Development of therapeutically active nanomaterials: lipoprotein structure/function-based therapeutic strategies to treat intractable ocular diseases

治疗活性纳米材料的开发：基于脂蛋白结构/功能的治疗策略治疗难治性眼部疾病

• 批准号: 21H03821
• 负责人: 村上 達也
• 金额: $ 11.23万
• 依托单位: Toyama Prefectural University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H03821/
• 关键词: 点眼剤; 注射剤; 脂質ナノ粒子; 高密度リポタンパク質; 両親媒性ペプチド; ゼブラフィッシュ; 光線力学療法; リポタンパク質; 後眼部疾患; 点眼

昨年度、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）に含まれる脂質結合タンパク質ａｐｏＡ－Ｉの１０個の両親媒性αヘリックスの中から、コール酸ナトリウム法によって、リン脂質と反応してＨＤＬ様粒子を形成するαヘリックス領域のペプチド（ペプチドＸ）を見出した。今年度、Ｘペプチドが形成するＨＤＬ様粒子の機能解析を行うために、Ｘペプチドの大量合成を行い、４０ｍｇ程度を得た（純度＞９５％）。既報で用いられたＨＤＬ様粒子作製法（リポソーム法）において、ポジコンとして用いたＣ末端ペプチド（ペプチド１０）では形成が見られ、ペプチドＸはＨＤＬ様粒子では見られないことを確認した。ゼブラフィッシュ幼魚を用いる血管内皮接着性ｉｎ　ｖｉｖｏ評価システムを開発することに成功した。蛍光脂質を含む３種類のＨＤＬ改変体（多様な細胞親和性を示す）およびリポソーム、ポリエチレングリコール修飾リポソームをゼブラフィッシュ幼魚のキュビエ管（静脈に相当）に注射し、共焦点蛍光顕微鏡および実体蛍光顕微鏡の両者でｉｎ　ｖｉｖｏ蛍光イメージングを行った。前者では主に血液由来蛍光を検出し、後者では血液と血管両方からの蛍光を検出した。これらのデータの差は、血管内皮に接着した成分からの蛍光に相当する。こうして得られた５サンプルのデータは、同蛍光ラベルサンプルをマウス尾静脈内投与後に採取された大動脈血管内皮の表面からの蛍光データと良く相関した（Ｒ２＞０．９）。すなわち静脈内投与されたＨＤＬ改変体およびリポソームのマウス血管内皮接着性は、ゼブラフィッシュを用いて推測できることが明らかになった。さらにゼブラフィッシュ幼魚における上記５サンプルの血中滞留性は、マウスにおけるそれと良く相関することもわかった（Ｒ２＞０．９）。従って血中滞留性評価において、ゼブラフィッシュ幼魚はマウスを代替できることが明らかになった。

Last year, high-density リ ポ タ ン パ ク mass (HDL) contains に ま れ る lipid combined タ ン パ ク qualitative apoA -i の 10 の struck close pollination alpha ヘ リ ッ ク ス の in か ら, コ ー ル acid ナ ト リ ウ ム method に よ っ て, リ ン lipid と anti 応 し て HDL を others particles formed す る alpha ヘ リ ッ ク ス field の ペ プ チ ド (ペ プ チ ド X) を shows し た. This year, X ペ プ チ ド が form す る HDL others in particle の line function analytical を う た め に, X ペ プ チ ド の line a lot of synthetic を い, degree of 40 mg を た (purity > 95%). Both reported で with い ら れ た HDL others in particle method for (リ ポ ソ ー ム method) に お い て, ポ ジ コ ン と し て in い た C terminal ペ プ チ ド (ペ プ チ ド 10) で は form が see ら れ, ペ プ チ ド X は HDL others in particle で は see ら れ な い こ と を confirm し た. Youdaoplaceholder0 juvenile fish を were evaluated invivo for the success of 価システムを development する とに とに とに とに た た. 蛍 light 3 kinds の HDL lipid を contain む change - body (more than others in な cell affinity を す) in お よ び リ ポ ソ ー ム, ポ リ エ チ レ ン グ リ コ ー ル modified リ ポ ソ ー ム を ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ larval の キ ュ ビ エ tube injection (vein に quite) に し, total focus light 蛍 顕 micromirror お よ び be body 蛍 light 顕 micromirror の struck the で invivo 蛍 light イ メ ー Youdaoplaceholder0 グを グを lines った. The former で は main origin 蛍 に blood light を 検 し, the latter で は と blood vessels that struck party か ら の 蛍 light を 検 out し た. こ れ ら の デ ー タ の は, endothelial に then し た composition か ら の 蛍 に fairly light す る. こ う し て have ら れ た 5 サ ン プ ル の デ ー タ は, with 蛍 light ラ ベ ル サ ン プ ル を マ ウ ス tail に after intravenous VCS and take さ れ た artery endothelial の surface か ら の 蛍 light デ ー タ と good く phase masato し た (R2 > 0.9). す な わ ち cast with intravenous さ れ た HDL changes - body お よ び リ ポ ソ ー ム の マ ウ ス endothelial then は, ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ を with い て speculation で き る こ と が Ming ら か に な っ た. さ ら に ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ larval に お け る written 5 サ ン プ ル の blood retention は, マ ウ ス に お け る そ れ と good く phase masato す る こ と も わ か っ た (R2 > 0.9). 従 っ て in blood were stranded sexual review 価 に お い て, ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ larval は マ ウ ス を instead of で き る こ と が Ming ら か に な っ た.

项目成果

バーゼル大学(スイス)

巴塞尔大学（瑞士）

加齢黄斑変性治療標的としての高密度リポタンパク質

高密度脂蛋白作为年龄相关性黄斑变性的治疗靶点

• 发表时间: 2022
• 期刊: 別冊BIO Clinica
• 作者: 村上 達也

CD13リガンドと細胞膜透過ペプチドを含む人工HDL点眼剤の可能性

含有CD13配体和细胞膜穿透肽的人工HDL滴眼液的可能性

• 发表时间: 2021
• 作者: 福田亮介，NARGIS;Mahmuda，河上亮，長井良憲，中野絵梨，須田謙史，辻川明孝，村上達也
• 通讯作者: Mahmuda，河上亮，長井良憲，中野絵梨，須田謙史，辻川明孝，村上達也

Photoregulation of the Membrane Potential of Living Cells with Ferrocene-Porphyrin-Fullerene-Linked Molecules

二茂铁-卟啉-富勒烯连接分子对活细胞膜电位的光调节

• 发表时间: 2023
• 作者: 坂本 悠輔;山本 岳洋;T. Murakami
• 通讯作者: T. Murakami

Potential of engineered lipoprotein eye drops for the treatment of age-related macular degeneration

工程脂蛋白滴眼液治疗年龄相关性黄斑变性的潜力

• 发表时间: 2021
• 作者: FUKUDA;Ryosuke; NARGIS;Mahmuda; KAWAKAMI;Ryo; NAGAI;Yoshinori; NAKANO;Eri; SUDA;Kenji; TSUJIKAWA;Akitaka; MURAKAMI;Tatsuya
• 通讯作者: Tatsuya