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エナメル質形成不全の遺伝子発現異常によるエナメル芽細胞の分化制御機構の解析

釉质发育不全基因表达异常对成釉细胞分化的调控机制分析

基本信息

批准号：
12771083
负责人：
辻岳人
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12771083/
关键词：
エナメル芽細胞エナメル質形成不全エナメル質歯胚

项目摘要

前年度おこなったエナメル芽細胞を用いたサブトラクションでは、使用した歯胚のRNAにおけるエナメル芽細胞の割合が低く、そのためにエナメル質形成不全症ラットと正常ラットのエナメル芽細胞で発現量の差を示す遺伝子を効率よく単離することが出来なかった。本年度においては、エナメル芽細胞を含む上皮由来のエナメル器のみを材料に用いることにより、エナメル芽細胞で特異的に発現する遺伝子の同定をさらに試みた。まず、生後3日目のエナメル質形成不全ラットと正常ラットから単離した歯胚にトリプシン/コラゲナーゼ処理を行うことで歯胚のエナメル器と歯乳頭を分離しエナメル器からRNAを抽出した。昨年度と同様にサブトラクション法により作製したライブラリーから、コロニーアレー法による二次スクリーニングを行い、エナメル質形成不全ラットにおいて発現量の少ない遺伝子を単離した。これらの遺伝子には、アメロゲニンだけでなくエナメリン、アメロブラスチンなどのエナメルタンパクが多く含まれていた。このことは前年度における結果ではアメロゲンニンが単離されたのみであったことと比較して、本年度に使用した方法が有効であることを示している。既知のエナメルタンパク以外の遺伝子としては、8個の遺伝子を単離した。これらの遺伝子は塩基配列から相向性を示す遺伝子をBlastで検索したが、すべてこれまでに単離されていない遺伝子であった。これらの遺伝子について発現の特異性を確認するために、歯胚を含む各臓器からのRNAを用いたRT-PCRを行った。その結果、2個の遺伝子について歯胚に特異的に発現している傾向を示したことから、これらの遺伝子がエナメル質形成不全ラットの原因遺伝子となんらかの関連性があると考えられた。これらの研究結果は、エナメル芽細胞の分化を制御する機構を解明するために重要な手がかりとなると思われる。

In the past year, the use of embryonic RNA in the production of embryonic cells has been reduced, and the difference in the production of embryonic cells has been shown. This year, the development and identification of the cell culture medium and cell culture medium containing epithelial origin and cell culture medium containing epithelial origin and cell culture medium were tested. 3 days after birth, the formation of the tooth mass is incomplete, the normal tooth mass is separated from the tooth mass, and the RNA is extracted from the tooth mass. In the past year, the same method was used to control and control the quality of the product. The quality of the product was not completely determined. The quantity of the product was reduced. This is the first time I've ever seen a woman who's had sex with someone else. Compared with the results in the previous year, the results are clearly different. In comparison, the methods used this year are more effective. We know that there are 8 different kinds of people who are different from each other This is the first time I've ever seen a woman who's had sex with a woman. The specificity of this gene was confirmed by RT-PCR. As a result, two genetic factors, such as the occurrence tendency of specific genes, are present. The genetic factors, such as the cause of incomplete gene formation and the correlation between them, are examined. The results of this study demonstrate the importance of mechanisms for controlling the differentiation of embryonic cells.