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ヒト表皮膜骨格蛋白質(4. 1蛋白質)の機能に関する形態的及び生化学的解析

人表皮膜骨架蛋白（4.1蛋白）功能的形态生化分析

基本信息

批准号：
08770616
负责人：
清水忠道
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

膜骨格蛋白質についての生化学的研究の進歩と膜機能の定量的測定法の開発により,膜骨格の構造と機能の密接な関わりが明らかになってきた。とりわけ,スペクトリン,4. 1蛋白質及びアクチン等に量的,質的異常を認める赤血球では変形能,膜安定性等の機能が低下しており早期に網内系細胞に捕らえられ,寿命が短縮して溶血性貧血となることが解明されている。本研究ではこれらの膜骨格蛋白質の皮膚(表皮細胞)における機能を解明することを目的として以下の検討を行なった。培養ヒト表皮細胞を用いた実験においてCaスイッチにより4. 1蛋白質およびフォドリンの細胞質から細胞膜への分布の変化が認められた。さらにフォルボールエステルの添加により同様の分布の移行が認められた。これらの蛋白質の表皮細胞膜間接着への関与が示唆される(Shimizu et al, Biol Cell, 1996)。我々は、尋常性乾癬表皮細胞において特異的に存在する45kDaの4. 1蛋白質がalternative splicingによる産物である可能性を調べるために、4. 1蛋白質のmRNAをRT-PCR法により解析した。その結果、尋常性乾癬表皮細胞からのRNAを用いたPCR産物に正常表皮細胞においては認められないバンドを確認した。これは乾癬表皮細胞の4. 1蛋白質のsplicingの異常によるものと考えられ、この異常なバンドのシークエンスの解析を現在進めている。この解析により乾癬表皮細胞に特異的にみられる異常蛋白質が膜結合ドメインのどの部分の欠損により生じた蛋白質であるかが判明し、ひいては正常4. 1蛋白質の表皮細胞における機能の解析につながると考えられる。また、皮膚悪性腫瘍である有棘細胞癌、基底細胞上皮腫において4. 1蛋白質の発現の減少が観察された(manuscript under revew)。さらに、我々は,4. 1蛋白質のみならず表皮細胞にアンキリンが存在することも確認し、報告した(Shimizu et al, Arch Dermatol Res, 1996)。

With the advancement of biochemical research on membrane skeleton proteins and the development of quantitative methods for measuring membrane functions, the close connection between the structure and function of membrane skeletons has become clear.とりわけ,スペクトリン,4. 1. Protein and protein levels, qualitative abnormalities, etc., of red blood cells, changes in shape and function, membrane stability, etc., are reduced in the early stages, and the life span is shortened in hemolytic anemia. The purpose of this study is to clarify the function of membrane protein in the skin (epidermal cells) and to investigate the following issues. Cultured epidermal cells are used in culture. 1. The distribution of protein in cytoplasm and cell membrane was changed. In addition, the distribution of the same kind of migration is recognized. The protein expression in epidermal cell membranes is related to the expression of proteins (Shimizu et al, Biol Cell, 1996). The specific protein in epidermal cells of psoriasis vulgaris is 45kDa and 4. 1 Protein alternative splicing 1 Protein mRNA analysis by RT-PCR. The results showed that the RNA of psoriasis vulgaris epidermal cells was detected by PCR products, and the RNA of normal epidermal cells was detected by PCR products. 4. Skin cells of psoriasis 1. The analysis of protein splicing abnormalities is now in progress. This analysis shows that the epidermal cells of psoriasis are characterized by abnormal proteins, membrane binding, partial damage, and abnormal proteins. 1 Protein and epidermal cell function analysis. There are several types of skin lesions, including squamous cell carcinoma and basal cell carcinoma. 4. 1 Protein production reduction observed (manuscript under reveal). Today, I'm back, 4. 1. The existence of protein in epidermal cells has been confirmed and reported (Shimizu et al, Arch Dermatol Res, 1996).