突然変異により誕生した新しい難聴マウスのゲノム解析

突变产生的新型聋鼠的基因组分析

• 批准号: 11770057
• 负责人: 若林 雄一
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770057/
• 关键词: 難聴; 変異マウス; ポジショナルクローニング; カドヘリン; YAC; BAC; 遺伝地図; 物理地図; 難聴マウス; 連鎖解析; 戻し交配; マーカー; YACクローン; BACクローン

ns(niigata shaker)マウスはICRマウスから突然変異により誕生した聴覚・平衡感覚障害を示す新しい変異マウスである。我々はこの原因遺伝子のポジショナルクローニングを行った。まず、ホモのnsマウスを日本産野生マウスMSMに交配し、得られたF1個体をホモのnsマウスに戻し交配し、戻し交配個体1700個体が得られた。これらの個体についてマウス全染色体上のマーカーを用いて、連鎖解析を行った。その結果、第10番染色体上のD10Mit258付近にns遺伝子座が存在することが明らかとなった。さらに第10番染色体上のマーカーを用いて、遺伝地図の作成、連鎖解析を行ったところ、ns遺伝子座はD10Mit59からD10Mit258までの2.67cMの範囲に存在することが明らかとなった。この領域をカバーする物理地図をYAC,BACクローンを用いて作成した。BACクローンから得られたSTSマーカーを用いてさらに連鎖解析を行ったところ、非組換え領域はふたつのBACクローンで完全にカバーされていることがわかった。これらのふたつのクローンについてショットガン・セィークエンスィングを行った。その結果新しいカドヘリン、カドヘリン23が単離された。この遺伝子について変異の探索をcDNAで行ったところ、146番目のGがnsマウスにおいては欠失していることがわかった。そのためフレームシフトを起こし、ストップコドンが出現することにより、正常マウスに比べて遥かに短いタンパクしかできていないことがわかった。さらにゲノムDNAを調べたところ、この一塩基の欠失はイントロン2の一番3'側のGがAに置換することによりスプライシングが一塩基シフトし、エクソン3の一番5'側のGが削られてしまうことにより生ずることがわかった。これによりカドヘリン23がnsマウスの変異の原因遺伝子であることが示された。

ns (niigata shaker) It's an ICR. I am not going to be able to do this because I am not going to do this. MSM mating, F1 individuals mating, F2 individuals mating, F1 individuals mating, F1 individuals mating, F2 individuals mating, F1 individuals mating, F1 individuals mating, F2 individuals mating, F1 individuals mating, F1 individuals mating, F2 individuals mating, F1 individuals mating, F2 individuals mating, F1 individuals mating, F2 individuals mating, F2 individuals mating, F3 individuals mating, F2 individuals mating, F3 individuals mating, F2 individuals mating, F3 individuals mating, F2 individuals mating, F3 individuals mating, F4 individuals mating, F3 individuals mating, F4 individuals mating, F3 individuals mating, F3 individuals mating, F4 individuals mating, F3 individuals mating, F4 individuals mating, F3 individuals mating, F4 individuals mating, F This individual is used and genetic linkage is established on the entire chromosome. As a result, the locus D10 Mit 258 on chromosome 10 is present. In addition, the gene expression on chromosome 10 was determined by genetic linkage analysis. The gene expression on chromosome 10 was determined by genetic linkage analysis. The gene expression on chromosome 10 was determined by DNA sequencing. The physical location of the domain is YAC, BAC, and the application is made. BAC is the domain of genetic linkage. It is the domain of non-structural linkage. This is the first time I've ever seen a woman. The results of the new project are as follows: This is the first time I've ever seen a person who's been in a relationship with someone who's been in a relationship with someone else. The first time I saw it, I saw it. I saw it. The DNA sequence is modified to include a sequence of G sequences on the 3 'side of the DNA sequence and G sequences on the 5' side of the DNA sequence. The reason for this change is that the number of entries in the list is 23.

项目成果

Tadashi Wada: "A Point Mutation in a Cadherin Gene Cdh 23 Causes Deafness in a Novel Mutant, Waltzer mouse Niigata"Biochemical and Biophysical Research Communications. (In press).

Tadashi Wada：“钙粘蛋白基因 Cdh 23 中的点突变导致新突变体 Waltzer 小鼠新泻耳聋”生物化学和生物物理研究通讯。