コレステロール誘導体による生体内脂質の新規合成制御機構の解明

使用胆固醇衍生物阐明体内脂质合成的新调节机制

• 批准号: 20K07329
• 负责人: 安戸 博美
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Dokkyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K07329/
• 关键词: リン脂質; コレステロール; 細胞膜; ヒストンアセチル化; p300; NF-Y

これまでに我々は、細胞膜を構成する主要な脂質であるホスファチジルエタノールアミン(PE)と、コレステロールの合成制御機構に注目し解析を進めてきた。その結果、それら脂質の合成がコレステロール誘導体(オキシステロール)により同様の機構で制御される事を明らかにしてきた。オキシステロールは転写因子NF-Yによるヒストンアセチル化を抑制し、PE合成の律速酵素ETおよびコレステロール合成の律速酵素Hmgcrの転写を負に制御することが明らかになった。その制御機構の詳細を分子基盤から明らかにする。1.ETおよびHmgcrのオキシステロールによる転写抑制機構の解明転写促進因子NF-YはETやHmgcrのプロモーターに結合し、ヒストンアセチル化酵素p300をリクルートする。p300はヒストンをアセチル化し転写を正に制御する。 代表的なオキシステロールである25-HCはこのp300のリクルート、ヒストンアセチル化を阻害し転写を抑制する。我々が見出した以上の研究成果を踏まえ、p300とNF-YBの直接の結合や25-HCによる転写因子複合体の変化を確認するための実験を進めている。2.PEの合成制御により細胞膜のホスファチジルコリン(PC)とPE比の異常が改善されるのかPCとPEは細胞膜を構成する主要なリン脂質である。PC/PE比の低下により発生したマウスの脂肪肝、肝不全がその量比を人為的に正常に戻すことで改善するという報告があるため、PC合成の律速酵素CTαのKO細胞を作成しPC、そしてPC/PE比を低下させる。そこにオキシステロールを投与しPEを低下させ、PC/PE比が正常に戻るのか確認する。また、PCを低下させたことによる細胞内のリン脂質組成の変化をLC-MS/MSを用いて評価する。上記を目的としてCTαのKO細胞を作成し、LC- MS/MSを用い細胞内のリン脂質の解析を行っている。

こ れ ま で に I 々 は, cell membrane を す る main な lipid で あ る ホ ス フ ァ チ ジ ル エ タ ノ ー ル ア ミ ン と (PE), コ レ ス テ ロ ー ル の synthesis system of the royal institution に attention し parsing を into め て き た. そ の results, そ れ ら lipid の synthetic が コ レ ス テ ロ ー ル inductor (オ キ シ ス テ ロ ー ル) に よ り with others の institutions で suppression さ れ る matter を Ming ら か に し て き た. オ キ シ ス テ ロ ー ル は planning write factor NF - Y に よ る ヒ ス ト ン ア セ チ ル を rejection し, PE synthetic の law velocity enzyme ET お よ び コ レ ス テ ロ ー ル speed of enzyme synthesis の law this enzyme の planning write を negative に suppression す る こ と が Ming ら か に な っ た. Youdaoplaceholder0 <s:1> control mechanism <e:1> details を molecular base plate ら Ming ら ら にする にする. 1. ET お よ び this enzyme の オ キ シ ス テ ロ ー ル に よ る planning write inhibit institutions の interpret planning write promoting factor NF - Y は ET や this enzyme の プ ロ モ ー タ ー に し, ヒ ス ト ン ア セ チ ル phenoloxidase p300 を リ ク ル ー ト す る. p300 ヒスト ヒスト をアセチ をアセチ をアセチ 転 を write を regular に control する. Represent な オ キ シ ス テ ロ ー ル で あ る 25 - HC は こ の p300 の リ ク ル ー ト, ヒ ス ト ン ア セ チ ル change を resistance against し planning write を inhibit す る. Out my 々 が し た の above research tread を ま え, p300 と NF - YB の の directly combined with や 25 - HC に よ る planning write factor complex の variations change を confirm す る た め の be 験 を into め て い る. 2. の synthetic PE suppression に よ り membrane の ホ ス フ ァ チ ジ ル コ リ ン (PC) と PE than の abnormal が improve さ れ る の か PC と は PE membrane を constitute す る main な リ ン lipid で あ る. PC/PE than low の に よ り 発 raw し た マ ウ ス の fatty liver, liver insufficiency が そ の than を man-made に normal に 戻 す こ と で improve す る と い う report が あ る た め, PC synthetic enzymes that CT alpha の KO の law speed を し PC, consummate そ し て PC/PE than low を さ せ る. そ こ に オ キ シ ス テ ロ ー ル を cast with low し PE を さ せ, PC/PE than normal に が 戻 る の か confirm す る. Low ま た, PC を さ せ た こ と に よ る intracellular の リ ン lipid composition の variations change を LC - MS/MS を い て review 価 す る. Written を purpose と し て CT alpha を の KO cells make し, LC - MS/MS を い intracellular の リ ン lipid の parsing line を っ て い る.

项目成果

リン脂質・コレステロールのオキシステロールによる合成制御に関与する転写因子とその機構解析

氧甾醇调节磷脂/胆固醇合成的转录因子及其机制分析

• 发表时间: 2021
• 作者: 安戸博美;堀端康博;杉本博之
• 通讯作者: 杉本博之

細胞膜を構成するリン脂質・コレステロールのオキシステロールによる合成制御機構

构成细胞膜的磷脂和胆固醇的氧甾醇的合成控制机制

• 发表时间: 2020
• 作者: 井田智章;西村 明;守田匡伸;Jung Minkyung;松永哲郎;居原 秀; 本橋ほづみ;赤池孝章;安戸博美
• 通讯作者: 安戸博美

Regulation of Glycerophospholipid and Cholesterol Synthesis in Cells by Hydroxylated Cholesterols (Oxysterols)

羟基化胆固醇（氧甾醇）对细胞内甘油磷脂和胆固醇合成的调节

• DOI: 10.51040/dkmj.2022-018
• 发表时间: 2022
• 期刊: Dokkyo Medical Journal
• 作者: Ando H;Shinohara Y;Arai M;Yamashita S;Sugimoto H
• 通讯作者: Sugimoto H

Transcription of cytochrome P450 46A1 in NIH3T3 cells is negatively regulated by FBS

NIH3T3 细胞中细胞色素 P450 46A1 的转录受到 FBS 的负调控

• DOI: 10.1016/j.bbalip.2022.159136
• 发表时间: 2022
• 期刊: Biochim Biopys Acta Mol Cell Biol Lipids
• 作者: Shinohara Y;Ando H;Maekawa M;Arai M;Horibata Y;Satou M;Jojima T;Usui I;Aso Y;Sugimoto H.
• 通讯作者: Sugimoto H.