SH3ドメインをもつアダプター蛋白質の活性化と高次構造変化のメカニズム

SH3结构域衔接蛋白的激活和构象变化机制

• 批准号: 13014216
• 负责人: 住本 英樹
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13014216/
• 关键词: 免疫学; NADPHAオキシダーゼ; 活性酵素; 蛋白質; シグナル伝達

食細胞NADPHオキシダーゼの酵素本体は、細胞膜のシトクロムb_<558>である。本酵素の活性化には、特異的アダプター蛋白質(p47^<phox>,p67^<phox>とp40^<phox>:各々SH3ドメインをもつ)が刺激依存性に細胞質から細胞膜に移行してシトクロムb_<558>と相互作用する必要がある。私共はオキシダーゼの活性化機構を研究し、平成13年度は以下のような成果を得た。(1)p40^<phox>は休止時細胞でp67^<phox>と会合している蛋白質であるが、この両者の結合は、新規なドメイン間(p40^<phox>のPCモチーフとp67^<phox>のPB1ドメイン)の全く新しいタイプの蛋白質間相互作用によるものであることを示した。更に、これら新規なドメインが酵母のシグナル伝達蛋白質(Cdc24pとBem1p)にも存在し、酵母のシグナル伝達においても重要な役割を担うことも明らかにするとともに、Bem1pのPB1ドメインの3次構造決定に成功した。p40^<phox>の役割は今まで不明だったが、PB1-PC相互作用によるp67^<phox>との結合を介してp67^<phox>とp47^<phox>の膜移行を促進させ、オキシダーゼ活性化を正に制御していることを明らかにした。(2)p47^<phox>とp40^<phox>(オキシダーゼの調節因子)のN末領域に新規ドメインを見い出していたが(PX/PB2ドメイン)、更に、P47^<phox>PXドメインの3次構造を決定するとともに、PXドメインがphosphoinositides結合能をもつこと、P47^<phox>のPXドメインはp47^<phox>の膜移行およびオキシダーゼ活性化に必須であることを示した。またp47^<phox>のPXドメインがSH3ドメインとの分子内結合により負に制御されていることを明らかにした。

Cell NADPH is the enzyme that feeds the cell membrane<558>. The activation of this enzyme is dependent on stimulus-dependent cytoplasmic and membrane-specific protein (p47^<phox>, p67 ^<phox>, p40^<phox>: each SH3 protein) interactions<558>. In 2013, the following results were obtained: (1)p40^<phox>protein interaction with p67^protein at rest <phox>(p40^<phox>PC ^p67^<phox>PB1 ^protein). In addition, three structural decisions were successfully made for yeast protein (Cdc24p and Bem 1p), yeast protein (Cdc24p and Bem 1p) and yeast protein (Cdc24p and Bem 1p). p67-p47 membrane migration is promoted <phox>by PB1-PC interaction <phox><phox>and is inhibited by p40-p47 <phox>membrane activation. (2)p47^<phox>and p40^<phox>(PX/PB2) are the three order structures of the N-terminal domain, which are determined by <phox>the binding energy of phosphoinositides and the membrane migration of PX ^and p47 <phox>^<phox>. PX <phox>is a protein that binds to the p47 molecule and binds to the p47 molecule.

项目成果

Ago, T., et al.: "The PX Domain as a Novel Phosphoinosaitide-Binding Module"Biochemical Biophysical Research Communications. 287.3. 733-738 (2001)

Ago, T. 等人：“PX 结构域作为新型磷酸肌醇结合模块”生物化学生物物理研究通讯。

Hiroaki, H., et al.: "Solution structure of the PX domain, a target of the SH3 domain"Nature Strctural Biology. 8.5. 526-530 (2001)

Hiroaki, H. 等人：“PX 结构域的解决方案结构，SH3 结构域的目标”《自然结构生物学》。

Ito, T., et al.: "Novel modular domain PB1 recognizes PC motif to mediate functional protein-protein interactions"EMBO Journal. 20.15. 3938-3946 (2001)

Ito, T. 等人：“新型模块化结构域 PB1 识别 PC 基序以介导功能性蛋白质-蛋白质相互作用”EMBO 杂志。

Terasawa, H., et al.: "Structure and ligand recognition of the PB1 domain : a novel protein module capable of binding PC motif-containing protein"EMBO Journal. 20.15. 3947-3956 (2001)

Terasawa, H. 等人：“PB1 结构域的结构和配体识别：一种能够结合含有 PC 基序的蛋白质的新型蛋白质模块”EMBO 杂志。

Shiose, A., et al.: "Nox4, a novel homologue of the phagocyte NADPH oxidase catalytic subunit gp91^<phox>"Amsterdam The Netherlands, Elsevier Science (in press). (2002)

Shiose, A. 等人：“Nox4，吞噬细胞 NADPH 氧化酶催化亚基 gp91^<phox> 的新型同源物”，荷兰阿姆斯特丹，爱思唯尔科学（出版中）。