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肺上皮細胞における心筋型カルシウム遊離チャネルの存在とその意義に関する研究

肺上皮细胞心肌钙释放通道的存在及意义研究

基本信息

批准号：
12771407
负责人：
礒濱洋一郎
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

上皮細胞を始めとする非興奮性細胞における細胞内Ca^<2+>濃度の調節機構は十分に理解されていない.本研究ではまず,肺胞上皮細胞がIP_3受容体(IP_3R)に加え,リアノジン受容体(RyR)を持つことをNorthern Blot法およびWestern Blot法により見出した.また,細胞膜透過標本を用いた検討の結果,IP_3およびryanodineはいずれも,細胞内Ca^<2+>貯蔵部位のCa^<2+>濃度の低下を誘発した.受容体アイソフォームを同定したが,本細胞のIP_3Rは1および3型であり,RyRは2型すなわち心筋型であった.種々の細胞株について同様の検討を行ったが,肺上皮細胞の中でA549細胞とL2細胞では,唯一,RyRの有無だけが異なっていた.そこで,両細胞の種々の刺激に対する細胞内Ca^<2+>濃度の変化を調べた.すると,RyRをもつA549細胞では,P_2プリン受容体作用薬ATPによるCa^<2+>の上昇が,一過性で強い上昇から持続的な弱い上昇へと二相性に推移したのに対し,RyRをもたないL2細胞では,一過性の強い上昇のみが認められ,その後の持続的な上昇は観察されなかった.また,高濃度KClによって誘発したCa^<2+>濃度上昇でも,同様にRyRをもたないL2細胞ではA549細胞に比べ細胞内Ca^<2+>濃度の上昇する時間が短い傾向を示した.本研究の成果は,非興奮性の細胞である上皮細胞において,RyRが種々の化学的刺激に対して反応する細胞内Ca^<2+>シグナルの増幅機構として重要である可能性を示唆している.

The epithelial cell cycle starts and the non-sexual cell cycle changes. The intracellular Ca ^ & lt;2+> concentration is very well understood by the regulatory body. In this study, the lung epithelial cells and IP_3 receptors (IP_3R) were increased, and the lung epithelial cells (RyR) were detected by Northern Blot method and Western Blot method. The results show that the membrane passes through the label and the results show that the IP_3 is sensitive to ryanodine, and the intracellular Ca ^ & lt;2+> is sensitive to Ca ^ & lt;2+>. The capacity of the recipient is the same as that of the recipient. This cell is called IP_3R, type 1, type 3, and RyR2, type 2, respectively. All kinds of cell lines were cultured in the same way, and the lung epithelial cell line A549 cell line L2 cell was the only one in RyR cell line. The cell stimulates the intracellular Ca ^ & lt;2+> to stimulate the temperature response. The effect of RyR on A549 cell, PP2 capacitor on ATP and lt;2+>, the effect of sexual stress on the two-phase effect, RyR effect on L2 cell, on-line effect on the upper part of the body, the effect of the last two-phase effect on the performance of the two-phase effect, the effect on the L2 cell. The temperature of the high-temperature KCl is higher than that of the lt;2+>, and the temperature of the L2 cell is the same as that of the cell A549. The temperature of the cell is higher than that of the intracellular Ca ^ & lt;2+>. According to the results of this study, the stimulation of RyR chemistry in non-sexual cancer cells has demonstrated the possibility of significant changes in intracellular Ca ^ & lt;2+> cells.