Rett症候群に対するMECP2発現調節等を介した遺伝子治療法開発

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本研究では、MECP2関連疾患であるRett症候群の遺伝子治療開発を目的としている。Rett症候群は女児に発症しMECP2の変異により生じるが、MECP2の重複男児でも重度知的障害、難治性てんかんを発症する。すなわちRett症候群の遺伝子導入治療ではMECP2の発現が過剰であっても機能異常を来すため、導入する遺伝子の発現量を調節する方法や別の方法の開発が不可欠である。昨年度は、Rett症候群のモデル動物であるMecp2欠損マウスのヘテロ雌及びヘミ雄の繁殖を開始し、初年度に作成したRett症候群に対する遺伝子治療用のアデノ随伴ウイルス(AAV)ベクターを投与した。運動障害等の評価の改善、組織や神経細胞の変化を観察を継続している。本年度は、MECP2発現量の抑制コントロール法の検討としてMECP2関連疾患のMECP2重複症候群で、micro RNA(miRNA)を応用したMECP2の発現を抑制する方法について検討しており、神経形成の研究の中でも特にmiRNAの知識が豊富であるBalor College of Medicineの海外共同研究者、Ronald Parchem博士の所属する研究室にて、申請者が2022年7月より研究を行いmiRNAに関する指導を受けている。特に、MECP2をターゲットとするmiRNAの一つであるmiR302は神経発生に大きく関与するmiRNAで、ノックアウトにより神経管の閉鎖が障害されマウスは胎生致死となるが、miR302のヘテロ接合性欠損マウスは生存可能であり、発現量に依存して神経発生に与える影響が変わることが示されており、miR302が神経発生に影響を与える機序の解明も含め、MECP2重複症候群においてMECP2の発現を抑制する方法として検討している。また、現在行っている疾患モデルマウスの検討とともに、患者細胞由来のヒト組織の両面で治療評価を行うために、脳オルガノイドを再現性を保ちつつ作成する手法の検討を行っている。今後、患者iPS細胞を用い、神経細胞や脳オルガノイドを作成し、中枢神経系の評価系を確立していく見込みである。