ハンセン病の感染様式に関る分子機構の解明とそれを標的とした感染防御ワクチンの開発

阐明汉森病感染模式相关的分子机制并开发针对其的保护性疫苗

• 批准号: 19K08800
• 负责人: 藤村 響男
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: ヤマザキ動物看護専門職短期大学 (2020-2022)Kitasato University (2019)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K08800/
• 关键词: ハンセン病; 感染様式; 侵入蛋白; ワクチン

我々はこれまで、らい菌の細胞侵入に関わる分子機構につき解析を行い、らい菌がmce1蛋白を用いて鼻粘膜上皮細胞を標的として感染する事、及びmce1蛋白の一部領域をブロックすることで侵入を抑制できることを明らかにしてきた。本研究の目的は、ワクチン開発ヘの基礎的検討の最終段階として、らい菌の体内への侵入経路である鼻粘膜細胞とリザーバーである微小血管内皮細胞への侵入に関わる蛋白の各部位を標的とした抗体を用いて侵入抑制効果を検討すると共に、ハンセン病患者におけるmce1蛋白に対する抗体の有無およびサブクラスについても併せ検討するところにある。これまでの研究結果から想定された侵入活性領域（316～531bpの領域）を316-387bp (106-129AA)、388-453bp (130-151AA)、454-486bp (152-162AA)、および487-531bp (163-177AA)に4分割して、夫々の領域に対する高度免疫血清を作製し、316bp-531bp (72AA領域)を外膜表示した組換え大腸菌を用いて侵入抑制効果を検討した結果、106-129アミノ酸と130―151アミノ酸を免疫原に作製した高度免疫血清（Inv Xa抗体とInv Xb抗体）に侵入抑制効果が認められた。そこで次に、新たにInv XaとInv Xbにまたがる領域(121-144AA)に対する高度免疫血清を作製し、侵入活性が最も抑制されることを明らかにした。本領域に対する単クローン抗体を得ることはできなかったが、らい菌の鼻粘膜上皮細胞への侵入においてmce1A蛋白InvX領域の121～144AAが最も重要な領域であることが明らかとなった。今年度は、ハンセン病患者におけるmce1A蛋白に対する抗体の有無とサブクラスをELISA法で検討するために、本領域を含む27KDの組換え蛋白を作製し必要量精製した。

We investigate the invasion of bacteria into the molecular mechanism of bacteria, the detection of infection by the use of mce1 protein in nasal mucosal epithelial cells, and the detection of mce1 protein in a field that inhibits the invasion of bacteria. In this study, the aim of this study was to detect the most important segment of the gene, the bacteria that invaded the nasal mucosa in vivo, the microvascular endothelial cells that invaded the cells of the nasal mucosa, the antibodies that invaded all parts of the protein protein, and the antibody that was used to invade and inhibit the growth of the nasal mucosa. The antibody to mce1 protein was detected in patients with various diseases, and the antibodies were detected in patients with various diseases. The results of this study showed that it was conceived that 316-387bp (106-129AA), 388-453bp (130-151AA), 454-486bp (152-162AA), 417-531bp (163-177AA), 316-486bp (10 ~ 6-129AA), 388-486bp (130-162AA), 316-486bp (10 ~ 6-177AA) were determined to invade the active field (active domain). The outer membrane of 316bp-531bp (72AA field) showed that the bacteria were invaded and inhibited by invasion and inhibition. The immunogen was used as highly immunized serum (Inv Xa antibody, Inv Xb antibody). In the first place, the high immune serum was used as an antiserum, and the intrusive activity was the most effective inhibition. The invasive activity was detected in the field of Inv Xa, Inv Xb, immune, and invasive activity. In this field, anti-mce1A antibodies have been obtained, and the nasal mucosal epithelial cells have invaded into the InvX domain of 121~144AA protein. This is the most important domain. In this year's disease, there is no significant difference in the level of mce1A protein antibody in this year's disease. The ELISA method does not have any information. This field contains the necessary amount of 27KD protein to measure.