癌基因产物蛋白Vav分子识别机制的结构生物学研究-猫眼课题宝

癌基因产物蛋白Vav分子识别机制的结构生物学研究

批准号：

12780446

负责人：

小椋賢治

金额：

$1.34万

依托单位：

Hokkaido University

依托单位国家：

日本

项目类别：

Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

财政年份：

2000

资助国家：

日本

项目状态：

已结题

起止时间：

2000 至 2001

来源：

https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12780446/

关键词：

Vav SH3ドメイン核磁気共鳴構造生物学核磁気共鳴分光法シグナル伝達

项目摘要

项目成果

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中文摘要

翻译

VavのSH3-SH2-SH3ドメイン領域について,N末端側SH3ドメインとC末端側SH3ドメインに関して立体構造解析を完了し,以下に示す結果を得た.[N末端側SH3ドメイン]このSH3ドメインは,その内部にSH3ドメインの結合標的とされている"プロリンに富む領域"を含んでいる.このSH3ドメインの核磁気共鳴スペクトルを測定し,その立体構造を精密に決定した.さらに,このSH3ドメインに対して,生体内での主要な結合ターゲットであると考えられているGrb2のC末端側SH3ドメインを溶液中で滴定し,核磁気共鳴スペクトルの変化を追跡したところ,両者の結合様式は,一般的な"プロリンに富む領域"を認識する相互作用機構とはまったく異なり,SH3ドメインとしては新規な分子認識機構によることがわかった.この研究成果は雑誌論文として発表した.[C末端側SH3ドメイン]このSH3ドメインは,N末端側SH3ドメインとは異なり,一般的なSH3ドメインの特徴を保持している.このSH3ドメインについて安定同位体試料を作成した.また,その結合標的タンパク質であるhnRNP-K由来の"プロリンに富む領域"を含む合成ペプチドとの複合体の核磁気共鳴スペクトルを測定し,その立体構造を精密に決定した.その結果,両者の相互作用様式は,SH3ドメインの分類法で"マイナス配向"の結合であることがわかった.この結果を基に,VavのN末端側SH3ドメインとC末端側SH3ドメインが結合しうると考え,His-tagプルダウンアッセイをおこなったところ,両ドメインの結合をSDS-PAGEゲル上にて確認した.この結果は,VavのSH3-SH2-SH3ドメイン領域のふたつのSH3ドメインが分子内マスクすることで,標的分子との相互作用のオン・オフを厳密に制御していることを示唆する.この研究成果は,現在雑誌論文として投稿準備中である.

英文摘要

期刊论文(2)

专著(0)

科研奖励(0)

会议论文

Kenji Ogura: "Solution Structure of N-terminal SH3 domain of Vav and the recognition site for Grb2 C-terminal SH3 domain"Journal of Biomolecular NMR. 22. 37-46 (2002)

Kenji Ogura：“Vav N 端 SH3 结构域的解决方案结构和 Grb2 C 端 SH3 结构域的识别位点”《生物分子 NMR 杂志》。

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：