ラット角膜上皮創傷モデルにおけるサイクリンD1の細胞増殖におよぼす役割の検討

检测细胞周期蛋白 D1 对大鼠角膜上皮伤口模型细胞增殖的作用

• 批准号: 09771468
• 负责人: 荒戸 照世
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyorin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771468/
• 关键词: ラット角膜上皮創傷モデル; サイクリンD1; サイクリンE; PCNA; 上皮基底細胞; 角膜輪部; 細胞増殖; 角膜上皮創傷治癒; 細胞周期調節タンパク質; G1サイクリン; 幹細胞; p27

角膜の上皮欠損は周囲の上皮細胞の欠損部位への伸展・移動と,その後におこる細胞増殖によって再生・修復されることが知られている.上皮欠損部への細胞移動の時期には上皮基底部よりもむしろ角膜輪部において分裂増殖が盛んであるが,上皮欠損部が被覆されると基底細胞の分裂増殖が開始され上皮は厚さ回復していくと考えられている.しかしながら,こうした細胞の分裂増殖のスイッチを直接つかさどっているものが何であるかは解明されていない.そこでラット角膜創傷モデルをもちい,細胞周期制御とくにG1期制御をつかさどるサイクリンD1やこれに遅れてG1後期に発現するサイクリンEの創傷治癒の各段階における発現の差異を免疫組織化学染色により検討した.上皮細胞の伸展・移動の時期には角膜輪部においてサイクリンEならびにサイクリンD1の発現が見られたのみならず,欠損部周辺の上皮基底細胞においてもこれらの発現が観察された.さらに上皮欠損部が被覆されると上皮基底細胞においてサイクリンEの発現が増大していた.増殖能についても抗PCNA抗体を用いた免疫組織化学染色で調べてみると,サイクリンの発現と増殖能が相関していることが明らかになった.これらの結果から,角膜創傷治癒時においてもサイクリンが増殖をつかさどる一因であること,また,上皮欠損部が完全に被覆される以前に上皮基底細胞においてもサイクリンの発現増大が見られる等の新しい知見が得られた.

众所周知，角膜上皮缺陷是通过周围上皮细胞向缺陷部位延伸和迁移以及随后的细胞增殖来再生和修复的。在细胞迁移到上皮缺陷期间，有丝分裂增殖在边缘而不是上皮缺陷的基础部分处于活性，但是当涵盖上皮缺陷时，基底细胞开始生长，上皮被认为可以恢复厚度。但是，尚不清楚是什么直接控制向细胞分裂的切换。因此，我们使用大鼠角膜伤口模型对细胞周期蛋白D1的差异表达进行免疫组织化学染色，该表达控制了细胞周期控制，尤其是G1相控制，而细胞周期蛋白E在伤口愈合的每个阶段都在G1期后期表达。这项研究是由：不仅在上皮细胞的延伸和迁移期间在角膜缘中表达的细胞周期蛋白E和细胞周期蛋白D1，而且在缺陷区域周围的上皮基底细胞中也观察到。此外，当涵盖上皮缺陷时，上皮基底细胞中细胞周期蛋白E的表达增加。当还使用抗PCNA抗体通过免疫组织化学染色检查增殖能力时，揭示了细胞周期蛋白的表达和增殖能力相关。这些结果提供了新的发现，例如，即使在角膜伤口愈合过程中，细胞周期蛋白的表达增加也会增加，并且在上皮缺陷完全覆盖之前，在上皮基底细胞中也观察到了细胞周期蛋白的表达增加。