クラッベ病に対するマイクロRNAの病態改善効果とその作用機序の解明

阐明microRNA对克拉伯病的病理改善作用及其作用机制

• 批准号: 20K08248
• 负责人: 稲村 直子
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Institute for Developmental Research Aichi Developmental Disability Center
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K08248/
• 关键词: twitcher; オリゴデンドロサイト; ミエリン; miRNA; ライソゾーム病; ライソソーム病

本年度は主に以下の実験を行った。１）マイクロRNA発現によりtwitcherマウスオリゴデンドロサイト（OL）で変動する遺伝子をさらに探査するための網羅的解析、２）in vivoでのマイクロRNAの効果を調べるためのアデノ随伴ウイルスを用いたマウス脳内でのOL特異的なマイクロRNAの発現、である。まず網羅的解析については、野生型マウスOL、twitcherマウスOL、マイクロRNAを発現させたtwitcherマウスOLをそれぞれサンプルとして用いRNA-seqを行った。変動遺伝子の条件として、野生型マウスOLに対してtwitcherマウスOLで増加/減少し、かつtwitcherマウスOLに対してマイクロRNAを発現させたtwitcherマウスOLで減少/増加する遺伝子を探索したが、それぞれの条件において変動遺伝子の数が少なかった。現在しきい値を変えるなど条件を変えてさらに解析を進めている。次にアデノ随伴ウイルスを用いたマウス脳内でのOL特異的なマイクロRNAの発現では、OLにアデノ随伴ウイルスを最も発現効率良く導入する条件を求める条件検討を行った。方法として生後1週から5週までの様々な時期のマウスにOL特異的なマーカーであるヒト環状ヌクレオチドホスホジエステラーゼ（hCNP）プロモーターでドライブされる蛍光色素ZsGreen1 に マイクロRNA をつないだアデノ随伴ウイルスベクターを眼窩静脈叢から投与し、ZsGreen陽性細胞の数により発現効率を調べた。その結果マウスの脳でミエリン形成が最も盛んにおこるとされる生後10日から２週前後に導入すると最も多くの発現細胞がみられた。この発現細胞のほとんどが成熟OLのマーカーであるCC1陽性であったので、OLにマイクロRNAを導入する最も発現効率の良い条件を得たと考えられる。

This year, the following actions were taken: 1) Analysis of RNA Expression in Vivo 2) Detection of RNA Expression in Vivo The analysis of the network is carried out in the wild type, such as OL, twitcher OL, RNA, etc. The number of mutant genes in the wild type is increased/decreased due to the presence of mutant genes in the wild type and increased/decreased due to the presence of mutant genes in the wild type. Now, if you want to change your mind, you can change your mind. The conditions for the occurrence of OL-specific RNA in the system are discussed. Methods: From 1 week to 5 weeks after birth, the number of OL-specific cells in the orbital venous plexus and the number of ZsGreen positive cells in the orbital venous plexus were adjusted. The result is that the most abundant cells are introduced from 10 days to 2 weeks after birth. The best conditions for the development of mature OL cells were found in CC1 positive cells.

项目成果

Reduction in miR-219 expression underlies cellular pathogenesis of oligodendrocytes in a mouse model of Krabbe disease.

• DOI: 10.1111/bpa.12951
• 发表时间: 2021-09
• 期刊: Brain pathology (Zurich, Switzerland)
• 作者: Inamura N;Go S;Watanabe T;Takase H;Takakura N;Nakayama A;Takebayashi H;Matsuda J;Enokido Y
• 通讯作者: Enokido Y

miR-219 restored oligodendrocyte development impaired in a mouse model of Krabbe disease

miR-219 恢复克拉伯病小鼠模型中受损的少突胶质细胞发育

• 发表时间: 2022
• 作者: Inamura N;Go S;Watanabe T;Takase H;Nakayama A;Takebayashi H;Matsuda J;Enokido Y
• 通讯作者: Enokido Y

miR-219 ameliorates pathogenesis of oligodendrocyte in a mouse model of Krabbe disease.

miR-219 改善克拉伯病小鼠模型中少突胶质细胞的发病机制。

• 发表时间: 2021
• 作者: Inamura N;Go S;Watanabe T;Takase H;Nakayama A;Takebayashi H;Matsuda J;Enokido Y
• 通讯作者: Enokido Y

先天性脱髄疾患の原因となるオリゴデンドロサイトの細胞死を防ぐマイクロ RNA を発見

发现可防止少突胶质细胞死亡的 microRNA，少突胶质细胞会导致先天性脱髓鞘疾病