補体制御因子SCRタンパク質の受精と分子進化に関する研究

补体调节因子SCR蛋白的受精及分子进化研究

• 批准号: 02J11444
• 负责人: 井上 直和
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Osaka University (2003)Research Institute, Osaka Medical Center for Cancer and Cardiovascular Disaeses (2002)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J11444/
• 关键词: 補体; 補体制御因子; CD46; 精子、卵子; 受精; 先体反応; SCRタンパク質; ノックアウトマウス; 精子; 卵子

私は、昨年度に引き続きCD46ノックアウトマウスを用いて受精過程におけるその機能解析を行っている。昨年度は、CD46ノックアウトマウスの作製に成功し、そのマウスの精子が野生型と比較して受精可能になるために必要な先体反応(精子細胞膜と先体外膜との融合)を起こしやすくなっており、CD46は先体反応を制御する役割があることを明らかにした。本年度は、CD46ノックアウトマウスのこの表現型がCD46本来の機能であるのかを評価する目的と、ヒトCD46でも機能の代償が可能かを知るためにヒトCD46のトランスジェニックマウスを作製した。その表現型解析については、来年度行う予定である。また、受精における補体の主要因子C3とCD46の関係を調べる目的で、C3/CD46ダブルノックアウトマウスを作製した。しかし、雌雄どちらのダブルノックアウトマウスともに正常な妊孕性を示した(未発表)。今後は、先体反応について詳細な解析を行うつもりである。またこの成果は、23rd Annual Meeting of the American Society for Reproductive Immunologyにおいて口頭発表を行った。もう一つの研究課題であるSCRタンパク質の分子進化については、我々が以前発表したニワトリの補体制御分子CrempとCD46の相同性のある遺伝子配列を用いて、円口類のヤツメウナギの肝臓に発現する新規補体制御因子の単離に成功した。この分子(lamprey C4bp-like C regulatory protein ; Lacrep)は、SCRドメインを8個もつその分子骨格から、ヒトの分泌型補体制御因子、C4bpのα鎖のホモログと考えられた。また他のSCRタンパク質とも、個々のSCRドメインにおいて30%を超える高い相同性を示した。さらにLacrepは、補体制御に関する生理活性もほ乳類と同様に存在していた。このことから、この分子は一次構造と生理活性の両方において、補体制御性SCRタンパク質の祖先分子に近い分子であることが示唆された。またこの成果は、第33回日本免疫学会総会・学術集会においてポスター発表を行った。

Private は, yesterday's annual に き 続 き CD46 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス を with い て fertilization に お け る そ の line function analytical を っ て い る. Yesterday annual は, CD46 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス の as に し success, そ の マ ウ ス の sperm が wild-type と compare し て fertilization may に な る た め に な body first necessary against 応 (sperm membrane と extracorporeal membrane first と の fusion) を up こ し や す く な っ て お り, CD46 は body first against 応 を suppression す る service cut が あ る こ と を Ming ら か に し た. This annual は, CD46 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス の こ の phenotype が CD46 の function originally で あ る の か を review 価 す る purpose と, ヒ ト CD46 で も function の compensatory が may か を know る た め に ヒ ト CD46 の ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス を cropping し た. Phenotypic analysis of そ そ に て て, the line for the next year う is set at である. ま た, fertilization に お け る complement C3 と の main factor CD46 の masato is を adjustable べ る purpose で, C3 / CD46 ダ ブ ル ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス を cropping し た. し か し, male and female ど ち ら の ダ ブ ル ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス と も に normal な perfect pregnancy sex を shown し た (not 発 table). In the future, the detailed な analysis of 応に, 応に and て will be conducted. Detailed な analysis of を lines, う,, and である. Youdaoplaceholder0 <s:1> the results of 23rd, 23rd Annual Meeting of the American Society for Reproductive Immunologyにお て oral presentation を った. も う a つ の research topic で あ る SCR タ ン パ ク qualitative の molecular evolution に つ い て は, I 々 が 発 table before し た ニ ワ ト リ の filling system royal molecular Cremp と CD46 の identity の あ る posthumous son 伝 matched with column を い て, mouth has drifted back towards &yen; の ヤ ツ メ ウ ナ ギ の is crucial liver に 発 now す る new rules to fill system royal factor の 単 from に successful し た. こ の molecule (lamprey C4bp - like C regulatory protein; Lacrep) は, SCR ド メ イ ン を eight も つ そ の molecular skeleton か ら, ヒ ト の secretory type filling system factor, C4bp の alpha lock の ホ モ ロ グ と exam え ら れ た. ま た he の SCR タ ン パ ク qualitative と も, a 々 の SCR ド メ イ ン に お い て 30% を super え る high い identity を shown し た. Youdaoplaceholder0 Lacrep に and supplementation are related to に physiological activity <e:1> ほ similar to milk と, に exist in て て た た た た た. こ の こ と か ら, こ の molecular は a tectonic と physiological activity の struck party に お い て, complement system royal sex SCR タ ン パ ク qualitative の ancestors に nearly い molecules で あ る こ と が in stopping さ れ た. Youdaoplaceholder0 てポスタ また the results of また, the 33rd Japan Society for Immunology 総 meeting and academic assembly にお てポスタ and てポスタ, the schedule of を and った.

