好中球NADPHオキシダーゼの細胞質から膜への信号変換に関する構造生物学的研究

中性粒细胞NADPH氧化酶胞质至胞膜信号转导的结构生物学研究

• 批准号: 17048001
• 负责人: 小椋 賢治
• 金额: $ 3.26万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17048001/
• 关键词: NADPHオキシダーゼ; SH3ドメイン; 核磁気共鳴; X線結晶構造解析; NADPHオキシターゼ; NMR

好中球の活性酸素発生系にて活性酸素発生を触媒するNADPHオキシダーゼは細胞質因子(D47Dhox, p67phox, p40phox)と膜タンパク質(gp91phox, p22phox)の複合体である.NADPHオキシダーゼの活性化には,それぞれの因子の立体構造変化,および,それにより誘起される分子間相互作用の再構成が必須である.研究代表者は,細胞質因子タンパク質と膜タンパク質間において,オキシダーゼ活性化のシグナルが分子間でどのように伝達されていくのか,という間題点に関して,X線結晶構造解析およびNMRの手法を用いて,立体構造およびダイナミクスの見地からの解明を目指している.p47phoxの分子認識機構(論文1および2)好中球の活性酸素発生系にて活性酸素発生を触媒するNADPHオキシダーゼは細胞質因子と膜タンパク質の複合体である.活性酸素発生系の休止状態においては,細胞質因子p47phoxは分子内マスクされており,膜タンパク質p22phoxと結合できないが,細胞刺激にともない分子内マスクが解除され,p22phoxと結合し,活性酸素を発生できるようになる.研究代表者らは,核磁気共鳴の手法を用いて,活性化状態におけるp47phoxの立体構造を解析した.その結果,活性化状態の複合体立体構造において,p22phoxに関して従来考えられていた相互作用必須領域よりもC未端側に10アミノ酸残基程度延長した領域がp47phox-p22phoxタンパク質間相互作用に重要であることがわかった.

The active acid production system of Haozhong ball にて active acid production を catalyst するNADPH <s:1> キシダ <s:1> ゼ タ cytoplasmic factors (D47Dhox, p67phox, p40phox)と membrane タ パ sclera (gp91phox) P22phox) の complex で あ る. NADPH オ キ シ ダ ー ゼ の activeness に は, そ れ ぞ れ の factor の three-dimensional structure variations, お よ び, そ れ に よ り induced さ れ る intermolecular interactions の reconstitution が must で あ る. Research representatives は, cytoplasmic factor タ ン パ ク qualitative と membrane タ ン パ ク mass between に お い て, オ キ シ ダ ー ゼ activeness の シ グ ナ ル が intermolecular で ど の よ う に 伝 da さ れ て い く の か, と い う problems point に masato し て, X-ray crystal structure parsing お よ び NMR の gimmick を with い て, three-dimensional structure お よ び ダ イ ナ ミ ク ス の insight か ら の interpret を mesh Refers to し て い る. P47phox の molecular understanding institutions (article 1 お よ び 2) ball 発 の acid active element in fasten に て acid active element 発 raw を catalyst す る NADPH オ キ シ ダ ー ゼ は cytoplasmic factors と membrane タ ン パ ク qualitative の complex で あ る. Active acid element 発 raw is の inactivity に お い て は, cytoplasmic factors p47phox は intramolecular マ ス ク さ れ て お り, membrane タ ン パ ク qualitative p22phox と combining で き な い が, cells stimulate に と も な い intramolecular マ ス ク が remove さ れ, p22phox と し, active acid element を 発 raw で き る よ う に な る. Research representatives ら は, nuclear magnetic 気 resonance の gimmick を with い て, activation state に お け る p47phox の three-dimensional structure analytical し を た. そ の as a result, the activation state の complex three-dimensional structure に お い て, p22phox に masato し て examine え 従 ら れ て い た interaction must field よ り も C end side に 10 ア ミ ノ extended し acid residue level The た field がp47phox-p22phoxタ パ パ interstitial interstitial interaction に important である とがわ とがわ った った った

项目成果

1H, 13C and 15N resonance assignments of the backbone and methyl groups of the 24 kDa tetratricopeptide repeat domain in p67(phox).

p67(phox) 中 24 kDa 四肽重复结构域的主链和甲基的 1H、13C 和 15N 共振分配。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of Biomolecular NMR 32
• 作者: Yoshida;S.
• 通讯作者: S.

NMR solution structure of the tandem Src homology 3 domains of p47phox complexed with a p22phox-derived proline-rich peptide

• DOI: 10.1074/jbc.m505193200
• 发表时间: 2006-02-10
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Ogura, K;Nobuhisa, I;Inagaki, F
• 通讯作者: Inagaki, F

Activation of the superoxide-producing phagocyte NADPH oxidase requires co-operation between the tandem SH3 domains of p47phox in recognition of a polyproline type II helix and an adjacent alpha-helix of p22phox.

• DOI: 10.1042/bj20051899
• 发表时间: 2006-05
• 期刊: The Biochemical journal
• 作者: I. Nobuhisa;R. Takeya;K. Ogura;N. Ueno;D. Kohda;F. Inagaki;H. Sumimoto

好中球活性酸素発生系を制御する蛋白質p47^<phox>の新規分子認識機構

p47^<phox>（一种控制中性粒细胞活性氧生成系统的蛋白质）的新型分子识别机制

• 发表时间: 2005
• 期刊: 蛋白質核酸酵素 50
• 作者: Ogura;K.;小椋賢治
• 通讯作者: 小椋賢治