ウサギ後根神経節におけるα1,2フコース転移酵素遺伝子の発現とその調節機構

α1,2岩藻糖基转移酶基因在兔背根神经节中的表达及其调控机制

• 批准号: 10780486
• 负责人: 等 誠司
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10780486/
• 关键词: H抗原; α1,2フコース転移酵素遺伝子; 後根神経節; 感覚神経細胞; ゲノム構造; プロモーター領域; 転写因子; Sp1

後根神経節の小径神経細胞に特異的に発現しているH抗原(Fucα1,2Gal)は、ウサギにおいては主にH型α1,2フコース転移酵素遺伝子(RFT-I)によってその発現が調節されていることを、昨年度までに明らかにしてきた。ウサギ後根神経節神経細胞の初代培養系などを用いたプロモーター解析により、RFT-I遺伝子の翻訳開始点より上流約700bpを後根神経節神経細胞に特異的なプロモーター領域として同定し、更にこの領域内に幾つかのSp1結合部分と、神経成長因子によって誘導される転写調節因子Egr-1の結合部分(GSG-element)を見いだした。しかしこれらの転写調節因子のみでは、後根神経節神経細胞に特異的なRFT-I遺伝子の発現に不充分であることから、新たな転写調節因子の同定を目指して今年度の研究を行った。約700bpのプロモーター領域を酵母レポーター遺伝子の上流に結合して酵母に導入し、One-hybrid systemによってウサギ後根神経節cDNAライブラリーをスクリーニングした。しかし、この方法ではポジティブクローンが得られなかったため、手法を改良し、Sp1あるいはEgr-1タンパク質を予め酵母内に発現させた上で、上記のスクリーニングを施行した。その結果、幾つかの候補となる遺伝子が得られたので、現在それらの塩基配列の決定および転写因子であるか否かなどの検討を行っている。一方、糖鎖抗原と感覚神経細胞の機能維持との関連を探る目的で、GDlbガングリオシド感作による末梢神経障害モデルを用い、神経栄養因子受容体trkA・trkCの発現を定量し、このモデルにおいて極く早期の段階からtrkCの発現量が減少していることを見いだした。糖鎖抗原に対する抗体によって、神経細胞維持に必要な情報伝達がブロックされる可能性を示した。

In the back root, the trail was specially designed to show that the H antigen (Fuca 1, 2Gal), the H type alpha 1 (H), type H alpha 1, and type H alpha 1, transferase (RFT-I), were detected. In the first generation of the culture system, the primary culture system was used to analyze the starting point of the RFT-I computer. The upstream of the start point of the 700bp computer is the same as that of the user in the field, and the connection part of the Sp1 in the field. The divine growth factor is responsible for writing the Egr-1 factor. The combination part (GSG-element) is responsible for the growth factor. The reason is that the RFT-I is not sufficient, and that the new factor is the same as this year's research. In the field of 700bp, there is a lot of information on the flow of yeast in combination with the introduction of yeast and One-hybrid system. The root of the system is called cDNA. The method was modified, the method was modified, the Egr-1 was modified, and the yeast was shown to be in good condition. The results show that you are waiting for your child to get a bad result, and now the column will determine whether you want to write a factor or not. On the one hand, the glucose antigen receptor cell mechanism can maintain the objective of the probe, the GDlb antigen can be used to prevent the damage, the receptor of the factor trkA ·trkC can detect the quantity, and the dose will be measured in the early stage. The concentration of the trkC will be much lower than that in the early stage. Glycogen, antigens, antibodies, antigens, antigens, antibodies, antigens, antibodies, antibodies, antigens, antibodies, antigens, antibodies, antibodies, antigens, antibodies, antigens, antibodies, antibodies,

项目成果

Hitoshi S,Kusunoki S,Kanazawa I,and Tsuji S: "Dorsal root ganglia neuron-specific promoter activity of the rabbit β-galactoside α1,2-fucosyltransferase gene." Journal of Biologycal Chemistry. 274(1). 389-396 (1999)

Hitoshi S、Kusunoki S、Kanazawa I 和 Tsuji S：“兔 β-半乳糖苷 α1,2-岩藻糖基转移酶基因的背根神经节特异性启动子活性。”生物化学杂志 274(1)。 1999）

Hitoshi S,Kusunoki S,Kanazawa I,and Tsuji S: "Dorsal root ganglia-specific expression of the β-galactoside α1,2-fucosyltransferase genes in rabbits." Journal of Neurochemistry. 70. 2174-2178 (1998)

Hitoshi S、Kusunoki S、Kanazawa I 和 Tsuji S：“兔子中 β-半乳糖苷 α1,2-岩藻糖基转移酶基因的背根神经节特异性表达。”《神经化学杂志》70。2174-2178（1998）。

Hitoshi S.,Kusunoki S.,Murayama S.,Tsuji S.,Kanazawa I.: "Rabbit experimental sensory ataxic neuropathy ; anti-GD1b antibody-mediated trkC downregulation of dorsal root ganglia neurons"Neuroscience Letter. 260. 157-160 (1999)

Hitoshi S.、Kusunoki S.、Murayama S.、Tsuji S.、Kanazawa I.：“兔实验性感觉共济失调神经病；抗 GD1b 抗体介导的背根神经节神经元的 trkC 下调”神经科学快报。