Visualization of the Smad-Smad cofactor cooperativity in cancer progression

癌症进展中 Smad-Smad 辅助因子协同作用的可视化

• 批准号: 19KK0400
• 负责人: 伊藤 友香
• 金额: $ 9.73万
• 依托单位: University of Yamanashi
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (A))
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020 至 2023
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19KK0400/
• 关键词: Smad; AP-1; 転写; がん; Smad cofactor; グリオーマ; TGF-β

多機能性サイトカインのTGF-βは、細胞の増殖や分化、アポトーシスなどの多様な細胞応答を制御する。一方、TGF-βシグナル伝達の異常は組織線維化やがん促進などの病態形成に関与することが知られている。TGF-βが細胞表面の受容体に結合すると、転写因子Smad2 あるいはSmad3がリン酸化により活性化され、Smad4と複合体を形成し、標的遺伝子発現を制御する。このSmad複合体による遺伝子発現制御において、Smadと協調して働く他の転写因子Smad cofactor の発現や活性の相違がTGF-βの作用の多様性を生み出す一因であると考えられている。本研究では、乳がん細胞株にAP-1とSmadの協調的な転写活性化をモニタリングできるレポータープラスミド（AP1-S）を導入し、腫瘍細胞の本来の生育状態を反映することが知られている3次元培養を行うことで、Smad cofactorであるAP-1とSmadの協調作用とTGF-βによるがん治療抵抗性や転移・浸潤などの細胞応答との対応を明らかにすることを目的とする。本年度は、共同研究先国において乳がん細胞株MDA-MB-231とMCF10A-M2にウイルスベクターを用いてレポータープラスミド（AP1-S）を導入し、Smadによる転写活性化をモニタリングできるCAGAレポーター（CAGA）との比較を行った。 AP1-S、CAGAを導入することでTGF-β刺激24時間後に強いレポーター活性が確認できた。TGF-β刺激6時間では、AP1-Sの活性化は認められたがCAGAの活性はほぼなかった。3次元培養を行ったところ、刺激依存的にCAGAの活性が細胞表面から内部へと移動することが観察できた。

More functional サ イ ト カ イ ン の TGF - beta は や の raised colonization, cell differentiation, ア ポ ト ー シ ス な ど の many others な cells 応 answer を suppression す る. One party, the TGF - beta シ グ ナ ル 伝 の exception は organization line dimensions や が ん promote な ど の pathological form に masato and す る こ と が know ら れ て い る. TGF - beta が cells respond to let the body surface の に combining す る と, planning to write factor Smad2 あ る い は Smad3 が リ ン acidification に よ り activeness さ れ and Smad4 と complex を form し, mark but 伝 発 now を suppression す る. こ の Smad complex に よ る posthumous son 伝 発 now suppression に お い て, Smad と coordination し て 働 く he の planning write factor Smad cofactor の 発 や now active の conceives が TGF - beta の role の multiple others born を み out a for で す あ る と exam え ら れ て い る. This study で は, milk が ん cell lines に AP - 1 と Smad の coordinated な planning write activeness を モ ニ タ リ ン グ で き る レ ポ ー タ ー プ ラ ス ミ ド (AP1 - S) を import し, swollen sores cell の の fertility status を originally reflect す る こ と が know ら れ て い る line three yuan cultivate を う こ と で, Smad Cofactor で あ る AP - 1 と Smad の coordinating role と TGF - beta に よ る が ん treatment resistance や planning move, infiltrating な ど の cells 応 answer と の 応 seaborne を Ming ら か に す る こ と を purpose と す る. This year は, joint research, the first に お い て milk が ん cell lines MDA - MB - 231 と MCF10A - M2 に ウ イ ル ス ベ ク タ ー を with い て レ ポ ー タ ー プ ラ ス ミ ド (AP1 - S) を import し, Smad に よ る planning write activeness を モ ニ タ リ ン グ で き る CAGA レ ポ ー タ ー (CAGA) と の is っ を line Youdaoplaceholder0. AP1 -s, CAGA を import す る こ と で TGF - beta strong stimulation after 24 time に い レ ポ ー タ ー active が confirm で き た. The stimulation time of TGF-β for 6 hours で で and AP1-S <s:1> activation <e:1> recognize the められたがCAGA <s:1> activity ほぼな ほぼな った った. Three dimensional line cultivate を っ た と こ ろ, stimulate the interdependent に CAGA の が cell surface active か ら internal へ と mobile す る こ と が 観 examine で き た.