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新規好中球走化性蛋白質LECT2ファミリーの好中球に対する作用と肝機能との関連

新型中性粒细胞趋化蛋白LECT2家族对中性粒细胞的影响及其与肝功能的关系

基本信息

批准号：
08770174
负责人：
山越智
金额：
$ 0.64万
依托单位：
国立予防衛生研究所
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770174/
关键词：
好中球好中球走化性因子肝臓 LECT2

项目摘要

CHO細胞由来のヒト組み換え体LECT2(rLECT2)のヒト好中球に対するIn vitroでの作用は、好中球について次の4点について調べた。ヒト好中球走化性活性については10^<-12>から10^<-5>Mで検討したが、検出されないか、あるいは検出されても非常に弱いものであった。この原因として考えられるのは、以前精製したLECT2がに未同定の走化性物質を含んでいた可能性と、あるいは、組換え体であるための理由を考えており、現在検討中である。他の走化性ペプチドであるFMLPによる好中球の脱顆粒に対する影響では、10^<-6>MのFMLPで刺激した時、rLECT2の濃度が10^<-6>から10^<-7>Mでmyeloperoxidae(MPO)の放出の阻害がみられたが、β-gluclonidaseの阻害は観察されなかった。また、活性酸素の生成も阻害されなかった。抗体を使った肝組織のLECT2 antibodyによる免疫染色については作成した3種類の抗体(マウスモノクローナル抗体2種、兎ポリクローナル抗体)を用い、肝臓関連の疾患のヒト患者の肝臓の生検体を染めた。その結果次のことが判明した。ポリクローナル抗体と1種類のモノクローナル抗体によって、Formalin-paraffin sectionで肝臓が陽性に染色された。もう一方のモノクローナル抗体では染色されなかった。この時、抗原での吸収実験により阻害された。肝細胞のみが陽性に染色され、細胞質のみが弥漫性に陽性であり、核や細胞膜は陰性であった。ヒト血清中にLECT2蛋白質が数百ng/mlオーダーで存在することが分かっており、現在、各種肝臓病態と血清濃度、組織像との関連を調べており今後、LECT2と肝臓疾患との関係が分かってくる可能性があると考えられる。

CHO cell origin and cell transformation LECT2 (rLECT2) In vitro, in The <-12>activity of the ball is very weak<-5>. The reason for this is that it has been refined before. LECT2 has not been determined yet. It has the possibility of changing the body. The reason for this is that it has been examined now. The effects of FMLP on the release of <-6>myelopathy <-6><-7>(MPO) and β-gluconidase were observed at concentrations of 10 μ M and 10 μ M respectively. The production of active acids is hindered by the presence of active acids. Antibodies were used to prepare LECT2 antibody for liver tissue immunostaining and to stain liver tissues of patients with liver related diseases. The result of the investigation is clear. The antibody to the first class is positive for liver staining in the Formalin-paraffin section The antibody is stained with a red stain. This time, the antigen is absorbed by the body. Liver cells are positive, cytoplasm is diffuse positive, and nuclear cell membrane is negative. LECT2 protein in serum is several hundred ng/ml, and the relationship between LECT2 protein and liver disease is likely to change in the future.