ヒト歯胚における肝細胞増殖因子(HGF)の発現とその役割

肝细胞生长因子（HGF）在人牙胚中的表达及其作用

• 批准号: 06857142
• 负责人: 大西 智和
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06857142/
• 关键词: エナメル芽細胞; 肝細胞増殖因子; アメロジェニン

ヒト歯胚における肝細胞増殖因子(hHGF)は間葉系で産生されパラクライン的に上皮系に作用しScatter作用を示すことから、上皮-間葉相互作用の本体であることが示唆されている。歯の発生においてもこの相互作用の重要性は指摘されている。そこで本研究では、まずヒト歯胚の間葉系である歯髄器中と、成人歯の歯髄中のhHGF量とを比較した。その結果、歯髄器は2.492±0.666pg/μg protein、成人歯髄は0.172±0.046pg/μg proteinのhHGFが測定された。以上の結果から、hHGFが歯の発生期において特に発現されていることが判明した。しかし、RNAレベルの観察は、歯胚の摘出条件及び歯髄器中のRNaseの多量の存在などから、歯髄器からのRNAの採取が困難なため、現在初代培養細胞にて比較検討中である。次に、エナメル芽細胞におけるhHGFの作用を分化増殖の両面から検討を行った。すなわち、牛胎仔よりエナメル芽細胞を採取し培養液中に[^3H]leucineを加え、24時間後培養液を採取し濃縮後、SDS-PAGEを行った。エナメル芽細胞の特異的マーカーであるアメロジェニンに相当する分子量5000〜30000のバンドは、hHGFが10ng/mlまで用量依存的に減少した。また、増殖活性は[^3H]tymidineの取り込みによるDNA合成能を調べることにより検討したところ、hHGFが10ng/mlまで用量依存的に減少した。以上の結果よりエナメル芽細胞の分化も増殖もhHGFは抑制するという結論が得られたが、その後培養時のエナメル芽細胞の純度に問題があることがわかり再度検討を行っている。

Hepatocyte proliferation factor (hHGF) is a potent factor in the production of mesenchymal stem cells and its effect on epithelial cells. The importance of the interaction between the two molecules in the development of the tooth is pointed out in the paper. This study compares the amount of hHGF in the embryonic and adult dentition systems. The results showed that hHGF was 2.492±0.666pg/μg protein in dentition and 0.172±0.046pg/μg protein in adult dentition. The above results show that hHGF is a special product in the development period. In this paper, we investigate the conditions of DNA extraction and the presence of RNase in the tissue, and find that it is difficult to extract RNA from the tissue. The role of hHGF in cell differentiation and proliferation is discussed in detail. After 24 hours, the culture solution was collected and concentrated, and SDS-PAGE was performed. The specific amount of hHGF in the culture medium was 5000 ~ 30000 ng/ml, and the amount of hHGF decreased depending on the concentration. DNA synthesis activity was modulated by [^3H] thymidine at 10ng/ml. The above results indicate that HGF is inhibited in the differentiation and proliferation of human embryonic cells. Conclusion: The purity of human embryonic cells in post-culture is discussed again.