新規LIM/homeodomain蛋白質の遺伝子構造とその機能解析

新型LIM/同源域蛋白的基因结构和功能分析

• 批准号: 08780754
• 负责人: 北中 純一
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Hyogo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08780754/
• 关键词: LIM; homeodomain蛋白質; L3遺伝子; L3蛋白質; 転写調節因子; 前脳分節構造

耐性14日齢マウス脳cDNAより得た新規な塩基配列をもつLIM/homeodomain蛋白質ファミリーのcomplementary DNA(cDNA)クローン(以下、その推定蛋白質をL3と呼ぶ)のhomeodomainおよびLIM motif以外の領域における一次構造は、塩基配列解析の結果,他のメンバーとは全く異なっていた。また、そのmessenger RNA(mRNA)は、神経系では極めて限局した領域に発現しており、かつ、既知のLIM/homeodomain蛋白質のmRNAの分布と相補的発現を示すことが判明した。それらLIM/homeodomain蛋白質ファミリーのmRNAの発現境界は、近年提唱されている脳(本研究においては特に前脳)の分節構造と一致するため、L3を含むLIM/homeodomain蛋白質ファミリーは前脳の分節構造の分化と維持に関与している可能性が高い。また,L3cDNAの情報をもとに,129Svマウス肝臓由来IFIXIIゲノムライブラリー(Stratagene社)より得た7つの陽性クローンの塩基配列解析(約35kbの領域)がほぼ終了した。現在エクソン1より上流の5'-flanking regionの塩基配列解析を残しているが,その領域(約11kb)に関してもすでにサブクローニングが終了しているので,それらの塩基配列を決定して遺伝子構造を明らかにする。また同時にヒト遺伝子ライブラリーのスクリーニングも進行中である。さらに,L3の役割を明らかにする目的でL3遺伝子欠損マウスを作製するため,現在ターゲティングベクターを作製している。L3の場合,コード領域だけで8つのイントロンによって30kbの領域に分割されているため,その全てをネオマイシン耐性遺伝子に置き換えることは困難であることが予想される。この点をふまえ,ターゲティングベクターの構築を検討中である。

Tolerance 14 days ago, the cDNA sequence was analyzed to obtain a new gene base alignment sequence. LIM/homedomain protein was isolated from the complementary DNA(cDNA) library (hereinafter referred to as the putative protein L3). The results of primary structure analysis and gene base alignment analysis were completely different. The distribution and complementary development of mRNA for known LIM/homodomain proteins have been identified. The expression level of LIM/homodomain protein mRNA was improved in recent years, and it is highly probable that L3 protein is involved in the maintenance of the segmentation structure of LIM/homodomain protein. The L3cDNA sequence was determined by sequencing the L3cDNA sequence at 129Sv. The L3cDNA sequence was derived from IFIXII (Stratagene) and the L3 cDNA sequence was determined by sequencing the L3 cDNA sequence at 7 Sv. Now, the analysis of the 5'-flanking region of the upper stream is in progress, and the domain (about 11kb) is in progress. At the same time, we are in the middle of the game. In addition,L3's service is clear, and L3's transmission is not limited. Now, L3's transmission is limited In case of L3, the domain is divided into 8 parts, the domain is divided into 30kb parts, and the domain is divided into 3 parts. This is the first time I've ever been to a hotel.

项目成果

K.Matsumoto et al.: "L3,a novel murine LIM-homeodomain transcription factor expressed in the ventral telencephalon and the mesenchyme surrounding the oral cavity" Neuroscience Letters. 204. 113-116 (1996)

K.Matsumoto 等人：“L3，一种新型小鼠 LIM-同源域转录因子，在腹侧端脑和口腔周围的间充质中表达”《神经科学快报》。

K.Matsumoto et al.: "Differential expression of LIM-homeodomain genes in the embryonic murine brain" Neuroscience Letters. 211. 147-150 (1996)

K.Matsumoto 等人：“LIM-同源域基因在胚胎鼠脑中的差异表达”神经科学快报。