絨毛癌細胞が異常産生するシアリルα2→6残基結合糖鎖の生合成機構

绒毛膜癌细胞异常产生唾液酸α2→6残基连接糖链的生物合成机制

• 批准号: 08780567
• 负责人: 福島 慶子
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Sasaki Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08780567/
• 关键词: 絨毛癌; アルカリ性ホスファターゼ; 絨毛性性腺刺激ホルモン; α2,6-シアリルトランスフェラーゼ; 酵素活性測定; キカラスウリレクチン-1

ヒト絨毛癌細胞株JEG-3が産生する胎盤型アルカリホスファターゼ(ALP)並びに絨毛性性腺刺激ホルモン(hCG)についてキカラスウリレクチン(TJA-I)を用いたレクチンカラムクロマトグラフィーを行った。TJA-IはSiaα2→6Galβ1→4GlcNAc残基を認識し、糖蛋白質分離に関する有用性は既に報告している。ALPは酵素活性測定、hCGはELISAによりその結合性を調べたところ、約30%が結合画分に回収された。一方、精製された正常ヒト尿中hCG及び胎盤性ALPについて同様にTJA-Iカラムクロマトグラフィーを行ったところ、結合する分子種は認められなかった。したがってJEG-3細胞におけるシアリルα2→6残基の異常産生が明確にされた。そこで、正常ヒト胎盤組織とJEG-3細胞からミクロソーム画分を調製し、N-アセチルラクトサミンを基質としてα2,3-シアリルトランスフェラーゼとα2,6-シアリルトランスフェラーゼの活性測定を行った。その結果、蛋白量当たりのα2,6-シアリルトランスフェラーゼ活性が癌化に伴って約3倍に増加していることが判明した。したがって、シアリルα2→6残基出現の背景にα2,6-シアリルトランスフェラーゼ活性上昇が存在することが明らかになった。現在、両シアリルトランスフェラーゼのmRNA量をNorthern blot法を用いて調べるために、RT-PCR法によりプローブ作製が終了したところである。α2,6-シアリルトランスフェラーゼの転写調節機構を含めて癌化に伴うα2,6-シアリルトランスフェラーゼの発現機構を明らかにしていく予定である。

JEG - 3 が ヒ ト villi cancer cells produce す る placenta type ア ル カ リ ホ ス フ ァ タ ー ゼ (ALP) and び に villi sex gonad stimulus ホ ル モ ン (hCG) に つ い て キ カ ラ ス ウ リ レ ク チ ン (TJA - I) を with い た レ ク チ ン カ ラ ム ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー を line っ た. TJA -i は Sia alpha 2-6 gal beta 1-4 glcnac residues を know し, sugar, protein separation に masato す る usefulness は に report both し て い る. ALP は enzyme activity determination, hCG は ELISA に よ り そ の associativity を adjustable べ た と こ ろ, about 30% が combining points に back 収 さ れ た. One party, the refined さ れ た normal ヒ ト urine hCG and び placenta ALP に つ い て with others に TJA -i カ ラ ム ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー を line っ た と こ ろ, combined す る molecules of は recognize め ら れ な か っ た. Youdaoplaceholder0 たがってJEG-3 cells におけるシアリ にされた α2→6 residues <s:1> abnormalities produce が definite にされた. そ こ で, normal ヒ ト placenta tissue と JEG - 3 cells か ら ミ ク ロ ソ ー ム draw points を し modulation, N - ア セ チ ル ラ ク ト サ ミ ン を matrix と し て alpha 2, 3 - シ ア リ ル ト ラ ン ス フ ェ ラ ー ゼ と alpha 2, 6 - シ ア リ ル ト ラ ン ス フ ェ ラ ー ゼ の activity test line を っ た. そ の results, amount of protein when た り の alpha 2, 6 - シ ア リ ル ト ラ ン ス フ ェ ラ ー ゼ active が canceration に with っ て に raised about 3 times add し て い る こ と が.at し た. し た が っ て, シ ア リ ル alpha 2-6 residues の background に alpha 2, 6 - シ ア リ ル ト ラ ン ス フ ェ ラ ー ゼ activity rising が exist す る こ と が Ming ら か に な っ た. Now, that struck シ ア リ ル ト ラ ン ス フ ェ ラ ー ゼ の amount of mRNA を Northern blot method を with い て adjustable べ る た め に, rt-pcr method に よ り プ ロ ー ブ cropping が end し た と こ ろ で あ る. Alpha 2, 6 - シ ア リ ル ト ラ ン ス フ ェ ラ ー ゼ の planning write regulator contains を め て canceration に with う alpha 2, 6 - シ ア リ ル ト ラ ン ス フ ェ ラ ー ゼ の 発 institutions now を Ming ら か に し て い く designated で あ る.

项目成果

Fukushima,K.et al.: "Lectin-like characteristics of recombinant human interleukin-1β recognizing glycans of glycosylphosphatidylinositol anchor" J.Biol.Chem.(1997)

Fukushima, K. 等人：“重组人白细胞介素 1β 识别糖基磷脂酰肌醇锚定聚糖的凝集素样特征”J.Biol.Chem.(1997)

Fukushima,K.et al.: "Synthesis of lipid-linked oligosaccharides is dependent on the cell cycle in rat 3Y1 cells" J.Biochem. (Tokyo). (1997)

Fukushima,K.et al.：“脂质连接寡糖的合成取决于大鼠 3Y1 细胞的细胞周期”J.Biochem。

Ohkura,T.,et al.: "A partial deficiency of dehydrodolichol reduction is a cause of carbohydrate-deficient syndrome type I" J.Biol.Chem.272. 6868-6875 (1997)

Ohkura,T.,et al.：“脱氢多羟基化合物还原的部分缺乏是 I 型碳水化合物缺乏综合征的原因”J.Biol.Chem.272。

福島慶子: "肝産生ALP糖鎖と癌性変化" 臨床科学. 33. 157-163 (1997)

Keiko Fukushima：“肝脏产生的 ALP 糖链和癌变”《临床科学》33. 157-163 (1997)。