BBB指向性トランスポーター発現アデノウイルスベクターを用いた抗がん剤脳腫瘍送達

使用表达 BBB 定向转运蛋白的腺病毒载体进行抗癌药物脑肿瘤递送

• 批准号: 13218052
• 负责人: 崔 吉道
• 金额: $ 5.38万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13218052/
• 关键词: 血液脳関門; 抗がん剤; トランスポーター; オリゴペプチド; アデノウイルス; green fluoresscetprotein; 蛍光顕微鏡; ドラックデリバリー

中枢へ抗がん剤を送達するためには、その移行障壁となる血液脳関門(BBB)を克服する必要がある。そこで本研究では、脳腫瘍に焦点をあて、ペプチドトランスポーターをBBBに発現させることにより、ペプチド様抗がん剤を選択的に送達することを目的として以下の検討を行った。1.ペプチド性抗がん剤を輸送するオリゴペプチドトランスポーターhPEPT1を発現するアデノウイルスベクターAdhPEPT1-EYFPを作製し、血液脳関門におけるペプチド輸送機能発現を株化細胞RBEC1を用いてin vitroで確認した。AdhPEPT1-EYFPの感染効率はその他の培養細胞と比較してあまり高いものではなかったが、放射性標識カルノシンを基質とした輸送活性はGFP発現アデノウイルス感染細胞あるいは非感染細胞と比較して、約10倍程度の取り込み上昇が見られた。2.In vivoでの輸送機能発現を検討するに当たって、まずは感染効率の高い肝臓を用いてin vivoでの外来オリゴペプチドトランスポーター導入により、どの程度のペプチド化合物の組織移行性向上が見られるかを検討した。マウスにAdhPEPT1-EYFPを静脈投与し、hPEPT1-EYFPの発現をRT-PCRならびにWestern blot、凍結切片の免疫染色により検討したところ、いずれの実験によってもhPEPT1-EYFPの発現が確認された。そこで、AdhPEPT1-EYFPに感染したマウスにカルノシンを静脈内投与して、30分後に肝臓への組織移行性を評価したところ、カルノシンのKp値は約7倍に増大した。このことから本ベクターを用いてin vivoにおいても臓器レベルでペプチド輸送活性を有効に付与できることが示された。一般に脳移行性の低い化合物について同様の検討を行った場合、例えば細胞間隙にのみ分布するイヌリンを用いて測定すると、約0.2程度の値がえられる。このことから、もし仮にAdhPEPT1-EYFPによる脳毛細血管内皮細胞への発現効率が肝臓の35分の1以上であるとするならば、血液脳関門においても何らかの輸送活性が検出できる可能性が考えられた。

The central anti-virus system is used to get rid of the disease, to move to the barrier, to the blood gate (BBB), to overcome the problems necessary. In the course of this study, we need to focus on the purpose of this study, and we need to know that the following information is available for the purpose of this study, which is the focus of this study, the target of this study, the focus of this study, the target of this study, and so on. 1. You can use your hPEPT1 to make sure that you can use your in vitro to make sure that you can make sure that you can use your own in vitro to make sure that you can make sure that you can use your own in vitro to confirm your health. The rate of AdhPEPT1-EYFP infection was higher than that of other cells, and the activity of GFP was higher than that of non-infected cells, about 10 times higher than that of normal cells. The 2.In vivo transport transmitter can achieve a high rate of infection in the liver, which can be detected by the use of in vivo, extraneous, sensitive, high-risk, high-risk, high After AdhPEPT1-EYFP injection, hPEPT1-EYFP detected RT-PCR infection, Western blot, section immunostaining, immunostaining, hPEPT1-EYFP, and confirmation. After 30 minutes, the liver tissue was transferred and the Kp was about 7 times larger than that of the control. In this case, you can use the in vivo device to pay for the activity. In general, the migration of low-temperature compounds is similar to that of low-temperature compounds, such as cell gap distribution, cell gap distribution, cell gap, cell gap, cell gap The rate of vascular endothelial cell infection was higher than that of 35 points in the liver. The rate of AdhPEPT1-EYFP infection was higher than that of the control group.

项目成果

玉井郁巳: "薬物トランスポーター群の分子多型"薬物動態. 16・2. 127-133 (2001)

玉井郁美：“药物转运体的分子多态性” 药代动力学 16・2（2001）。

Kido Y: "Evaluation of blood-brain barrier transporters by co-culture of brain capillary endothelial cells w ith astrocytes"Drug Metabol. Pharmacokinet.. 17・1. 34-41 (2002)

Kido Y：“通过脑毛细血管内皮细胞与星形胶质细胞的共培养评价血脑屏障转运蛋白”《药物代谢》.. 17・1 (2002)。

Kido Y: "Molecular and functional identification of large neutral amino acid transporters LAT1 and LAT2 and their pharmacological relevance at the blood-brain barrier"J. Pharm. Pharmacol.. 53・4. 497-503 (2001)

Kido Y：“大中性氨基酸转运蛋白 LAT1 和 LAT2 的分子和功能鉴定及其在血脑屏障中的药理学相关性”J. Pharmacol.. 53・4 (2001)。

Kido Y: "Functional relevance of carnitine transporter OCTN2 to brain distribution of L-carnitine and acetyl-L-camitine across the blood-brain barrier"J. Neurochem.. 79・5. 959-969 (2001)

Kido Y：“肉碱转运蛋白 OCTN2 与 L-肉碱和乙酰基-L-肉碱跨血脑屏障的脑分布的功能相关性”J. Neurochem.. 79・5 (2001)。

崔 吉道: "トランスポーターを介した薬物相互作用"医学のあゆみ. 197・1. 23-31 (2001)

Choi，Gil-do：“转运蛋白介导的药物相互作用”医学史197・1（2001）。