ペプチドトランスポーターを利用した腫瘍特異的抗がん剤デリバリー

使用肽转运蛋白进行肿瘤特异性抗癌药物递送

• 批准号: 12771460
• 负责人: 崔 吉道
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12771460/
• 关键词: オリゴペプチド; 抗ガン剤; トランスポーター; 腫瘍; アデノウイルス; ベスタチン; 定量PCR; ドラッグデリバリー; 抗がん剤; 細胞増殖; ヌードマウス; ドラックデリバリー

本研究は、正常組織においてはその発現が小腸および腎臓の上皮細胞刷子縁膜に局在するオリゴペプチドトランスポーターを分子標的とした腫瘍特異的な抗がん薬の送達が可能であるかを検証することを目的として検討を行った。そこで、ヒト肺、乳腺、胃、結腸、膵臓、膀胱、子宮頸部、皮膚、骨あるいは白血球、リンパ球に由来する各種株化腫瘍細胞を培養後、全RNAを調製し、Super Script II Reverse TranscriptaseおよびOligo dT primerを用いてcDNAを合成した。得られたcDNAを用いてLight Cycler(Roche Diagnostics)によりリアルタイム定量PCR解析を行った。その結果、既知の代表的なオリゴペプチドトランスポーターであるPEPT1の発現量は白血病細胞由来ML-1細胞で最も高く、次いでNakajimaおよびCaco2に顕著な発現が見られた。PEPT2は殆どの細胞に発現が見られた。これらペプチドトランスポーターの発現量を放射性標識グリシルザルコシンおよびベスタチンの取り込み活性と比較した結果、トラスポーター発現量と輸送活性とが必ずしも一致しないことから、新規のペプチドトランスポーターの存在が示唆された。ヒトゲノムデータベースに対して検索を行ったところ、PEPT1およびPEPT2に相同性を持つトランスポーター様の構造を有する新規遺伝子PEP3の存在が認められたことから、この分子がん細胞に発現する第3のペプチドトランスポーターである可能性が考えられた。これまでの研究成果をふまえて、今後は例えば、PEPT1をin vivoでの発現効率が高いアデノウイルスベクターを用いて、in vivoで本来PEPT1を発現しない臓器に強制発現することにより新たな輸送機能を発現させ、その基質となる薬物の体内動態を能動的に制御する等、薬効標的部位におけるトランスポーターの発現を積極的に制御することによる新たな能動的薬物動態制御法の樹立を目指す必要があるものと考えられる。

This study aims to investigate the development of epithelial cells in the small intestine and kidney in normal tissues, and the possible detection of tumor specific antibodies. After culture of all kinds of tumor cells from lung, breast, stomach, colon, kidney, bladder, uterine neck, skin, bone, white blood cells and lung, whole RNA was modulated, Super Script II Reverse Transcriptase and Oligo dT primer were synthesized. The cDNA was analyzed by Light Cycler(Roche Diagnostics). As a result, the highest amount of PEPT1 was found in ML-1 cells, followed by Nakajima and Caco2. PEPT2 is a cell that appears in the middle of the cell. The results of comparison of the activity of the radioactive marker, the amount of radioactive marker and the transport activity of the radioactive marker are consistent with those of the new marker. The existence of PEPT1 and PEPT2 in the same structure of PEPT3 is recognized by the possibility of the existence of PEPT1 and PEPT2 in the same structure of PEPT3. The results of this research are summarized as follows: Future examples: PEPT1 in vivo discovery efficiency is high, PEPT1 in vivo discovery efficiency The occurrence of target parts is actively controlled by new dynamic control methods, and the development of target parts is necessary.

项目成果

Sai, Y.: "Selective delivery of peptide anticancer drugs via oligopeptide transporter expressed in cancer cells"Millenial World Congress of Pharmaceutical Sciences Abstracts. 61 (2000)

Sai, Y.：“通过癌细胞中表达的寡肽转运蛋白选择性递送肽抗癌药物”千年世界制药科学大会摘要。

崔 吉道: "ゲノム研究からの薬物相互作用機序解明研究"日本臨牀. 60・1. 74-80 (2002)

Choi, Gil-do：“通过基因组研究阐明药物相互作用机制”Nippon Rinbaku 60・1（2002）。

Toyobuku H: "Enhanced delivery of drugs to the liver by adenovirus-mediated heterologous expression of human oligopeptide transporter PEPT1"J Pharmacol Exp Ther. (in press).

Toyobuku H：“通过腺病毒介导的人寡肽转运蛋白 PEPT1 异源表达增强药物向肝脏的输送”J Pharmacol Exp Ther。

Naruhashi K: "Active intestinal secretion of new quinolone antimicrobials and the partial contribution of P-glycoprotein"J. Pharm. Pharmacol.. 53・5. 699-709 (2001)

Naruhashi K：“新型喹诺酮类抗菌剂的活性肠道分泌和 P-糖蛋白的部分贡献”J. Pharmacol.. 53・5 (2001)。

崔吉道: "トランスポーターの細胞内局在化機構"薬物動態. 15・1. 496-497 (2000)

崔吉道：“转运蛋白的细胞内定位机制”15・1（2000）。