この結果、TIA1a型スプライシングを促進する蛋白質XとTIA1b型スプライシングを促進する蛋白質Yを同定した。また、TIA1遺伝子のexon 5領域を含むミニジーンで検討した結果、蛋白質Xノックダウン細胞でTIA1a型スプライシングが、蛋白質Yノックダウン細胞でTIA1b型スプライシングが確認された。さらに、蛋白質X特異的抗体を用いて免疫沈降した結果、TIA1 pre-mRNAとの結合が確認された。このことから、蛋白質XがTIA1遺伝子の癌促進型スプライシングを制御する因子であると考えられる。（2） スプライシング制御因子の発現変動が癌細胞の悪性形質化に与える影響に関する検討蛋白質Xまたは蛋白質Yノックダウン細胞を用いて検討を行った。蛋白質Xノックダウン細胞では細胞増殖が有意に抑制され、アポトーシスの亢進が確認された。また、スフェロイド形成も有意に抑制された。一方、蛋白質Yノックダウン細胞は予想に反して細胞増殖能の亢進が認められず、やや抑制される傾向が見られた。今後、遊走能や浸潤能について創傷治癒アッセイやボイデンチャンバー法を用いて検討する予定にしている。以上の結果から、蛋白質XはTIA1遺伝子のスプライシングを癌促進型にスイッチし、TIA1a優位の発現とすることで癌の進展を促進する可能性が示唆された。また、蛋白質XがTIA1aの細胞内機能に対する特異的な介入点の一つであると考えている。

(1) TIA1 posthumous son 伝 の ス プ ラ イ シ ン グ を suppression す る factor の with fixed こ れ ま で carcinoma の 発 raw や progress に masato and す る と report の あ る ス プ ラ イ シ ン グ suppression factor を リ ス ト し, siRNA を with い て each 々 を ノ ッ ク ダ ウ ン し た cells で TIA1a と TIA1b の 発 now quantity を qPCR お よ び ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト The law を uses を て検 to claim た. こ の results, TIA1a ス プ ラ イ シ ン グ を promote す る protein X と TIA1b type ス プ ラ イ シ ン グ を promote す る protein Y を be し た. ま た, TIA1 but 伝 の を exon 5 field containing む ミ ニ ジ ー ン で beg し 検 た results, protein X ノ ッ ク ダ ウ で ン cell type TIA1a ス プ ラ イ シ ン グ が, protein Y ノ ッ ク ダ ウ で ン cell type TIA1b ス プ ラ イ シ ン グ が confirm さ れ た. を さ ら に, protein X specific antibody with い て immune sink し た results, TIA1 pre - mRNA と の combining が confirm さ れ た. こ の こ と か ら, protein X が TIA1 posthumous son 伝 の carcinoma promotion ス プ ラ イ シ ン グ を suppression す る factor で あ る と exam え ら れ る. (2) ス プ ラ イ シ ン グ suppression factor の 発 now - move が cancer の 悪 form qualitative に and え る influence に masato す る 検 for protein X ま た は protein Y ノ ッ ク ダ ウ ン cells を using い て 検 line for を っ た. Protein X ノ ッ ク ダ ウ ン cells で は cells raised colonization が intentionally に inhibit さ れ, ア ポ ト ー シ ス の hyperthyroidism が confirm さ れ た. Youdaoplaceholder0 and スフェロ ド ド form また intentional に inhibition された. Party, protein Y ノ ッ ク ダ ウ は ン cells to think に anti し て cells raised colonization の hyperthyroidism が recognize め ら れ ず, や や inhibit さ れ る tendency が see ら れ た. Can in the future, can walk や infiltration に つ い て wounds heal ア ッ セ イ や ボ イ デ ン チ ャ ン バ を ー method with い て beg す 検 る designated に し て い る. の above results か ら, protein X は TIA1 posthumous son 伝 の ス プ ラ イ シ ン グ を carcinoma promotion に ス イ ッ チ し, TIA1a optimal の 発 now と す る こ と で carcinoma の progress を promote す が る possibility in stopping さ れ た. Youdaoplaceholder0, protein XがTIA1a <s:1> intracellular function に for する specific な intervention points えて であると であると examination えて る る る る る る