薬物輸送トランスポーターの迅速同定システムの構築とその寄与の推定

药物转运蛋白快速识别系统的构建及其贡献评估

• 批准号: 16790103
• 负责人: 崔 吉道
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Kyoritsu University of Pharmacy
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790103/
• 关键词: トランスポーター; mRNA発現; 皮膚透過性; 消化管吸収; 肝取り込み; PDZ domain; 機能的カップリング; キサンチンオキシダーゼ; cDNA; 発現レベル; PDZタンパク質; 体内動態変動; SNPs; ループ利尿薬; 分子認識

NSAIDsのフルルビプロフェンとインドメタシンの皮膚透過性を検討したところ、両薬物の皮膚透過はpH依存性で基質濃度に対して飽和性を示した。皮膚におけるトランスポーターmRNAの発現を検討したところ、MRP,OATP,MCT,OCTNなどのトランスポーターの発現が認められた。ニューキノロン抗菌薬グレパフロキサシンおよび蛍光性有機アニオン化合物Fluo-3/AMについて、MRP1遺伝子欠損マウスおよび正常マウスにおける組織対血中濃度比と皮膚透過性を検討した。その結果、グレパフロキサシンの皮膚への分布はMRP1欠損マウスにおいてより高いことがわかった。また、Fluo-3の皮膚透過はプロベネシドやFCCP存在下で促進されること、Fluo-3の皮膚への蓄積がMRP1欠損マウスにおいてより高いことが明らかとなった。これらの結果から、NSAIDs、ニューキノロン抗菌薬、蛍光性有機アニオン化合物等の皮膚透過に、MRP,OATP,MCT,OCTNなどのトランスポーターが関与する可能性が示された。新規キサンチンオキシダーゼ阻害薬Y-700の肝取り込み機構の解析を行った。ラット遊離肝細胞を用いた取り込み実験を行ったところ、Na^+依存性でKm値が約100μMの飽和性の能動輸送機構の存在が明らかとなった。種々トランスポーター発現細胞および阻害剤を用いた検討から、新規なトランスポーターの関与が示唆された。これまで、ペプチド類似化合物の消化管吸収にH^+濃度勾配を駆動力とするオリゴペプチドトランスポーターPEPT1が関与することが知られている。小腸刷子縁膜には種々Na^+/H^+交換体が発現することから、PEPT1との機能的カップリングについて検討を行った。HEK293細胞にPEPT1及びNHE3を共発現させたところ、PEPT1によるペプチド輸送活性が増加し、Na^+依存的が見られたことから、PEPT1とNHE3との間に機能的カップリングが示唆された。この知見は、薬物動態におけるトランスポーターの役割を評価するためには、輸送に直接関わるトランスポーター分子のみならず、それと共存する他のトランスポーター分子の働きにも着目することが必要であることを示唆するものである。

