ヒト表皮膜骨格蛋白質(4. 1蛋白質)の機能に関する形態的及び生化学的解析

人表皮膜骨架蛋白（4.1蛋白）功能的形态生化分析

• 批准号: 08770616
• 负责人: 清水 忠道
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770616/
• 关键词: 4. 1蛋白質; アンキリン; フォドリン; スベクトリン; 表皮細胞; カルシウム

膜骨格蛋白質についての生化学的研究の進歩と膜機能の定量的測定法の開発により,膜骨格の構造と機能の密接な関わりが明らかになってきた。とりわけ,スペクトリン,4. 1蛋白質及びアクチン等に量的,質的異常を認める赤血球では変形能,膜安定性等の機能が低下しており早期に網内系細胞に捕らえられ,寿命が短縮して溶血性貧血となることが解明されている。本研究ではこれらの膜骨格蛋白質の皮膚(表皮細胞)における機能を解明することを目的として以下の検討を行なった。培養ヒト表皮細胞を用いた実験においてCaスイッチにより4. 1蛋白質およびフォドリンの細胞質から細胞膜への分布の変化が認められた。さらにフォルボールエステルの添加により同様の分布の移行が認められた。これらの蛋白質の表皮細胞膜間接着への関与が示唆される(Shimizu et al, Biol Cell, 1996)。我々は、尋常性乾癬表皮細胞において特異的に存在する45kDaの4. 1蛋白質がalternative splicingによる産物である可能性を調べるために、4. 1蛋白質のmRNAをRT-PCR法により解析した。その結果、尋常性乾癬表皮細胞からのRNAを用いたPCR産物に正常表皮細胞においては認められないバンドを確認した。これは乾癬表皮細胞の4. 1蛋白質のsplicingの異常によるものと考えられ、この異常なバンドのシークエンスの解析を現在進めている。この解析により乾癬表皮細胞に特異的にみられる異常蛋白質が膜結合ドメインのどの部分の欠損により生じた蛋白質であるかが判明し、ひいては正常4. 1蛋白質の表皮細胞における機能の解析につながると考えられる。また、皮膚悪性腫瘍である有棘細胞癌、基底細胞上皮腫において4. 1蛋白質の発現の減少が観察された(manuscript under revew)。さらに、我々は,4. 1蛋白質のみならず表皮細胞にアンキリンが存在することも確認し、報告した(Shimizu et al, Arch Dermatol Res, 1996)。

Membrane bone protein に つ い て の biochemistry research の into step と membrane function の quantitative assay の open 発 に よ り, membrane skeleton の tectonic と function の contact な masato わ り が Ming ら か に な っ て き た. と り わ け, ス ペ ク ト リ ン, 4. 1 protein and び ア ク チ ン に such as quantity, quality abnormal を recognize め る red blood corpuscle で は variations can shape, membrane stability の function such as low が し て お り early に cell in the grid に catching ら え ら れ, shortening life が し て hemolytic anemia と な る こ と が interpret さ れ て い る. This study で は こ れ ら の bone protein membrane の skin (skin cells) に お け る function を interpret す る こ と を purpose と し て following の 検 line for を な っ た. Cultivate ヒ ト epidermal cells を with い た be 験 に お い て Ca ス イ ッ チ に よ り 4. 1 protein お よ び フ ォ ド リ ン の cytoplasm か ら membrane へ の distribution の variations change が recognize め ら れ た. Youdaoplaceholder0 ボ ボ さらにフォ エステ エステ エステ <s:1> add によ ボ the same <s:1> distribution <e:1> shift が recognize められた. The epidermal Cell membrane is indirectly associated with へ <e:1> and が indicator される(Shimizu et al, Biol Cell, 1996). I 々 は, ordinary psoriasis skin cell に お い て exist specific に す る 45 kda の 4. 1 protein が the alternative splicing に よ る product で あ る possibility を adjustable べ る た め に, 4. 1 protein の mRNA を rt-pcr method に よ り parsing し た. そ の results, ordinary psoriasis skin cell か ら の RNA を with い に た PCR products normal epidermal cells に お い て は recognize め ら れ な い バ ン ド を confirm し た. こ れ は psoriasis skin cell の 4. の 1 protein splicing の abnormal に よ る も の と exam え ら れ, こ の abnormal な バ ン ド の シ ー ク エ ン ス の parsing を now into め て い る. こ の parsing に よ り psoriasis skin cell に specific に み ら れ る abnormal protein が membrane-bound ド メ イ ン の ど の part の owe loss に よ り raw じ た protein で あ る か が.at し, ひ い て は normal 4. 1 protein の epidermal cells に お け る function analytical に の つ な が る と exam え ら れ る. Youdaoplaceholder0, cutaneous 悪 abscesses である spinous cell carcinoma, basal cell epithelioma にお て て 4.1 protein <s:1> present <s:1> reduction が観 observe された(manuscript under revew). さ ら に, I 々 は, 4. 1 protein の み な ら ず epidermal cells に ア ン キ リ ン が exist す る こ と も confirm し, report し た (Shimizu, et al, the Arch Dermatol Res, 1996).

项目成果

Shimizu T: "Calcium-dependent perpheral localization of 4. 1 like protens and fedrin in calfud human keratinocytes." Biology of the Cell. 86. 19-26 (1996)

Shimizu T：“4. 1 的钙依赖性外周定位，如 calfud 人角质形成细胞中的蛋白质和 Fedrin。”

Shimizu T: "Immunoreactre analoguws of erythrgte onkyrin in human epidernul keratinocytes." Archives of Decmafological Reserch. 288. 19-23 (1996)

Shimizu T：“人表皮角质形成细胞中红藻蛋白的免疫反应类似物。”

Shimizu T: "Review, Non erythroid membrane skeletal proteins in normal and chsenal human skin" Histology and Histopathology.11. 495-501 (1996)

Shimizu T：“综述，正常和典型人类皮肤中的非红细胞膜骨骼蛋白”组织学和组织病理学。11。

Shimizu T: "Identification of macrophase miprotion inhibity factor (MIF) in human skin and its immunohistochenal localization" FEBS Letters.381. 199-202 (1996)

Shimizu T：“人皮肤中巨相微促抑制因子（MIF）的鉴定及其免疫组织定位”FEBS Letters.381。