ヒト菌敗間葉系における肝細胞増殖因子(HGF)産生細胞の変遷

人类细菌性败血症中肝细胞生长因子（HGF）产生细胞的变化

• 批准号: 07771666
• 负责人: 大西 智和
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771666/
• 关键词: 歯胚; 肝細胞増殖因子; 線維芽細胞

歯胚の分化過程におけるHGF産生細胞の移り変わり及びその産生能力の変化を分化と共に調べるため、三種の実験を行い以下のような結果をを得た。1.歯胚中に実際どの程度HGFが含まれているかを比較検討するため、歯乳頭、歯髄器、及び成人歯髄をホモジネートした後、HGF測定キットにて測定したところ、歯乳頭には4.0pg/mg protein,歯髄器には1.6pg/mg protein、及び成分歯髄には0.85pg/mg proteinのHGFが検出された。2.歯乳頭、歯髄器、成人歯髄、歯嚢、および歯根膜を培養し、outgrowthしてきた線維芽細胞を再度播き直しconfluentになった状態でウシ胎仔血清を含まないDMEM培養液に換え24時間後に培養液中のHGF濃度を測定したところ1.2ng/mlのHGFが検出された。また、各細胞のmRNAを採取し、HGFのcDNAをプローブに用いノーザンブロットにて発現を比較検討したところ、どの線維芽細胞にもHGFが発現することが認められたがその差は検出されなかった。3.鐘状期の象牙質形成以前の歯乳頭及び歯嚢、象牙質形成以後の歯髄器及び歯嚢、及び成人歯髄を4%paraformaldehydeにて固定しパラフィン包埋の後薄切し、抗hHGF抗体を用いて免疫組織化学染色を行ったところ、歯胚の線維芽細胞に強く染色が認められたが成人歯髄線維芽細胞には染色性が認められなかった。以上の結果より間葉系におけるHGF産生は線維芽細胞が司り、幼弱な線維芽細胞ほどHGF産能が大きいことが示唆された。

の 歯 embryo differentiation に お け る HGF produce cells の り - わ り and び そ の produce ability の variations change を differentiation と altogether に adjustable べ る た め, three の be 験 を line under い の よ う な results を を た. 1. 歯 embryo に be interstate ど の degree of HGF が containing ま れ て い る か を compare beg す 検 る た め, 歯 nipple, 歯 marrow, and adult 歯 び marrow を ホ モ ジ ネ ー ト し た, determination of HGF after キ ッ ト に て determination し た と こ ろ, 歯 nipple に は 4.0 pg/mg protein, 歯 marrow apparatus に は 1.6 pg/mg protein, and the び component 歯 pulp に に 0.85pg/mg protein <s:1> HGFが検 out された. 2. 歯 nipples, 歯 adult 歯 marrow, marrow, 歯 嚢, お よ び 歯 root membrane を し, outgrowth し て き た line d bud cells を sowing き straight again し confluent に な っ た state で ウ シ tire seed serum contains を ま な い DMEM culture change に え に medium, after 24 time の HGF concentration determination を し た と こ ろ 1.2 ng /ml <s:1> HGFが検 out された. ま た, each cell の mRNA を し, HGF の cDNA を プ ロ ー ブ に with い ノ ー ザ ン ブ ロ ッ ト に て 発 を compare now beg し 検 た と こ ろ, ど の line d bud cells に も HGF が 発 now す る こ と が recognize め ら れ た が そ の poor は 検 out さ れ な か っ た. Phase 3. The bell の dentin formation before の 歯 nipple and び 歯 嚢, dentin formation after の 歯 marrow, and び 歯 嚢, and び adult 歯 marrow を 4% paraformaldehyde に て fixed し パ ラ フ ィ ン thin slice after embedding の し, resisting hHGF antibody を with い て immunohistochemical staining line を っ た と こ ろ, 歯 の に strong く dye line d bud cells Color が recognizes められたが adult 歯 myelocytes に <s:1> staining が recognizes められな められな った. Leaf between の above results よ り に お け る HGF は line d bud cells が り, indecisive な line d bud cells ほ ど HGF が large capacity き い こ と が in stopping さ れ た.