Visualization of the Smad-Smad cofactor cooperativity in cancer progression

癌症进展中 Smad-Smad 辅助因子协同作用的可视化

• 批准号: 19KK0400
• 负责人: 伊藤 友香
• 金额: $ 9.73万
• 依托单位: University of Yamanashi
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (A))
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020 至 2023
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19KK0400/
• 关键词: Smad; AP-1; 転写; がん; Smad cofactor; グリオーマ; TGF-β

多機能性サイトカインのTGF-βは、細胞の増殖や分化、アポトーシスなどの多様な細胞応答を制御する。一方、TGF-βシグナル伝達の異常は組織線維化やがん促進などの病態形成に関与することが知られている。TGF-βが細胞表面の受容体に結合すると、転写因子Smad2 あるいはSmad3がリン酸化により活性化され、Smad4と複合体を形成し、標的遺伝子発現を制御する。このSmad複合体による遺伝子発現制御において、Smadと協調して働く他の転写因子Smad cofactor の発現や活性の相違がTGF-βの作用の多様性を生み出す一因であると考えられている。本研究では、乳がん細胞株にAP-1とSmadの協調的な転写活性化をモニタリングできるレポータープラスミド（AP1-S）を導入し、腫瘍細胞の本来の生育状態を反映することが知られている3次元培養を行うことで、Smad cofactorであるAP-1とSmadの協調作用とTGF-βによるがん治療抵抗性や転移・浸潤などの細胞応答との対応を明らかにすることを目的とする。本年度は、共同研究先国において乳がん細胞株MDA-MB-231とMCF10A-M2にウイルスベクターを用いてレポータープラスミド（AP1-S）を導入し、Smadによる転写活性化をモニタリングできるCAGAレポーター（CAGA）との比較を行った。 AP1-S、CAGAを導入することでTGF-β刺激24時間後に強いレポーター活性が確認できた。TGF-β刺激6時間では、AP1-Sの活性化は認められたがCAGAの活性はほぼなかった。3次元培養を行ったところ、刺激依存的にCAGAの活性が細胞表面から内部へと移動することが観察できた。

TGF-β of multifunctional cells, cell proliferation and differentiation, and control of multiple cell responses One side, TGF-β, the abnormal expression of the protein, the organization of the line dimension, the promotion of the formation of the disease, and the related knowledge. TGF-β binds to receptors on the cell surface, activates Smad 2, activates Smad 3, forms Smad 4 complexes, and controls target gene expression. The Smad complex is involved in the production and control of Smad cofactors, the production and activity of Smad cofactors, and the diversity of TGF-β actions. In this study, the coordinated activation of AP-1 and Smad in breast cancer cell lines was investigated by introducing AP-1-S into breast cancer cells to reflect their original reproductive status. Smad cofactor, AP-1, Smad coordination, TGF-β, therapeutic resistance, migration, infiltration, cellular response, and purpose This year, we conducted a joint study on the introduction and comparison of CAGA (CAGA) into the cell lines MDA-MB-231 and MCF 10A-M2. AP1-S and CAGA were introduced and TGF-β was stimulated for 24 hours. TGF-β stimulation 6 time, AP1-S activation and recognition of CAGA activity The activity of CAGA in three-dimensional culture depends on the cell surface, internal movement and detection.