RalGDSのシグナル伝達系におけるRasとRalの翻訳後修飾の重要性

Ras 和 Ral 翻译后修饰在 RalGDS 信号转导系统中的重要性

• 批准号: 10780386
• 负责人: 岸田 昭世
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10780386/
• 关键词: Ras; Rap; Ral; 低分子量G蛋白質; 翻訳後修飾; RalGDS

Rasのシグナルの一部は、低分子量G蛋白質Ralに対するGTP/GDP交換反応促進蛋白質RalGDSを介してRalに伝達される。RasとRalは脂質によるC末端の翻訳後修飾を介して細胞膜上に局在する。Rasと相同性の高いRap1はRalGDSと結合するがRalを活性化せず、Rasとは異なるC末端の翻訳後修飾を受けて核周囲に存在する。そこで、RalGDSを介したRalの活性化におけるRasやRalの翻訳後修飾の役割を解析するため、RasのN末端とRap1のC末端のキメラ(C1)と、Rap1のN末端とRasのC末端のキメラ(C4)を作製し、細胞内局在とRalの活性化作用を検討した。その結果、RasとC4は細胞膜に局在し、Rap1とC1は核周囲に局在した。RalGDSは単独では細胞質に発現するが、RasやC4と共発現すると細胞膜にトランスロケートし、Rap1やC1と共発現すると核周囲に認められた。RalGDSによるRalの活性化現象はRasまたはC4と共発現した場合に認められた。さらに、RalGDSのC末端にRasのC末端20アミノ酸を融合させたキメラは、Rasの非存在下で細胞膜にトランスロケートし、Ralを活性化した。したがって、RalGDSは、Rasと結合して細胞質から細胞膜上にトランスロケートしてRalを活性化することが明らかとなった。また、Ralの下流に存在するRalBP1やPOB1が、エンドサイトーシスの制御に関わる事や、細胞に翻訳後修飾を受けない変異型のRalを導入するとEGFレセプターのエンドサイトーシスが抑制される事を見出した。したがって、RalGDS/Ral/RalBP1/POB1を介するシグナル伝達経路は、EGFレセプターのエンドサイトーシスの制御に関わり、その際Ralの翻訳後修飾が重要であることが明らかとなった。

Ras <s:1> シグナ 応 <s:1> a part of て, low-molecular-weight G protein Ralに counteracts するGTP/GDP exchange 応 to promote protein RalGDSを and <s:1> てRalに伝 to reach される. RasとRal <s:1> lipid による c-terminal <s:1> is 訳 and modifies を intermediate て on the て cell membrane に localized in する. High Ras と identity の い Rap1 は RalGDS と combining す る が Ral を activeness せ ず, Ras と は different な る C terminal の modification after turn 訳 を by け て nuclear weeks 囲 に exist す る. そ こ で, RalGDS を interface し た Ral の activeness に お け る Ras や Ral の turn 訳 modification after cutting を の service parsing す る た め, Ras の N terminal と Rap1 の C terminal の キ メ ラ (C1) と, Rap1 の N terminal と Ras の C terminal の キ メ ラ (C4) を し, intracellular bureau in と Ral の activeness を role Youdaoplaceholder0 to claim た. The そ そ result shows that the に local area of the RasとC4 そ cell membrane is in the た, and the 囲に local area of the Rap1とC1 <s:1> perinuclear area is in the た た. RalGDS は 単 alone で は cytoplasm に 発 now す る が, Ras や C4 と 発 now す る と membrane に ト ラ ン ス ロ ケ ー ト し, Rap1 や C1 と 発 now total す る と nuclear weeks 囲 に recognize め ら れ た. RalGDSによるRal <s:1> activation phenomenon Rasまた C4と co-occurrence <s:1> た occasions に recognized められた. さ ら に, RalGDS の C terminal に Ras の C at the end of 20 ア ミ ノ acid を fusion さ せ た キ メ ラ は, Ras の で cell membrane in the presence of non に ト ラ ン ス ロ ケ ー ト し, Ral を activeness し た. し た が っ て, RalGDS は, Ras と combining し て cytoplasm か ら membrane に ト ラ ン ス ロ ケ ー ト し て Ral を activeness す る こ と が Ming ら か と な っ た. ま た, Ral の obscene に exist す る RalBP1 や POB1 が, エ ン ド サ イ ト ー シ ス の suppression に masato わ る や, cell に modification after turn 訳 を by け な い - alien の Ral を import す る と EGF レ セ プ タ ー の エ ン ド サ イ ト ー シ ス が inhibit さ れ る matter を show the し た. し た が っ て, RalGDS/Ral/RalBP1 POB1 を interface す る シ グ ナ ル 伝 は 経 road, EGF レ セ プ タ ー の エ ン ド サ イ ト ー シ ス の suppression に masato わ り, そ の international Ral の modification after turn 訳 が important で あ る こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

Nakashima,S.: "Small G protein Ral and its downstream molecules regulate endocytosis of EGF and insulin receptors"EMBO J.. 18・13. 3629-3642 (1999)

Nakashima, S.：“小G蛋白Ral及其下游分子调节EGF和胰岛素受体的内吞作用”EMBO J.. 18・13 (1999)。

Sawamoto,K.: "Ectopic expression of mutationally-activated RalGTPase inhibits cellshape changes during Drosophila eye development"Oncogene. 18・11. 1967-1974 (1999)

Sawamoto, K.：“突变激活的 RalGTP 酶的异位表达抑制果蝇眼睛发育过程中的细胞形状变化”Oncogene 18・11 1967-1974 (1999)。

Matsubara, K.: "Plasma mambrane recruitment of RalGDS is critical for Ras-dependent Ral Activation." Oncogene. 18・6. 1303-1312 (1999)

Matsubara, K.：“RalGDS 的血浆膜募集对于 Ras 依赖性 Ral 激活至关重要。”18・6 (1999)。

Sawamoto, K.: "Ectopic expression of mutationally-activated RalGTPase inhibits cellshape changes during Drosophila eye development." Oncogene. (in press). (1999)

Sawamoto, K.：“突变激活的 RalGTP 酶的异位表达会抑制果蝇眼睛发育过程中的细胞形状变化。”

Ikeda,M.: "Identification and characterization of a novel protein interacting with Ral-binding proteinl,a putative effector protein of Ral." J.Biol.Chem.273・2. 814-821 (1998)

Ikeda, M.：“与 Ral 结合蛋白（一种假定的 Ral 效应蛋白）相互作用的新型蛋白的鉴定和表征。”J.Biol.Chem.273·2（1998）。