Development of therapeutically active nanomaterials: lipoprotein structure/function-based therapeutic strategies to treat intractable ocular diseases

治疗活性纳米材料的开发：基于脂蛋白结构/功能的治疗策略治疗难治性眼部疾病

• 批准号: 21H03821
• 负责人: 村上 達也
• 金额: $ 11.23万
• 依托单位: Toyama Prefectural University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H03821/
• 关键词: 点眼剤; 注射剤; 脂質ナノ粒子; 高密度リポタンパク質; 両親媒性ペプチド; ゼブラフィッシュ; 光線力学療法; リポタンパク質; 後眼部疾患; 点眼

昨年度、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）に含まれる脂質結合タンパク質ａｐｏＡ－Ｉの１０個の両親媒性αヘリックスの中から、コール酸ナトリウム法によって、リン脂質と反応してＨＤＬ様粒子を形成するαヘリックス領域のペプチド（ペプチドＸ）を見出した。今年度、Ｘペプチドが形成するＨＤＬ様粒子の機能解析を行うために、Ｘペプチドの大量合成を行い、４０ｍｇ程度を得た（純度＞９５％）。既報で用いられたＨＤＬ様粒子作製法（リポソーム法）において、ポジコンとして用いたＣ末端ペプチド（ペプチド１０）では形成が見られ、ペプチドＸはＨＤＬ様粒子では見られないことを確認した。ゼブラフィッシュ幼魚を用いる血管内皮接着性ｉｎ　ｖｉｖｏ評価システムを開発することに成功した。蛍光脂質を含む３種類のＨＤＬ改変体（多様な細胞親和性を示す）およびリポソーム、ポリエチレングリコール修飾リポソームをゼブラフィッシュ幼魚のキュビエ管（静脈に相当）に注射し、共焦点蛍光顕微鏡および実体蛍光顕微鏡の両者でｉｎ　ｖｉｖｏ蛍光イメージングを行った。前者では主に血液由来蛍光を検出し、後者では血液と血管両方からの蛍光を検出した。これらのデータの差は、血管内皮に接着した成分からの蛍光に相当する。こうして得られた５サンプルのデータは、同蛍光ラベルサンプルをマウス尾静脈内投与後に採取された大動脈血管内皮の表面からの蛍光データと良く相関した（Ｒ２＞０．９）。すなわち静脈内投与されたＨＤＬ改変体およびリポソームのマウス血管内皮接着性は、ゼブラフィッシュを用いて推測できることが明らかになった。さらにゼブラフィッシュ幼魚における上記５サンプルの血中滞留性は、マウスにおけるそれと良く相関することもわかった（Ｒ２＞０．９）。従って血中滞留性評価において、ゼブラフィッシュ幼魚はマウスを代替できることが明らかになった。

Last year, high-density polyester (HDL) was used in combination with the 10 media of apoA-I in the production of high-density fatty acid (HDL) particles, which were used in the production of high-density fatty acid (HDI) particles. This year, the X-ray particle machine is able to analyze the number of HDL particles, the number of synthetic lines, and the degree of 40mg (> 95%). The HDL particles are used as the method to make sure that the C-terminal particles are not valid (10), and that the particles are HDL particles. The in vivo was connected to the endothelium of the blood vessel in the infant and the baby was successfully connected with the endothelium. The photolipid contains three types of HDL modifiers (multi-cell and sex indicator). In this way, we need to improve the performance of the in vivo microphone, which is similar to that of the normal device, the injection device, the confocal light sensor, the light sensor, the light sensor The former is about the origin of the blood, and the latter is about the blood vessels. There is a difference between the vascular endothelium and the components of the blood vessel. The vascular endothelium was injected intravenously and later (R2 > 0.9). The results showed that there was no significant difference between the two groups (R2 > 0.9). The intravascular instillation is related to the HDL modification. The adhesion of vascular endothelium, the adhesion of vascular endothelium, and the adhesion of vascular endothelium. There was no significant difference between the two groups (R2 > 0.9). There was no significant difference between the two groups (R2 > 0.9). In the blood, there is a stagnation in the blood, and the baby is not in the place of the baby.

项目成果

バーゼル大学(スイス)

巴塞尔大学（瑞士）

加齢黄斑変性治療標的としての高密度リポタンパク質

高密度脂蛋白作为年龄相关性黄斑变性的治疗靶点

• 发表时间: 2022
• 期刊: 別冊BIO Clinica
• 作者: 村上 達也

CD13リガンドと細胞膜透過ペプチドを含む人工HDL点眼剤の可能性

含有CD13配体和细胞膜穿透肽的人工HDL滴眼液的可能性

• 发表时间: 2021
• 作者: 福田亮介，NARGIS;Mahmuda，河上亮，長井良憲，中野絵梨，須田謙史，辻川明孝，村上達也
• 通讯作者: Mahmuda，河上亮，長井良憲，中野絵梨，須田謙史，辻川明孝，村上達也

Photoregulation of the Membrane Potential of Living Cells with Ferrocene-Porphyrin-Fullerene-Linked Molecules

二茂铁-卟啉-富勒烯连接分子对活细胞膜电位的光调节

• 发表时间: 2023
• 作者: 坂本 悠輔;山本 岳洋;T. Murakami
• 通讯作者: T. Murakami

Potential of engineered lipoprotein eye drops for the treatment of age-related macular degeneration

工程脂蛋白滴眼液治疗年龄相关性黄斑变性的潜力

• 发表时间: 2021
• 作者: FUKUDA;Ryosuke; NARGIS;Mahmuda; KAWAKAMI;Ryo; NAGAI;Yoshinori; NAKANO;Eri; SUDA;Kenji; TSUJIKAWA;Akitaka; MURAKAMI;Tatsuya
• 通讯作者: Tatsuya