NSAIDs の フ ル ル ビ プ ロ フ ェ ン と イ ン ド メ タ シ ン の skin permeability を beg し 検 た と こ ろ, struck 薬 content through は の skin pH dependency で substrate concentration に し seaborne て saturability を shown し た. Skin に お け る ト ラ ン ス ポ ー タ ー mRNA の 発 を now beg し 検 た と こ ろ, MRP, OATP, MCT, OCTN な ど の ト ラ ン ス ポ ー タ ー の 発 が now recognize め ら れ た. ニ ュ ー キ ノ ロ ン antibacterial 薬 グ レ パ フ ロ キ サ シ ン お よ び 蛍 optical organic ア ニ オ ン compound Fluo - 3 / AM に つ い て, traces of MRP1 伝 son owe loss マ ウ ス お よ び normal マ ウ ス に お け る group polices blood levels than と skin permeability を beg し 検 た. Youdaoplaceholder0 <s:1> results, グレパフロキサシ <e:1> <s:1> skin へ <e:1> distribution そ MRP1 underdamaged <s:1> ウスにお てよ てよ high <s:1> とがわ とがわ とがわ った. ま た, Fluo - 3 の skin through は プ ロ ベ ネ シ ド や FCCP presence で promote さ れ る こ と, Fluo - 3 の skin へ の accumulation が MRP1 owe loss マ ウ ス に お い て よ り high い こ と が Ming ら か と な っ た. こ れ ら の results か ら, NSAIDs, ニ ュ ー キ ノ ロ ン antibacterial 薬, 蛍 optical organic ア ニ オ ン compounds such as の skin through に, MRP, OATP, MCT, OCTN な ど の ト ラ ン ス ポ ー タ ー が masato and す が る possibility in さ れ た. New regulations: キサ, チ, <s:1>, キシダ, キシダ, ゼ the drug Y-700 is used to prevent the liver from being taken from 込み. Institutional analysis: を lines: った. ラ ッ ト を free liver cells with い た take り 込 み be 験 を line っ た と こ ろ, Na ^ + dependence on で Km numerical が about 100 microns の saturability の active transport agency の exist が Ming ら か と な っ た. Kind of 々 ト ラ ン ス ポ ー タ ー 発 now cells お よ び resistance against tonic を い た 検 please か ら, new rules な ト ラ ン ス ポ ー タ ー の masato and が in stopping さ れ た. こ れ ま で, ペ プ チ ド similar compounds の digestive tube suction 収 に H ^ + concentration hook with を 駆 power と す る オ リ ゴ ペ プ チ ド ト ラ ン ス ポ ー タ ー PEPT1 が masato and す る こ と が know ら れ て い る. Small bowel brush try に は kind 々 Na + / H ^ ^ + permutoid が 発 now す る こ と か ら, PEPT1 と の functionary カ ッ プ リ ン グ に つ い て 検 line for を っ た. HEK293 cells に PEPT1 and び NHE3 を 発 now total さ せ た と こ ろ, PEPT1 に よ る ペ プ チ ド conveying active が raised plus し, Na ^ + dependent が see ら れ た こ と か ら, PEPT1 と NHE3 と の に function between カ ッ プ リ ン グ が in stopping さ れ た. こ の knowledge は, 薬 dynamic に お け る ト ラ ン ス ポ ー タ ー cut を の service evaluation 価 す る た め に は, conveying に directly masato わ る ト ラ ン ス ポ ー タ ー molecular の み な ら ず, そ れ と coexistence す る he の ト ラ ン ス ポ ー タ ー molecular の 働 き に も with mesh す る こ と が necessary で あ る こ と を in stopping す る も の で あ る.

项目成果

Transporter-mediated drug discovery : -Recent progress and experimental approaches-.

转运蛋白介导的药物发现：-最新进展和实验方法-。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Drug Discovery Today. 9(16)
• 作者: Sai Y;Tsuji A.
• 通讯作者: Tsuji A.

Screening of the interaction between xenobiotic transporters and PDZ proteins

• DOI: 10.1023/b:pham.0000045244.83999.43
• 发表时间: 2004-10-01
• 期刊: PHARMACEUTICAL RESEARCH
• 影响因子: 3.7
• 作者: Kato, Y;Yoshida, K;Tsuji, A
• 通讯作者: Tsuji, A

PDZK1 directly regulates the function of organic cation/carnitine transporter OCTN2

• DOI: 10.1124/mol.104.002212
• 发表时间: 2005-03-01
• 期刊: MOLECULAR PHARMACOLOGY
• 影响因子: 3.6
• 作者: Kato, Y;Sai, Y;Tsuji, A
• 通讯作者: Tsuji, A

Biochemical and molecular pharmacological aspects of transporters as determinants of drug disposition.

• DOI: 10.2133/dmpk.20.91
• 发表时间: 2005-04-01
• 期刊: Drug metabolism and pharmacokinetics
• 影响因子: 2.1
• 作者: Sai, Yoshimichi

Multidrug resistance-associated protein 1 (MRP1) functions as an efflux pump of xenobiotics in the skin.

多药耐药相关蛋白 1 (MRP1) 在皮肤中充当外源物质的外排泵。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Pharm Res 22(6)
• 作者: Li Q;Kato Y;Sai Y;Tsuji A
• 通讯作者: Tsuji A