ブタ内在性レトロウイルスの感染における補体制御因子の効果

补体调节剂对猪内源性逆转录病毒感染的影响

• 批准号: 22931001
• 负责人: 山本 亜紀
• 金额: $ 0.45万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22931001/
• 关键词: ブタ内在性レトロウイルス; 補体制御因子; 遺伝子改変ブタ

1.研究目的臓器移植医療における絶対的なドナー不足を解決する手段の一つとして、ヒトと生理学的・解剖学的特性が近く、倫理的問題の少ないブタを用いた異種移植がある。しかし、すべてのブタのゲノム内には、ヒト細胞への感染指向性を有するブタ内在性レトロウイルス(Porcine Endogenous Retrovirus ; PERV)が存在し、新たな人獣共通感染症の発現が危惧されている。これまでに、異種移植での拒絶反応を克服すべく、種々の遺伝子改変が行われてきた。現在、各国で臨床治療に用いられているブタは野生型であり、遺伝子改変ブタを用いた場合、ヒト免疫系に対するPERV抵抗性を高める可能性があり、さらに臨床の異種移植では強力な免疫抑制剤を使用するため、PERV感染の危険性は一層増大する可能性がある。したがって、ブタを用いた異種移植の実現には、PERVの系統的感染制御法の確立が不可欠である。2.研究方法補体制御因子DAF(CD55)の機能ドメインSCR2-4を重合させた遺伝子を構築・作製し、PERVを強発現させたブタ血管内皮細胞のcell line (PEC(LacZ)/PERV-B)に発現させた。PEC(LacZ)/PERV-BをParentalとし、ヒト293細胞を標的細胞としたLacZ Pseudotype Assayによりヒト細胞へのPERV感染性を比較・検討した。導入したDAFが細胞上およびPERV粒子上で機能しているかを、ヒト血清およびDAFの抗体と反応させ、補体抵抗性を調べた。3.研究成果本研究では、PERV粒子表面に発現する補体制御因子の大きさの限界とそのメカニズムを検討し、拒絶反応に耐え得る、PERV感染性の極めて低い遺伝子改変ブタ、特に補体制御因子をTransgenicしたブタの作製を方向づけた。

1. The research objective to viscera health に お け る off of seaborne な ド ナ ー を す to solve の る means a つ と し て, ヒ ト と characteristics of physiology, anatomy が nearly く, less ethical problems の な い ブ タ を with い た xenotransplantation が あ る. し か し, す べ て の ブ タ の ゲ ノ ム within に は, ヒ ト cells へ の infection directionality を す る ブ タ internality レ ト ロ ウ イ ル ス (Porcine Endogenous Retrovirus; passing PERV) が し, new た な common people 獣 adapting just-in-time inventory の 発 now が of it さ れ て い る. こ れ ま で に, xenotransplantation で の refused to reverse 応 を overcome す べ く, kind of 々 の heritage 伝 child change - line が わ れ て き た. Now, nations に で clinical treatment with い ら れ て い る ブ タ は wild-type で あ り, but 伝 change - ブ タ を with い た occasions, ヒ ト immune system に す seaborne る passing PERV resistance high を め る possibility が あ り, さ ら に の clinical xenotransplantation で は powerful な immunosuppression tonic を use す る た め, passing PERV infection の dangerous 険 は layer raised large す る possibility が あ る . Youdaoplaceholder0, ブタを, the implementation of に に by using the た た xenograft system, and the infection control method <e:1> of the PERV system establish that が must not be lacking in である. Factor 2. Research methods complement system initiates a DAF (CD55) の function ド メ イ ン SCR2-4 を overlap さ せ た posthumous son 伝 を し the construct, cropping, passing PERV を 発 now さ せ た ブ タ endothelial cells の cell line (PEC (LacZ)/passing PERV - B) に 発 now さ せ た. PEC (LacZ)/passing PERV - B を Parental と し, ヒ ト 293 cells を mark と し た LacZ Pseudotype Assay に よ り ヒ ト cells へ の passing PERV infectious を comparison, 検 beg し た. Import し た DAF が cells お よ び で function on passing PERV particles し て い る か を, ヒ ト serum お よ び DAF と の antibodies against 応 さ せ, complement resistance を べ た. 3. The research results of this study で は, passing PERV particles surface に 発 now す る filling system royal factor の big き さ の limit と そ の メ カ ニ ズ ム を beg し 検, refused to reverse 応 に え る, passing PERV resistant infectious の め extremely low て い heritage 伝 child change - ブ タ, royal factor を に filling system Transgenic し た ブ タ の cropping を direction づ け た.

项目成果

A newly cloned pig dolichyl‐phosphate mannosyl‐transferase for preventing the transmission of porcine endogenous retrovirus to human cells

• DOI: 10.1111/j.1432-2277.2009.00999.x
• 发表时间: 2010-04
• 期刊: Transplant International
• 影响因子: 3.1
• 作者: A. Yamamoto;S. Nakatsu;A. Kondo;Tetsuya Asato;M. Okabe;M. Fukuzawa;S. Miyagawa

A study of the Prevention of PERV Infection by siRNA on Pig Dolichyl-Phosphate Mannosyltransferase

猪多甘醇磷酸甘露糖基转移酶siRNA预防PERV感染的研究

• 发表时间: 2010
• 作者: Aki Yamamoto;Akihiro Kondo;Shino Nakatsu;Kosuke Ikeda;Sabere Firdawes;Dandan Wang;Yuichi Takama;Takehisa Ueno;Masahiro Fukuzawa;Shuji Miyagawa
• 通讯作者: Shuji Miyagawa

Expression of complement regulatory protein on porcine endogenous retrovirus(PERV) depends on molecular size

猪内源性逆转录病毒（PERV）补体调节蛋白的表达取决于分子大小

• 发表时间: 2010
• 期刊: Transplant Immunology
• 影响因子: 1.5
• 作者: Aki Yamamoto;Chizuko Kobayashi;Saya Yamashita;Takayuki Miyazawa;Masaru Okabe;Masahiro Fukuzawa;Shuji Miyagawa
• 通讯作者: Shuji Miyagawa