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The cell identification research of bone marrow drived liver repaired cell in the new liver regeneration therapy

新型肝再生疗法中骨髓驱动的肝修复细胞的细胞鉴定研究

基本信息

批准号：
22K08057
负责人：
山本直樹
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

iPS細胞由来間葉系幹細胞(iMSC)をGAN食モデルマウスに脾臓投与と静脈投与を行い、投与後の肝組織を浮遊切片法による高感度免疫電顕法とFEI社製の透過型電子顕微鏡Tecnai12BTと走査型電子顕微鏡Qunta3D FEG DualBeamシステムを用いて投与したiMSCの特徴と動態を解析した。また肝組織でのSirius Red染色での肝線維化評価とH-E染色とオイルレッド染色で肝脂肪沈着評価を行った。その結果、脾臓投与の方が肝線維化抑制効果と肝脂肪抑制効果を認めた。また我々が開発した肝脂肪化悪化モデル(AK3KOマウス)とMMP9発現細胞標識トランスジェニック(MMP9/LacZ-DsRed Tg)マウスにGAN特殊飼料食投与することでMAFLDモデルを作成し、肝線維化あるいは脂肪化環境下でこのモデル内部の肝細胞や星細胞等の変化を電子顕微鏡等で評価を開始し、このMAFLDモデルにiMSCを脾臓投与あるいは静脈投与し、線維化・脂肪化抑制効果の評価と動態解析を行った。またiMSCの培養液よりエクソソームを生成し、そのエクソソームをGAN特殊飼料食モデルマウスから連続静脈投与を行い、肝線維化と肝脂肪化の抑制効果を評価した。また新規開発した代謝系異常のAK5KOマウスを作成して、GFPTGからのGFP陽性骨髄細胞あるいはGFP陽性骨髄由来間葉系細胞(MSC)を投与し、肝臓内での投与した細胞の動態と機能解析を行った。

The origin of the iPS cell is that the cell (iMSC), the GAN, the food, the liver, the tissue, the floating slice, the high sensitive immunoelectron, the FEI, the Tecnai12BT, the walking, the Qunta3D FEG DualBeam, the microphone, the microphone, the microphone, The liver tissue was stained with Sirius Red staining, the liver line was maintained, the liver was stained with Hmure E staining, the liver was stained with fat deposition, and the liver fat deposition was observed. The results of the experiment, the spleen injection and the maintenance of the liver line had a significant effect on the inhibition of liver fat. We do not want to start the AK3KO steatosis program (MMP9). We can see that you can use the GAN special food and the MAFLD to make the food, the liver cable, the fatty liver, the satellite, the satellite, etc., and so on, in the environment of fatty liver. After MAFLD and iMSC, the spleen was injected and the fat was suppressed by intravenous injection and fat reduction. The iMSC liquid is used to prevent the production of lipopolysaccharide, the special ingredients of the GAN are used to treat the food, and the liver line is used to maintain the fat of the liver. According to the new regulations, there is a system in which AK5KO cells are generated, GFPTG cells are linked to GFP cells, and MSC cells are injected into the liver. the dynamic state machine can analyze the data.