ABCトランスポーターを介したαシヌクレイン細胞外分泌による神経毒性緩和の検討

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本研究はABCトランスポーターによるαシヌクレイン細胞外分泌の制御因子を明らかにし、その機構を調節することでプリオン様伝播を抑制できるか解明することを目的として行っている。まず、αシヌクレイン細胞外分泌の大部分を担うとされる神経活動亢進がABCトランスポーターを介しているかどうかマウス大脳皮質初代神経細胞を用いて調べた。グルタミン酸刺激による神経活動亢進、カルシウムイオノフォアによる細胞内Ca濃度上昇はいずれもαシヌクレイン細胞外分泌を促進した。これらの促進効果は、ABCトランスポーター阻害薬であるプロベネシド、グリブライドで抑制された。神経活動亢進は細胞内小胞の分泌を促進するので、αシヌクレインの細胞外分泌を担うABCトランスポーターは細胞膜ではなく、細胞内小胞上に存在すると考えられた。また、MAO-B阻害薬であるセレギリンがSH-SY5Y細胞においてABCトランスポーターを介してαシヌクレインの細胞外分泌を促進することを既に示しているが、初代神経細胞においても同様の結果が得られた。次に、ABCトランスポーター依存性分泌とエクソソーム依存性分泌が相互に関連するか調べた。エクソソーム形成阻害薬であるGW4869による処理で、エクソソーム分画におけるαシヌクレイン分泌が低下することを確認した。非エクソソーム分画に影響は与えなかった。一方、セレギリンは非エクソソーム分画におけるαシヌクレイン分泌を増加させ、エクソソーム分画に影響を与えなかった。これらの結果からは、ABCトランスポーター依存性経路とエクソソーム依存性経路の相互的な機能調節のメカニズムの存在は積極的には示唆されなかった。