ヒト菌敗間葉系における肝細胞増殖因子(HGF)産生細胞の変遷

人类细菌性败血症中肝细胞生长因子（HGF）产生细胞的变化

• 批准号: 07771666
• 负责人: 大西 智和
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771666/
• 关键词: 歯胚; 肝細胞増殖因子; 線維芽細胞

歯胚の分化過程におけるHGF産生細胞の移り変わり及びその産生能力の変化を分化と共に調べるため、三種の実験を行い以下のような結果をを得た。1.歯胚中に実際どの程度HGFが含まれているかを比較検討するため、歯乳頭、歯髄器、及び成人歯髄をホモジネートした後、HGF測定キットにて測定したところ、歯乳頭には4.0pg/mg protein,歯髄器には1.6pg/mg protein、及び成分歯髄には0.85pg/mg proteinのHGFが検出された。2.歯乳頭、歯髄器、成人歯髄、歯嚢、および歯根膜を培養し、outgrowthしてきた線維芽細胞を再度播き直しconfluentになった状態でウシ胎仔血清を含まないDMEM培養液に換え24時間後に培養液中のHGF濃度を測定したところ1.2ng/mlのHGFが検出された。また、各細胞のmRNAを採取し、HGFのcDNAをプローブに用いノーザンブロットにて発現を比較検討したところ、どの線維芽細胞にもHGFが発現することが認められたがその差は検出されなかった。3.鐘状期の象牙質形成以前の歯乳頭及び歯嚢、象牙質形成以後の歯髄器及び歯嚢、及び成人歯髄を4%paraformaldehydeにて固定しパラフィン包埋の後薄切し、抗hHGF抗体を用いて免疫組織化学染色を行ったところ、歯胚の線維芽細胞に強く染色が認められたが成人歯髄線維芽細胞には染色性が認められなかった。以上の結果より間葉系におけるHGF産生は線維芽細胞が司り、幼弱な線維芽細胞ほどHGF産能が大きいことが示唆された。

The differentiation process of HGF producing cells and the transformation of HGF producing ability were studied. 1. The HGF content in the dental pulp was 4.0pg/mg protein in the dental pulp, 1.6pg/mg protein in the dental pulp, 0.85pg/mg protein in the dental pulp and 0.85pg/mg protein in the dental pulp. 2. Dental papilla, dental organ, adult dental, dental, dental and dental root membranes were cultured, outgrown, and re-seeded. In confluent condition, fetal serum was added to DMEM culture medium. After 24 hours, the concentration of HGF in culture medium was determined. The mRNA of HGF was extracted from each cell, and the cDNA of HGF was used to detect the expression of HGF in different cells. 3. The papilla and dentition before dentin formation in the bell stage, dentition after dentin formation, and adult dentition were fixed with 4% paraformaldehyde and embedded with anti-hHGF antibody. Immunohistochemical staining was used to detect the expression of human dental germ cells. The above results show that HGF production in the interleaf system is very high, and HGF production is very high.