肺胞上皮細胞の分化に関わるアポトーシス関連遺伝子の検索

寻找参与肺泡上皮细胞分化的凋亡相关基因

• 批准号: 08772099
• 负责人: 礒濱 洋一郎
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08772099/
• 关键词: 肺胞上皮細胞; アポトーシス; 分化

アポトーシスは,多くの組織および細胞の発生および分化に密接に関わる現象である.しかし,呼吸という生命の維持において極めて重要な細胞であるにも関わらず,肺胞上皮細胞の形成・分化に随伴して生じるアポトーシスに着目した研究は国内外を問わず全く行われていない.肺胞上皮細胞は,ガス交換に関わるI型細胞と肺サーファクタントの産生・分泌を行うII型細胞に分けられるが,胎生期の肺の発生や肺障害後の修復時には,II型細胞が特異的に増殖し,これがI型細胞へと分化すると考えられている.この際,前駆細胞であるII型細胞は過剰に増殖し,I型細胞へ分化できない細胞はアポトーシスによって排除されると推定される.すなわち,分化と細胞死は同時に起こるべき現象であり,同一の調節機構によって制御されている可能性が考えられる.このような観点から,私はin vivoにおける肺胞上皮細胞の分化と酷似した形態変化を自発的に生じるin vitro培養系を確立し,本培養系におけるアポトーシスについて検討した.ラットII型細胞をプラスチック上で培養すると,コンフルエントカルチャー中の細胞数および生存率は経日的に減少した.また,形態学的な観察から小胞化,多核化した細胞が確認され,細胞のDNAを抽出し電気泳動を行うと,培養3日目からDNAの断片化が観察された.すなわち,形態学的,生化学的にアポトーシスが生じていることが確認された.現在,このアポトーシスを制御する調節蛋白を同定するため,bel-2のホモログに着目し,保存領域の配列をプライマーとしたRT-PCRを行い、遺伝子レベルでの同定を検討中である.

The phenomenon of close contact between multiple tissues and cells is closely related to the development and differentiation of cells. The development and differentiation of lung epithelial cells are closely related to the development and development of respiratory cells. Lung epithelial cells are involved in the development and secretion of type I cells and type II cells, and type II cells are specifically involved in the development and repair of lung tissue during the prenatal period. At the same time, pre-differentiation cells are expected to proliferate in type II cells, and type I cells are expected to differentiate in type II cells. The possibility of simultaneous initiation of cell differentiation and cell death by the same regulatory mechanism is examined. The differentiation and morphological transformation of lung epithelial cells in vivo were similar to those in vitro culture system. Type II cells were cultured on medium, and the number of cells and survival rate decreased. In addition, morphological observation of microcellularity and multinucleation of the cells was confirmed, DNA extraction of the cells was carried out, and DNA fragmentation was observed after 3 days of culture. The morphological, biochemical and biological characteristics of the plant are confirmed. Now, the regulation of protein identity in the control of gene expression is under discussion, and RT-PCR is being carried out to determine the identity of gene expression.

项目成果

Yoichiro Isohama: "Dexamethasone increases β_2-adrenoceptor-regulated phosphatidylcholine secretion in rat alveolar type II cells" The Japanses Journal of Phamacology. 73. 163-169 (1997)

Yoichiro Isohama：“地塞米松增加大鼠 II 型肺泡细胞中 β_2-肾上腺素受体调节的磷脂酰胆碱分泌”，《日本药理学杂志》73. 163-169 (1997)。

Yoichiro Isohama: "Interaction between protein kinase A and protein kinase C increases cytoplasmic Ca^<2+> concentration in alveolar type II cells" Biochimica et Biophysica Acta. (発表予定).

Yoichiro Isohama：“蛋白激酶A和蛋白激酶C之间的相互作用增加了II型肺泡细胞中的细胞质Ca 2+ 浓度”Biochimica et Biophysicala Acta（待提交）。