アネキシンIVとVのレクチン活性と細胞外分泌に関わるドメインの解析

参与凝集素活性和膜联蛋白 IV 和 V 胞外分泌的结构域分析

基本信息

  • 批准号:
    09780542
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.47万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1997
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1997 至 1998
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

アネキシンはカルシウム/リン脂質結合タンパク質で、現在までに哺乳類では10種類以上のアネキシンが見い出されている。脂質との相互作用のほかにアネキシンは、グライコサミノグライカン(GAG)鎖とも結合することが明らかになり、生体内でプロテオグライカンのレセプターとして機能する可能性も示唆されてきた。本研究では、アネキシンのレクチンとしての機能と細胞外への分泌機構を解明するための基礎的研究を行った。(1) アネキシンのレクチン活性GAG鎖を固定化したセファロースを用いたアフィニティークロマトグラフィーや、GAGをウシ血清アルブミンや西洋ワサビペルオキシダーゼにカップリングして調製したネオプロテオグライカンを使った固相アッセイ法で、アネキシンのレクチン活性を調べたところ、アネキシンIV、VだけでなくアネキシンI、II、VIにもGAG結合活性があることが明らかになった。各アネキシンのGAGに対する結合特異性は異なり、アネキシンは単にGAGの持つ負電荷と相互作用するのではなく、負電荷を含む糖鎖構造を認識していることが示唆された。(2) アネキシンの細胞外分泌機構アネキシンは分泌・膜貫通タンパク質がアミノ末端側に持つ疎水敵なシグナルペプチドを持たないタンパク質である。しかし、特定の細胞では分泌されていることが報告されており、なんらかの分泌経路を介して細胞外、細胞表面に発現されていると考えられる。アネキシンの細胞外への分泌機構を調べるための適当な培養実験系として軟骨細胞を考え、アネキシンの発現を調べた。ラット軟骨肉腫細胞(RCS-LTC)では、軟骨形成へ細胞を分化させるとともにアネキシンII、Vの発現量が増大することが示唆された。今後この系を用いて、分化に伴うアネキシンの発現と分泌機構に関する研究を継続する予定である。
アネキシンはカルシウム/リンlipid combined with タンパクqualityで、NowまMore than 10 kinds of mammals are available. Lipid interaction, GAG, lock combination, GAGが明らかになり, 生内でプロテオグライカンのレセプターとして Function する POSSIBILITY もINDUSTRY されてきた. This study was carried out to unravel the basics of the function and secretion mechanism of the extracellular secretion mechanism of アネキシンのレクチン. (1)アネキシンのレクチンActive GAG lock をfixed したセファロースを use いたアフィニティークロマトグラフィーや, GAG をウシSerum アルブミンやWestern ワサビペルオキシダーゼにカップリングして Modulation したネオプロテオグライカンを使ったsolid phase アッセイ法で,アネキシンのレクチンActive を Adjustment べたところ、アネキシンIV, VだけでなくアネキシンI, II, VIにもGAG binding activity があることが明らかになった. Each アネキシンのGAGに対する binding specificity is different and the アネキシンは単にGAGのhold is negative. The interaction between charges and negative charges is the same as the sugar lock structure. (2)アネキシンのExtracellular secretion mechanism アネキシンはsecretion・membrane penetration タンパクqualityがアミThe end side of the water is the water enemy of the water.しかし、Specific cell secretion されていることがreport されており、なんらThe secretion path is introduced outside the cell and on the cell surface. The アネキシンの extracellular への secretion mechanism を べ る た めの appropriate な culture 実験 system と し て chondrocytes を test え, ア ネ キ シ ン の発 を tun べ た. RCS-LTC, chondrogenic cell differentiationせるとともにアネキシンII, Vの発开户 が Increase the big することが见憆された. From now on, it is planned to study the use and differentiation of the system and the secretion mechanism of the secretion mechanism.

项目成果

期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Satoh,A.: "Modulation of cell surface lectin receptors on K562 human erythroleukemia cells induced by transfection with annexin IV cDNA." FEBS Lett.405. 107-110
Satoh,A.:“膜联蛋白 IV cDNA 转染诱导的 K562 人红白血病细胞表面凝集素受体的调节。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Ishitsuka,R.: "Glycosaminoglycan-binding properties of annexin IV,V,and VI." J.Biol.Chem.(印刷中).
Ishitsuka, R.:“膜联蛋白 IV、V 和 VI 的糖胺聚糖结合特性。J.Biol.Chem。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Satoh,A.: "Characterization of human p33/41(annexinIV),a Ca^<2+> dependent carbohydrate-binding protein with monoclonal anti-annexinIV antibodies,AS11 and AS17." Biol.Pharm.Bull.20. 224-229
Satoh,A.:“用单克隆抗annexinIV 抗体AS11 和AS17 表征人p33/41(annexinIV),一种Ca^2 依赖性碳水化合物结合蛋白。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
石塚玲子: "Glycosaminoglycan-binding properties of annexin IV,V,and VI" Journal of Biological chemistry. 273. 9935-9941 (1998)
Reiko Ishizuka:“膜联蛋白 IV、V 和 VI 的糖胺聚糖结合特性”生物化学杂志 273. 9935-9941 (1998)。
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  • 通讯作者:
    岡山 明

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