マイクロサテライトによるダウン症過剰21番染色体由来検討とモザイク発生機序解明

利用微卫星研究唐氏综合症多余21号染色体的起源并阐明嵌合体发育机制

• 批准号: 11770417
• 负责人: 佐々木 美津代
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770417/
• 关键词: ダウン症; マイクロサテライト; モザイク

現在保存されている120家系(ダウン症者とその両親)のリンパ球樹立細胞株に加えて、新たに30家系の細胞樹立を行った。DNA抽出はGenとるくんにて行い、蛍光標識したprimerでPCRを行い、dinucleotide repeatの多型を検出する方法を行った。ALF expressシークエンサーにて電気泳動し、Fragment managerを用いてband patternを解析した。ダウン症者の21番染色体3本の由来に関しては、4群(maternal hetero or homo-disomy,paternal hetero or homo-disomy)を判定すべく、2種のprimerで検討した結果、hetero-disomyに関しては有意な結果が得られたがhomo-disomyに関してはslippageによる2bpおきのピークが存在するため量的な判断が行いにくい。さらに、tetranucleotide repeatの2種のprimerを検討中である。primerはIFNAR-IVS5-5',IFNAR-IVS5-3'1でproductsの大きさは195〜215bp、条件は論文と異なり、95℃30s-54℃30s-72℃30s 40cycles。もう1種のprimerはVS17T#3',VS17T#4でproductsの大きさは172〜264bp、条件は論文と異なり、95℃30s-55℃30s-72℃30s 40cycles。VS17Tに関してはバンドがラダー形成するためさらに条件の設定変更が必要である。また、RFLPによる量的な検討も平行して行う。平成11年、大阪でダウン症フォーラムが開催され、ダウン症児の健康管理に関して情報交換、健康手帳の執筆に参加した。

120 families (both with and without disease) are now preserved, and 30 new families are being established. DNA extraction, DNA sequencing, DNA primer sequencing, DNA repeat sequencing ALF express mode is used to analyze the band pattern. The origin of chromosome 3 of 21 in patients with the disease is determined by the number of 4 groups (maternal hetero or homo-disomy,paternal hetero or homo-disomy), and the results of primer analysis of 2 kinds of hetero-disomy are determined by the number of hetero-disomy. The two kinds of primers of tetranucleotide repeat are discussed in this paper. primer IFNAR-IVS5- 5', IFNAR-IVS5- 3'1 products 195 ~ 215bp, conditions, 95℃30s-54℃30s-72℃30s 40cycles. 1 kind of primer VS17T#3', VS17T#4 products 172 ~ 264bp, conditions, 95℃30s-55℃ 30s-72℃30s 40cycles. VS17 T is the key to the formation of a new condition. The amount of RFLP was measured in parallel. In 2011, Osaka Medical Center opened, information exchange and writing of health accounts were held.