体の左右非対称性決定に関わる成長因子leftyの発現制御機構

生长因子左撇子表达的控制机制，参与决定身体的左右不对称性

• 批准号: 10780461
• 负责人: 西條 幸男
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10780461/
• 关键词: トランスジェニックマウス; nodal; lefty; FAST2; 左右非対称性; 転写調節機構; 初期発生

これまでにlefty-1、lefty-2本来の発現を再現するゲノムの探索を行い、それぞれの遺伝子の5'上流域にエンハンサーを同定してきた。本年は更にそれを詳細に解析すべく、lefty2の側板中胚葉での左側の発現調節に着目し、エンハンサーのコア配列の決定を行い、さらにそれに結合し転写を活性化するDNA結合蛋白質を単離することに成功した。lefty2のエンハンサー領域はすでに380bpまで決定していたが、この中でどの塩基配列が重要な活性を持っているのか、塩基配列の情報や詳細な欠失コンストラクトの解析では決定できなかった。そこで同様な発現パターンを示すnodalおよびヒトのlefty2ホモログであるLEFTY2遺伝子のエンハンサーをこれまでと同様にトランスジェニックマウスを用いた系で決定した。これら3者の配列を比較したときに、高い相同性を示す配列が見られ、これらの活性を調べてみたところ保存された9bpを含む25bpのゲノム領域をレポーター遺伝子に結合したコンストラクトがトランスジェニックマウスで左側側板中胚葉での発現を再現できた。そこで酵母one hybrid法によりこの配列に結合する因子を探索したところ、フォークヘッド型の転写因子であるFAST2が単離されてきた。FAST2は確かにleftyやnodalの発現パターンと重複しており、さらにleftyやnodalの転写活性化していることを、トランスジェニックマウスの系、in vitro での結合活性、培養細胞でのレポーター遺伝子の転写活性化により確認した。また、FAST2はTGF-beta familyからのシグナルによって活性化する転写因子であることが知られており、培養細胞の系やさらにアフリカツメガエルを用いた系によってleftyやnodal遺伝子の転写が実はnodal自身によって活性化されている事を証明した。

これまでにlefty-1, lefty-2 originally appeared and reproduced Explore を行い、それぞれの伝子の5' Upper Basin にエンハンサーを同定してきた. Detailed analysis of this year's update, lefty2's lateral plate mesoderm, left side's current adjustment, and エンハンサーのコアarray のdetermination を行い, さらにそれにcombination し転写をactivation するDNA binding protein を単leave することにsuccessful した. lefty2のエンハンサー区はすでに380bpまでdeterminationしていたが、この中でどの塩塩综合が重It is necessary to analyze the details of the activity, the information of the base arrangement, and the analysis and decision-making.そこで同様な発出すnodalおよびヒトのlefty2ホモログであるLEFT The Y2 legacy is the same as the original one.これら三者の配arrayが见られ、これらのActivityを AdjustmentべてみたところSaveされた9bpをcontainingむ25 bpのゲノム区をレポーター伝子にcombinationしたコンストラクトがThe トランスジェニックマウスで mesodermal leaf on the left side of the lateral plate is reproduced.そこでYeast one The hybrid method is a combination of the combination of the factor and the exploration of the factor, and the factor of the hybrid method is the FAST2 factor. FAST2は正かにleftyやnodalの発成パターンと Repeatしており、さらにle ftyやnodalの転写activationしていることを、トランスジェニックマウスのsystem、in The binding activity in vitro and the activation of cultured cells were confirmed by writing.また、FAST2はTGF-beta familyからのシグナルによってactivationする転WRITTENることが知られており、Cultivated cell line やさらにアフリカツメガエルを Use the いた system によってlefty やnodal 伝子の転 to write が実はdal itself によってactivation されている事をprove した.

项目成果

H.Adachi: "Determination of left/right asymmetric expression of nodal by a left side-specific enhancer with sequence similarity to a lefty-2 enhancer"Genes Dev.. 13,. 1589-1600 (1999)

H.Adachi：“通过与 lefty-2 增强子具有序列相似性的左侧特异性增强子来确定节点的左/右不对称表达”Genes Dev.. 13，。

K.Yashiro: "Distinct transcriptional regulation and phylogenetic divergence of human LEFTY genes"Genes to Cells. (in press). (2000)

K.Yashiro：“人类 LEFTY 基因的独特转录调控和系统发育差异”《基因到细胞》。

Y.Okada: "Abnormal nodal flow precedes situs inversus in iv and inv mice"Molecular Cell. 4. 1-20 (1999)

Y.Okada：“在 iv 和 inv 小鼠中，异常的结节血流先于内位反转”《分子细胞》。

Y.Saijoh: "Left-right asymmetric expression of lefty2 and nodal is induced by a signaling pathway tha includes the transcription factor FAST2"Molecular Cell. 5,. 35-47 (2000)

Y.Saijoh：“lefty2 和 nodal 的左右不对称表达是由包括转录因子 FAST2 的信号通路诱导的”分子细胞。