EHドメインを介する蛋白質相互作用と細胞機能制御

EH 结构域介导的蛋白质相互作用和细胞功能调节

• 批准号: 10179212
• 负责人: 岸田 昭世
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10179212/
• 关键词: Eps15; Epsin; エンドサイトーシス; POB1; EHドメイン

Eps15は分子量約150KのEGF受容体の基質である。Eps15のN末端側にはEH(Eps15 ホモロジー)ドメインと呼ばれる構造が認められる。EHドメインを含む蛋白質が哺乳動物から酵母まで保存され、エンドサイトーシスを制御することは決定的になっている。EHドメインはAsn-Pro-Phe(NPF)というモチーフに結合するので、EHドメインを含む蛋白質とNPFモチーフを含む蛋白質の相互作用がエンドサイトーシスを制御する機構を明らかにすることは本研究領域の重要課題となっている。私共は低分子量G蛋白質Rasの標的蛋白質RalGDSを介する細胞内情報伝達機構の生理的役割を解明してきた。RasのシグナルはRalGDSを介してRalやその標的蛋白質RalBP1に伝えられる。私共はRalBP1と結合する新規蛋白質POB1(Partner of RalBP1)を同定した。POB1には、EHドメインが一個所認められ、培養細胞にPOB1のEHドメインを発現するとEGFやインスリン受容体のエンドサイトーシスが抑制されたので、POB1はこれら受容体のエンドサイトーシスに関与すると考えられた。POB1のEHドメインの機能を明らかにするために、ウシ大脳膜画分からPOB1のEHドメインと結合する2種類の蛋白質を精製したところ、これらは各々Eps15とepsinであった。epsinにはC末端にNPFモチーフが3個所認められた。POB1のEHドメインとEps15のEHドメインはepsinのNPFモチーフを含むC末端部分に結合し、POB1のEHドメインはEps15とも直接結合した。培養細胞にepsinの中央部領域を発現させると、EGFやインスリン受容体のエンドサイトーシスが抑制された。したがって、Ras/RalGDS/Ral/RalBP1/POB1シグナル伝達系はEps15やepsinを介してエンドサイトーシスに関与することが示唆された。

Eps15 has a molecular weight of about 150K and is the substrate of EGF receptor. The N-terminal side of Eps15 is EH(Eps15). EH-containing proteins are essential for mammalian yeast preservation and control. The mechanism of interaction between EH and Asn-Pro-Phe(NPF) and NPF proteins is an important subject in this research field. The expression of RalGDS, the target protein of low molecular weight G protein Ras, in intracellular signaling pathways and physiological pathways is understood. Ras and RalGDS are the target proteins of Ral and RalBP1. The new protein POB1 (Partner of RalBP1) was identified. POB1 is a recognized protein that can be expressed in cultured cells and can be inhibited by EGF. POB1 is a protein that can be expressed in cultured cells and can be inhibited by EGF. The function of POB1 in EH is to purify the two kinds of proteins in EH. epsin POB1's EH terminals and Eps15's EH terminals are directly bonded to each other, including the C-terminal portion. In culture, epsin occurs in the central region of the cell, and EGF is used to inhibit the growth of the receptor. Ras/RalGDS/Ral/RalBP1/POB1 is the only one who has the right to be involved in this process.

项目成果

Sawamoto,K.: "Ectopic expression of mutationally-activated RalGTPase inhibits cellshape changes during Drosophila eye development." Oncogene. (in press). (1999)

Sawamoto, K.：“突变激活的 RalGTP 酶的异位表达会抑制果蝇眼睛发育过程中的细胞形状变化。”

Ikeda,M.: "Identification and characterization of a novel protein interacting with Ral-binding proteinl,a putative effector protein of Ral." J.Biol.Chem.273・2. 814-821 (1998)

Ikeda, M.：“与 Ral 结合蛋白（一种假定的 Ral 效应蛋白）相互作用的新型蛋白的鉴定和表征。”J.Biol.Chem.273·2（1998）。