GLP-1(7-36)amide特異アッセイの確立と糖尿病患者における分泌動態

糖尿病患者 GLP-1(7-36) 酰胺特异性测定和分泌动力学的建立

• 批准号: 08770811
• 负责人: 中川 淳
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770811/
• 关键词: GLP-1; インクレチン; モノクロナル抗体

経口糖負荷は経静脈糖負荷に比しより多くのインスリン分泌を引き起こすことが知られているが,このインクレチン作用を有する物質として,近年,glucagon-like peptide(GLP)-1(7-36)amideが注目されている。しかしながら,従来のGLP-1アッセイはその他のpre-proglucagon産物を同時に測定してしまうため,GLP-1(7-36)amide分泌動態の詳細な検討のため,サンドイッチ法によるGLP-1(7-36)amide特異アッセイの確立を考えた。GLP-1(7-36)amideC端並びにN端特異モノクロナル抗体を作成することを目的として,合成GLP-1(27-36)amide並びに合成GLP-1(7-16)をウシ血清アルブミンにてコンジュゲーション,Freund完全アジュバントとともにBalb/cマウスの免疫化を試みた。脾細胞をSp2/0ミエローマ細胞と細胞融合後,培養液上清を125I-GLP-1(7-36)amideとの結合率を用いてスクリーニングを行ったが,陽性細胞を得ることが出来なかった。GLP-1(7-36)amideのアイソトープラベリング並びに精製に問題がないか,またはTris-Tricineポリペプチド電気泳動/ウエスタンブロッティングによるスクリーニング法を検討中である。

In recent years,glucagon-like peptide(GLP)-1 (7 -36)amide has attracted much attention. A detailed analysis of GLP-1(7-36)amide secretion dynamics was conducted to determine the GLP-1 (7 - 36)amide specificity by simultaneous determination of GLP-1(7 - 36) amide and other pre-glucagon products. GLP-1(7-36) amide C terminal and N terminal specific antibody preparation for this purpose, synthesis of GLP-1(27-36)amide and synthesis of GLP-1(7-16) serum release, free and complete release, Balb/c antibody immunization test. Splenocytes Sp2/0, cell fusion, culture supernatant 125I-GLP-1(7-36)amide binding rate, positive cells were obtained. GLP-1(7-36)amide has been used in the study of electrokinetic/electrokinetic reactions of Tris-Tricine.