形質細胞様キラー樹状細胞の作製及び機能評価法の確立

浆细胞杀伤树突状细胞的制备及功能评价方法的建立

基本信息

批准号：
24930030
负责人：
小屋照継
金额：
$ 0.32万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24930030/
关键词：
樹状細胞免疫がん

项目摘要

本研究の目的は、NK細胞様の優れたキラー活性(腫瘍を殺傷する力)と、樹状細胞の抗原提示能を併せ持つ、形質細胞様キラー樹状細胞ワクチン(以下,ワクチン)の製造技術を確立し、その品質評価法を定める事であった。その為、補助金を使用して、ワクチン製造に用いるGMP(医薬品グレード)適合の細胞調製試薬、品質検査に必要な研究試薬を購入した。以下に研究内容と、経費を執行して得られた成果を示す。ワクチン製造に使用する材料を、研究レベルの試薬から、GMP適合(医薬品グレード)の細胞調製試薬に変更し、ヒトへ投与可能なレベルのワクチン製造技衛を構築した。ある特殊な環境下で製造を行う事で、約2倍に収率が向上し、高い生細胞率(90～99%)が得られる事を明らかにした。本製造技術は、製造の自動化、細胞医薬品化に大きく寄与すると期待される。ワクチンの品質検査に必要な研究試薬を用いて、種々の免疫学的検査手法を確立した。フローサイトメーターを使用したキラー活性(細胞障害活性)測定法、がん抗原WT1、MART-1特異的in vitro CTL(細胞障害性T細胞)誘導法、機能的なCTLを検出するELISPOT法を構築した。これらの検査手法によって、治療に用いるワクチンの品質評価基準を定める事が可能となった。また、ワクチンのキラー活性を飛躍的に向上させる方法を検討したところ、免疫賦活剤Xによって、あきらかにキラー活性が上昇する事を見い出した。現在、動物を用いた前臨床試験を進めている。以上の成果より、本研究の目的であった形質細胞様キラー樹状細胞ワクチンの製造および品質評価方法の確立を達成した。前臨床試験において、ワクチンの安全性、抗腫瘍効果を確認し、速やかにヒトへの臨床試験に移行するように研究開発を継続する。

这项研究的目的是建立一种用于浆细胞样杀手树突状细胞疫苗（以下称为疫苗）的生产技术，该疫苗结合了NK细胞（肿瘤杀伤能力）的出色杀伤活性和呈现树突状细胞抗原的能力，并建立一种评估其质量的方法。因此，使用补贴来购买GMP（药物级）兼容的细胞制备试剂，用于用于疫苗生产和质量测试所需的研究试剂。以下是研究内容和通过执行费用获得的结果。疫苗生产中使用的材料从研究水平的试剂更改为GMP兼容（药物等级）细胞制备试剂，并以一种可以给人类管理的水平构建了疫苗制造技术。据表明，在特殊环境下的产量提高了大约两倍的收益率，从而导致了较高的细胞率（90-99％）。预计这种制造技术将对制造自动化和引入细胞药物产生重大贡献。使用疫苗质量测试所需的研究试剂建立了各种免疫测试方法。我们构建了一种使用流式细胞仪，癌症抗原WT1，MART-1特异性体外CTL（细胞毒性T细胞）诱导和检测功能性CTL的ELISPOT方法来测量杀伤活性（细胞毒性活性）的方法。这些测试方法使得为治疗中使用的疫苗建立质量评估标准成为可能。此外，当我们研究了一种显着改善疫苗杀伤活性的方法时，我们发现免疫刺激剂X明显增加了杀伤活性。目前，正在动物中进行临床前试验。基于上述结果，我们已经建立了一种类似浆细胞的杀手树突状细胞疫苗的生产和质量评估方法，这是这项研究的目的。研发将继续确认临床前研究中疫苗的安全性和抗肿瘤作用，并迅速转化为人类临床试验。