形質細胞様キラー樹状細胞の作製及び機能評価法の確立

浆细胞杀伤树突状细胞的制备及功能评价方法的建立

• 批准号: 24930030
• 负责人: 小屋 照継
• 金额: $ 0.32万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24930030/
• 关键词: 樹状細胞; 免疫; がん

本研究の目的は、NK細胞様の優れたキラー活性(腫瘍を殺傷する力)と、樹状細胞の抗原提示能を併せ持つ、形質細胞様キラー樹状細胞ワクチン(以下,ワクチン)の製造技術を確立し、その品質評価法を定める事であった。その為、補助金を使用して、ワクチン製造に用いるGMP(医薬品グレード)適合の細胞調製試薬、品質検査に必要な研究試薬を購入した。以下に研究内容と、経費を執行して得られた成果を示す。ワクチン製造に使用する材料を、研究レベルの試薬から、GMP適合(医薬品グレード)の細胞調製試薬に変更し、ヒトへ投与可能なレベルのワクチン製造技衛を構築した。ある特殊な環境下で製造を行う事で、約2倍に収率が向上し、高い生細胞率(90～99%)が得られる事を明らかにした。本製造技術は、製造の自動化、細胞医薬品化に大きく寄与すると期待される。ワクチンの品質検査に必要な研究試薬を用いて、種々の免疫学的検査手法を確立した。フローサイトメーターを使用したキラー活性(細胞障害活性)測定法、がん抗原WT1、MART-1特異的in vitro CTL(細胞障害性T細胞)誘導法、機能的なCTLを検出するELISPOT法を構築した。これらの検査手法によって、治療に用いるワクチンの品質評価基準を定める事が可能となった。また、ワクチンのキラー活性を飛躍的に向上させる方法を検討したところ、免疫賦活剤Xによって、あきらかにキラー活性が上昇する事を見い出した。現在、動物を用いた前臨床試験を進めている。以上の成果より、本研究の目的であった形質細胞様キラー樹状細胞ワクチンの製造および品質評価方法の確立を達成した。前臨床試験において、ワクチンの安全性、抗腫瘍効果を確認し、速やかにヒトへの臨床試験に移行するように研究開発を継続する。

The purpose of this study is to establish the optimal activity of NK cells, the antigen presentation ability of dendritic cells, the manufacturing process of dendritic cells, and the quality evaluation method. For the purpose of research and development, the use of grants, GMP (Medical Product Management) for cell preparation and quality inspection is required. The results of the study are shown below. The materials used in the production of drugs, research and development of drugs, GMP suitable for (medical products) cell modulation test, drug delivery and possible drug production technology construction The production rate is about twice as high as that of ordinary people under special circumstances, and the production rate is high (90~99%). The manufacturing process is expected to be greatly improved in the fields of production automation and cell medicine. To establish the necessary methods for the quality inspection of the virus, the study of the use of Chinese and Western medicine, and the identification of immunology. The ELISPOT method was established by using the activity assay, antigen WT-1, MART-1 specific in vitro CTL (cell barrier T cell) induction method, and functional CTL detection method. The quality evaluation criteria for the detection method and treatment are determined. The activity of the immune system increases rapidly, and the activity of the immune system increases. Now, animals are used before clinical trials. The aim of this study is to establish the production and quality evaluation methods of morphological cells. Pre-clinical trial safety, anti-tumor effect confirmation, rapid clinical trial migration, research development

项目成果

G-CSFを用いた樹状細胞の調製方法

利用G-CSF制备树突状细胞的方法

• 发表时间: 2013