閉環状DNAとして染色体外に存在するB型肝炎ウイルスゲノムの維持と分解機序の解明

阐明乙型肝炎病毒基因组的维持和降解机制，该基因组作为闭合环状DNA存在于染色体之外

• 批准号: 18K07160
• 负责人: 山本 直樹
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K07160/
• 关键词: HBV cccDNA; HBV; cccDNA; HBV感染感受性細胞; ウイルス持続感染機序

B型肝炎ウイルス(HBV)は肝炎、肝硬変および肝癌の原因ウイルスのひとつである。HBVは乳幼児期に感染すると高い確率で持続感染化する。HBVゲノムDNAは部分的に一本鎖の不完全二本鎖DNA(relaxed circular DNA: rcDNA)でウイルス粒子内に封入されている。一方、感染肝細胞の核内では完全な二本鎖閉環状DNA(covalently closed circular DNA: cccDNA)として染色体とは独立して一定量維持されることで持続感染化する。通常、染色体外DNAは安定性が低いとされている。cccDNAの維持メカニズムとしては、全長ウイルスRNAから逆転写された一部のrcDNAが核に再移行することで一定量のcccDNAを維持させる「リサイクル経路」が考えられているが、未だ明らかにされていない。これまで、逆転写酵素阻害剤やHBV mRNAを標的としたsiRNAを用いてリサイクル経路に関わるウイルスRNA、コア蛋白質および逆転写酵素を阻害してもcccDNAは大きく減少しないとの知見を研究代表者は得てきた。これは、リサイクル経路の阻害ではcccDNA量を減少させる効果が不十分であるか、リサイクル経路を介さないcccDNA維持機構が存在している可能性を示唆している。そこで本研究は、cccDNA量を減少させる新規抗HBV低分子化合物を探索し、ウイルスライフサイクルにおける作用機序を解析することを目的とする。2022年度は、これまで解析を進めてきた化合物とは異なる基本骨格を有する新しい低分子化合物ライブラリーを用いてcccDNA減少効果を示す化合物のスクリーニングを実施した。そして、cccDNA減少効果を示す新たな基本骨格の化合物を取得した。また、構造活性相関解析を進める為、新規類縁体を合成した。

Hepatitis B (HBV) is the cause of hepatitis, cirrhosis and liver cancer. HBV infection during infancy and high accuracy rate of persistent infection HBV DNA is partially contained in a single or incomplete circular DNA (rcDNA). A fully closed circular DNA(cccDNA) in the nucleus of infected liver cells is maintained independently of the chromosome. Usually, extrachromosomal DNA is unstable. cccDNA is maintained in a "reverse" fashion, and full-length cccDNA is maintained in a "reverse" fashion. This is the first time that the virus has been detected in a human body. This indicates the possibility that cccDNA maintenance mechanisms may exist due to the decrease in cccDNA quantity due to the inhibition of the CCRCs. This study aims to explore new anti-HBV low molecular weight compounds by reducing the amount of cccDNA and analyzing the mechanism of action. In 2022, the analysis of new low molecular weight compounds was carried out. CCDNA-reducing effect is demonstrated by the acquisition of new basic structure compounds. The structure activity correlation analysis is carried out for the purpose of synthesizing the new type of body.

项目成果

東京都医学総合研究所 感染制御プロジェクト

东京都医学科学研究所感染控制项目

肝実質細胞指向性自然免疫誘導剤を用いたHBV cccDNAの制御

使用肝细胞导向的先天免疫诱导剂控制 HBV cccDNA

• 发表时间: 2021
• 作者: Yato Keigo;Onodera Taishi;Matsuda Mami;Moriyama Saya;Fujimoto Akira;Watashi Koichi;Aizaki Hideki;Tanaka Tomohisa;Moriishi Kohji;Nishitsuji Hironori;Shimotohno Kunitada;Tamura Koji;Takahashi Yoshimasa;Wakita Takaji;Muramatsu Masamichi;Kato Takanobu;Suzuki ;山本直樹
• 通讯作者: 山本直樹