项目成果

Katsushi Yamamoto, Naokazu Inoue, Riako Masuda, Akira Fujimori, Toshiyuki Saito, Shinobu Imajoh-Ohmi, Hiroshi Shinkai, Hisako Sakiyama: "Cloning of hamster type XVII collagen cDNA, and pathogenesis of anti-type XVII collagen antibody and complement in ham

Katsushi Yamamoto、Naokazu Inoue、Riako Masuda、Akira Fujimori、Toshiyuki Saito、Shinobu Imajoh-Ohmi、Hiroshi Shinkai、Hisako Sakiyama：“仓鼠 XVII 型胶原 cDNA 的克隆以及火腿中抗 XVII 型胶原抗体和补体的发病机制

Naokazu Inoue, Masahito Ikawa, Tomoko Nakanishi, Misako Matsumoto, Midori Nomura, Tsukasa Seya, Masaru Okabe: "Disruption of Mouse CD46 Causes an Accelerated Spontaneous Acrosome Reaction in Sperm"Molecular and Cellular Biology. 23. 2614-2622 (2003)

Naokazu Inoue、Masahito Ikawa、Tomoko Nakanishi、Misako Matsumoto、Midori Nomura、Tsukasa Seya、Masaru Okabe：“小鼠 CD46 的破坏导致精子中加速自发顶体反应”分子和细胞生物学。

Midori Nomura, Mitsue Kurita-Taniguchi, Kazuhiro Kondo, Naokazu Inoue, Misako Matsumoto, Koichi Yamanishi, Masaru Okabe, Tsukasa Seya: "Mechanism of host cell protection from complement in murine cytomegalovinis (CMV) infection : identification of a CMV-r

Midori Nomura、Mitsue Kurita-Taniguchi、Kazuhiro Kondo、Naokazu Inoue、Misako Matsumoto、Koichi Yamanishi、Masaru Okabe、Tsukasa Seya：“小鼠巨细胞病毒 (CMV) 感染中补体对宿主细胞的保护机制：CMV-r 的鉴定

Hisako Sakiyama, Takashi Nonaka, Riako Masuda, Naokazu Inoue, Yoshinori Kuboki, Mayumi Iijima, Yoshio Hirabayasi. Masahiko Takahagi, Kazuko Yoshida. Kazuko Kuriiwa, Michiteru Yoshida, Shinobu Imajoh-Ohmi: "Characterization of mineral deposits formed in cu

崎山久子、野中隆、增田里亚子、井上直和、久保木嘉德、饭岛真由美、平林义雄。