M.catarrhalis由来中耳炎モデルでのTLR-5の誘導と局所免疫応答

点击翻译按钮获取中文摘要

これまで肺炎球菌、無莢膜型インフルエンザ菌に関しては単独の感染モデルが作成され中耳内の免疫応答の検討がなされてきたが、Moraxella catarrhalisに関しては詳細な報告は少ないのが現状である。M.catarrhalis自体の感染力は弱く早期に中耳内より消失してしまうため中耳炎の起炎菌として重要視されなかった事や、厳密にはヒトの中耳炎の起炎菌であり動物モデルの作成が困難であったためと考えられる。今回我々はM.catarrhalis単独での中耳への影響を調査するために動物モデル作成を試みた。M.catarrhalisに関しては粘膜への接着因子として、細菌表面に存在するpiliの有無が関係している可能性が示唆されている。中耳炎患者より臨床分離したpili有り(pili(+))群とpiliなし(pili(-))群のM.catarrhalisをBalb/cマウスの中耳骨胞に10^9CFU/mlの各濃度をそれぞれ注入後6、12、24、72時間、1、2週間後のマウスの鼓膜を観察した。中耳局所への炎症細胞浸潤は6時間後から増加し始め24～72時間後にかけてピークがあり2週間後まで炎症細胞浸潤を認めたが、pili(-)群で24、72時間に炎症細胞の増加が著明であった。M.catarrhalisの細菌のクリアランスに関して、Piliの有無が関係している可能性が示唆された。細胞分画では好中球主体の炎症反応であり、リンパ球・マクロファージの浸潤はわずかであった。これもpili(-)群で72時間後に有意差を認めた。H-E染色所見上感染後12時間より好中球を中心とした炎症細胞浸潤が増加し、粘膜の肥厚も著明になった。1週間後ピークを認めたが2週間後も炎症細胞は認められた。Pili(-)群では明らかにPili(+)群より72時間後、1週間後に粘膜の肥厚、炎症細胞の浸潤が著明であった。ELASA法ではTNF-αはpili(+)群でpili(-)群より24,72時間後、1、2週間後に有意に増加していたが、IL-1βは差異を認めなかった。Real time RT-PCR法を用いてTLR2.4.5.9の測定行った所、TLR5 mRNAの発現が6時間後にpili(+)群がpili(-)群より有意に高い傾向を認めた。我々の研究ではM.catarrhalisに関してはpiliがTLR5の誘導を促し、初期の免疫反応の誘導に関与している可能性を示した。