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脳の後期遺伝子群の単離・解析によるシナプス可塑性の分子機構の解明

通过分离和分析晚期脑基因簇阐明突触可塑性的分子机制

基本信息

批准号：
09780736
负责人：
山形要人
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Institute for Neuroscience
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09780736/
关键词：
脳記憶 LTP 後期遺伝子

项目摘要

後期遺伝子群(delayed early genes=DEGs)は、神経活動後immediate early Genes( IEGs)に引き続いて誘導される遺伝子群の総称で、神経系(脳)ではまだ系統的に調べられていない。Late geneと呼ぶ研究者もいるが、我々はimmediate early gene(IEG)産物によって発現制御されていることから、DEGと呼んでいる。DEGはIEG産物によって発現調節され、シナプス可塑性の“effector"として、直接機能していると考えられる。DEGを単離するため、ラットに強い電撃痙攣刺激を与え、海馬のライブラリーを作製し、differential hybridizationによって、8時間後に誘導される遺伝子群をクローニングした。約10万個のライブラリーから90個のクローンを単離し、それらのすべてについて5'および3'末端のシークエンスを行った。その結果、大部分がミトコンドリアのCytochrome oxidase cDNAであることが明らかになった。このcDNAをプローブにして、痙攣刺激によるmRNA誘導の時間経過を調べたところ、発作後、徐々に増加し、8時間で最高になった。また、Na,K-ATPase(Na pump)β1subunitも単離されたので、in situ hybridizationによって、その誘導部位を解析し、海馬歯状回顆粒細胞・錐体細胞、大脳皮質の神経細胞で誘導されることを明らかにした。さらに、他の誘導遺伝子の解析も行い、prothymosin、G protein β subunit(PKC receptor)、PC4(interferon homolog)遺伝子が、電撃痙攣刺激後、海馬を中心に誘導されることを見出した。これらの遺伝子産物は、細胞の分裂や増殖に関与していると考えられる。海馬の顆粒細胞層と門の境界部には、神経幹細胞が存在し、痙攣発作が続くと分裂することが知られているので、これらのDEG産物が、電撃痙攣刺激によって誘導され、幹細胞の分裂・増殖を引き起こす可能性が考えられた。

Delayed early genes=DEGs), immediate early Genes after DEG activity ( IEGs) に attraction き続いて inducing される伝子群の総say で, 神経组(脳) ではまだsystem に动べられていない. Late gene researcher もいるが, I 々はimmediate early gene (IEG) product によって発开户されていることから, DEG んでいる. DEG's IEG product is the "effector" of the current regulation, the plasticity of the DEG, and the direct function of the product. DEG を単するため, ラットに强い电撃convstimulationを与え, 凯马のライブラリーを产し, differential hybridization, 8 hours of induction, される伝子群, をクローニングした. About 100,000 のライブラリーから90 のクローンを単里し、それらのすべてについて5'および3'Endのシークエンスを行った.そのRESULTS, most of the がミトコンドリアのCytochrome oxidase cDNAであることが明らかになった.このcDNAをプローブにして, convulsive stimulus によるmRNA induced の时経pass を Adjustment べたところ, 発作后, Xu 々に嗗加し, 8 time で高になった.また、Na,K-ATPase(Na pump)β1subunitも単里されたので、in situ Hybridization analysis, induction site analysis, hippocampal gyrus granule cells, pyramidal cells, large cortical nerve cells induction induction.さらに, his のinduced 缝子のanalytic も行い, prothymosin, G protein β subunit (PKC receptor), PC4 (interferon homolog) 缝子が, after electroconvulsive stimulation, hippocampal center に-induced されることを见出した.これらの缝子product は, cell division and reproduction に关 and していると考えられる. The granule cell layer of the hippocampus and the boundary part of the gate, the existence of the divine stem cells, the spasm of the stem cells, the splitting of the hippocampus, the knowledge of the division, The DEG product is produced, the electroconvulsive stimulation is induced, the stem cell division and proliferation are induced, and the possibility of stem cell division and proliferation is examined.