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生理活性ペプチド受容体を標的としたドラッグデリバリーシステムの細胞内挙動の制御

靶向生物活性肽受体的药物递送系统的细胞内行为的控制

基本信息

批准号：
08772056
负责人：
加藤将夫
金额：
$ 0.64万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

研究申請者はこれまで、上皮成長因子(EGF)ならびに肝細胞増殖因子といった生理活性ペプチドの特異的受容体を介するreceptor-mediated endocytosis(RME)を速度論的に解析し、その体内動態における重要性を証明してきた。RMEは、生理活性ペプチドの体内動態機構としてばかりでなく、さまざまな薬物の標的部位への選択的な送達や、小腸や肺などにおける吸収促進のためのドラッグデリバリーシステムのターゲットとしても重要である。しかしながらRMEにおいては、取り込まれた薬物の多くはlysosomeで分解を受ける。そこで今回、イヌ腎尿細管上皮細胞由来のMDCK細胞を用い、lysosome分解を受けずに、より効率的に薬物を経細胞輸送させる方法論の確立を目的として検討を行った。クロラミンT法にて得られた^<125>l標識EGFをbasal側より添加し、apical側への経細胞輸送を観察したところ、細胞内蛋白質のmissortingを引き起こすことで知られるブレフェルディンAはEGFの経細胞輸送を促進しなかったものの、トランスフェリンの経細胞輸送を顕著に促進した。このことからこの試薬は経細胞輸送を促進させるsorting modulatorとして有用であるものの、その効果はレセプターによって異なることが明らかとなった。次に、lysosomeでの分解を抑制する試薬(クロロキン、バフィロマイシンA_1、モネンシン、塩化アンモニウム)を用いたところ、これらのうち前者2つはEGFの経細胞輸送を促進する一方、後者はむしろ抑制する方向に働いた。速度論解析の結果、後者2つの試薬は細胞内輸送のすべての過程を阻害する一方、前者2つの試薬も細胞内からapical側への輸送を若干阻害するものの、それ以上に細胞内分解過程を阻害するためにリガンドの細胞内蓄積を引き起こし、結果として経細胞輸送される量が増加することがわかった。以上より、これらもsorting modulatorとして有用である可能性が示唆された。

The study applicant demonstrated the importance of rate-theoretic analysis and in vivo dynamics of epidermal growth factor (EGF) and hepatocyte growth factor mediated by receptor-mediated endocytosis(RME), a physiologically active receptor. RME is a physiologically active, in vivo dynamic mechanism that is important for the selection of target sites for drug delivery, small intestine, and lung absorption promotion. The RME is the only way to get rid of the lysosome. The purpose of this study was to establish a methodology for the detection of lysosome degradation in MDCK cells derived from renal tubule epithelial cells. EGF <125>is identified by the T method as A basal, apical and cellular transport promoter, and intracellular protein missorting promoter. The sorting modulator is useful for cell transport, and the sorting modulator is useful for cell transport. In addition, the decomposition of lysosome is inhibited. The former is to promote EGF cellular transport, while the latter is to inhibit EGF cellular transport. As a result of the velocity-theoretic analysis, the latter 2 units of the test drug inhibited the intracellular transport process, the former 2 units of the test drug inhibited the intracellular transport from the apical-side to some extent, and the above inhibited the intracellular decomposition process, resulting in a slight increase in intracellular accumulation, and as a result, the amount of neuronal transport increased. The above is a good example of the possibility of sorting.