全脳虚血後海馬グリア細胞におけるTGF-β1/Smadシグナルの機能的意義の解明

全脑缺血后海马胶质细胞TGF-β1/Smad信号的功能意义阐明

• 批准号: 21K08927
• 负责人: 中島 崇行
• 金额: $ 2.33万
• 依托单位: Osaka Metropolitan University (2022)Osaka Prefecture University (2021)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08927/
• 关键词: TGF-beta; アストロサイト; ミクログリア; 海馬; 全脳虚血; Smad; TGF-β; グリア細胞

今年度はin vitro虚血模擬実験系でのグリア細胞における細胞増殖および貪食能について調べた。具体的にはニューロンーグリア共培養細胞に酸素/グルコース除去（OGD）処置を負荷することによって神経細胞を死滅させ、その培養上清を別に用意した混合グリア細胞に添加した。コントロール実験として、OGD未負荷のニューロンーグリア共培養細胞の上清を混合グリア細胞に添加した。細胞増殖は、OGD負荷ニューロン-グリア共培養細胞由来の上清をグリア細胞に添加してから１日後にMTTアッセイによって評価した。すると、OGD負荷培養細胞由来上清添加を受けたグリア細胞では、コントロールグリア細胞よりもMTTアッセイの測定値が高くなり、OGD負荷培養細胞由来上清にグリア細胞増殖誘導効果があると思われた。OGD負荷培養細胞由来上清によって誘導されるグリア細胞増殖へのTGF-β1（10mg/ml）の影響を調べたところ、TGF-β1はOGD負荷培養細胞由来上清誘導性のグリア細胞増殖を変化させなかった。TGF-β1（10mg/ml）はその下流シグナルであるSmadをリン酸化させる効果を有していた。一方、OGD負荷培養細胞由来上清誘導性のグリア細胞増殖へのTGF-βシグナル阻害剤であるSB525334（10mg/ml）あるいはP144の影響を調べたところ、いずれの薬剤もグリア細胞を減少させる効果を発揮した。SB525334およびP144によるグリア細胞減少効果はOGD負荷ニューロン-グリア共培養細胞由来上清添加の有無にかかわらず認められた。これらの結果はTGF-βシグナルがグリア細胞の生存に必要な因子であることを示唆する。貪食能についてはOGD負荷培養細胞由来の上清をグリア細胞に添加してから１日後に蛍光ビーズ取り込み能によって評価した。その結果、OGD負荷培養細胞由来上清は蛍光ビーズ取り込み能を変化させなかった。

This year's in vitro blood deficiency simulation system is a process of cell proliferation and gluttony. The specific purpose of this study is to treat the cell death and culture supernatant of the co-cultured cells with OGD. The supernatant of co-cultured cells was mixed with the supernatant of OGD unloaded cells. Cell culture, OGD loading, cell culture supernatant, MTT assay 1 day after cell culture OGD load culture cells from the supernatant added to the cell culture medium, the MTT assay value is high, OGD load culture cells from the supernatant added to the cell culture medium, the cell proliferation induction effect is high. The effect of TGF-β1 (10mg/ml) on cell proliferation induced by supernatant in OGD load culture was investigated. TGF-β1 (10mg/ml) was found to be effective in the treatment of chronic diseases. The effect of TGF-β inhibitor SB525334 (10mg/ml) on cell proliferation induced by OGD was investigated. SB525334 and P144 were added to the supernatant of co-cultured cells. These results indicate that TGF-β is essential for cell survival. Gluttony can be detected in the supernatant of OGD load culture cells. The results of OGD load culture were as follows: supernatant, supernatant, supernatant

项目成果

The expression and phosphorylation of SMAD3 protein in microglia and astrocytes of the rat hippocampus after transient global cerebral ischemia

• DOI: 10.1016/j.jchemneu.2022.102146
• 发表时间: 2022-08-27
• 期刊: JOURNAL OF CHEMICAL NEUROANATOMY
• 影响因子: 2.8
• 作者: Nakajima，Takayuki;Tanaka，Yuki;Takenaka，Shigeo
• 通讯作者: Takenaka，Shigeo

全脳虚血後の海馬アストロサイトにおけるSmad1/5/9発現とリン酸化について

全脑缺血后海马星形胶质细胞Smad1/5/9的表达及磷酸化

• 发表时间: 2021
• 作者: 田中 勇気;中島崇行
• 通讯作者: 中島崇行

全脳虚血後の海馬グリア細胞におけるSmad3発現とリン酸化の経時的変化

全脑缺血后海马胶质细胞Smad3表达及磷酸化的时程

• 发表时间: 2021
• 作者: Kamiya Satoshi;Nakamura Ryuji;Saeki Noboru;Kondo Takashi;Miyoshi Hirotsugu;Narasaki Soushi;Morio Atsushi;Kawamoto Masashi;Hirano Harutoyo;Tsuji Toshio;Tsutsumi Yasuo M.;田中 勇気・中島 崇行
• 通讯作者: 田中 勇気・中島 崇行

全脳虚血ラット海馬グリア細胞におけるSmadの活性とその役割について

全脑缺血大鼠海马胶质细胞Smad活性及其作用

• 发表时间: 2022
• 作者: 中村 勝也;大西 秀哉;古賀 智子;永井 俊太郎;山崎 章生;大薗 慶吾;中村 雅史;中島崇行
• 通讯作者: 中島崇行