Fetuin/α_2-HS糖タンパク質結合因子の同定

胎球蛋白/α_2-HS糖蛋白结合因子的鉴定

• 批准号: 09771544
• 负责人: 大西 智和
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771544/
• 关键词: fetuin; イムノグロブリン; 骨芽細胞; Fetuin; α_2-HS糖タンパク質; 結合蛋白質; アフィニティーカラム

1. 昨年度は、血清中のラットfetuin結合因子の分離、同定を行ったところ、イムノグロブリンと結合することを明らかにした。そこで、fetuin-イムノグロブリン複合体をSDS-アガロースゲル電気泳動したところ、分子量50万以上の位置にバンドが認められ、fetuinの多量体にイムノグロブリンが結合していることが示唆された。また、精製ラットイムノグロブリンにおけるfetuinとの結合部位を検討したところ、Fc部分に結合性が認められた。このことはfetuinとイムノグロブリンの結合が抗原抗体反応によるものではなく、補体とイムノグロプリンの結合におけるオプソニン効果のような免疫能増強作用がfetuinにも存在することを示唆するものである。2. 炎症性サイトカイン(IL-1またはIL-6、TNF-α)をラット初代培養骨芽細胞に加え、[H^3]leucine及びβ-glycerophosphate含有のα-MEMにて培養した。培養液を回収し、ラットfetuinアフィニティーカラムに加え、pHを下げることでラットfetuin結合因子を採取した。そして二次元電気泳動及びオートラディオグラフィーにて、解析したところ、ハイドロキシアパタイトに親和性の認められている、オステオカルシンやオステオポンチンに相当するバンドが認められた。fetuinもハイドロキシアパタイトに結合が存在するので、ハイドロキシアパタイトを介してこれらのタンパクが結合していることが考えられる。

1. The separation and identification of fetuin binding factors in serum were studied. For example, fetuin-3 complex can be used for SDS-induced electrokinetic reaction. For positions with molecular weight of more than 500,000, fetuin-3 complex can be used for electrokinetic reaction. The binding site of fetuin was examined by HPLC, and the binding property of Fc part was recognized. The combination of fetuin and complement with antigen-antibody reaction results in immunopotentiation of fetuin 2. Inflammatory cytokines (IL-1, IL-6, TNF-α) were added to primary culture of bone bud cells containing α-MEM,[H^3]leucine and β-glycerophosphate. Culture medium is returned to normal, and fetuin binding factors are taken. In addition, due to the secondary electrical swimming and the rapid development of the market, the analysis of the market and the recognition of the affinity of the market, the Oste Okashic element and the Oste Opontoon element are equally recognized. The fetuin is a combination of the two.

项目成果

Ohnishi, T.: "Effect of phosphorylated rat fetuin on the growth of hepatocytes in primary culture in the presence of human hepatocyte-growth factor." Eur.J.Biochem.243. 753-761 (1997)

Ohnishi, T.：“在人肝细胞生长因子存在的情况下，磷酸化大鼠胎球蛋白对原代培养物中肝细胞生长的影响。”

Kazi,J.A.: "Changes with age in rat fetuin concentration in serum and its mRNA expression."J.Biochem.. 124. 179-186 (1998)

Kazi, J.A.：“血清中大鼠胎球蛋白浓度及其 mRNA 表达随年龄的变化。”J.Biochem.. 124. 179-186 (1998)