電位依存性L型カルシウムチャネルにおけるゲーティング制御の分子機構

电压门控L型钙通道门控的分子机制

• 批准号: 11771426
• 负责人: 赤羽 悟美
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771426/
• 关键词: 電位依存性Ca^<2+>チャネル; L型Ca^<2+>チャネル; カルシウム拮抗薬; カルシウム・アゴニスト; ゲーティング; CAMP依存性プロテインキナーゼ; APP; APLP-1; 電位依存性L型Ca^<2+>チャネル; Ca拮抗薬; Ca^<2+>チャネルアゴニスト; Dihydropyridine; αICサブユニット; Ca^<2+>チャネル

1)最近クローニングされたホヤの電位依存性L型Ca^<2+>チャネルがカルシウム拮抗薬およびカルシウムチャネル・アゴニストに対する感受性を欠く事に着目した。アミノ酸配列を比較しポイントミューテーションを導入した改変Ca^<2+>チャネルをBHK6細胞に発現させ機能解析を行ったところ、電位依存性L型Ca^<2+>チャネルのポアを形成すると推定されているドメイン(IIIS5-S6)にカルシウム拮抗薬およびカルシウムチャネル・アゴニストの結合に重要なアミノ酸を同定した。この発見はL型Ca^<2+>チャネルのゲーティング機構について新たな概念を開いた(Yamaguchi et al.,J.Biol.Chem.275:41504,2000)。2)電位依存性L型Ca^<2+>チャネルのプロテインキナーゼAによるリン酸化とL型Ca^<2+>チャネル電流密度の増大に関わるアミノ酸を同定した。さらにこれとは異なるドメインのプロテインキナーゼAによるリン酸化を介してCa^<2+>チャネル活性化の閾膜電位が低下することを示した(Naguro, et al.,FEBS Letters,489:87,2001)。3)電位依存性L型Ca^<2+>チャネルα_<1C>サブユニットの細胞内カルボキシル末端部分と相互作用する蛋白をYeast Two-Hybrid法により脳cDNAライブラリーからスクリーニングし、APPファミリーに属する蛋白(APP,APLP-1)を同定した。APLP-1をL型Ca^<2+>チャネルと共発現させることによりL型Ca^<2+>チャネル電流の活性化閾膜電位が上昇した(論文投稿中)。

1)Recently, the potential-dependent L-type Ca^<2+> complex has been identified as a potential antagonist to the complex. Comparison of acid sequence and function analysis of Ca^<2+> generation in BHK6 cells; potential-dependent L-type Ca^<2 +> generation; and estimation of formation of acid sequence and function analysis in IIS5-S6 cells. The concept of "L type Ca^<2+> cluster" was developed (Yamaguchi et al., J.Biol.Chem.275:41504,2000)。2)Potential-dependent L-type Ca^<2+> generation is related to the increase in current density of L-type Ca^<2+> generation. The threshold membrane potential of Ca^<2+> activation is lowered due to the acidification of Ca^<2+> and Ca^<2+>(Naguro, et al., FEBS Letters,489:87,2001)。3)Potential-dependent L-type Ca^&lt;2+&gt; protein α_<1C>(2)_(3)_(4)_(5)_(6)_(7)_(8)_(9)_(10)_(11)_(12)_(13)_(14)_(15)_(16)_(17)_(18)_(19)_(10) The activation threshold membrane potential of L-type Ca ^&lt;2 +&gt; generation current of APLP-1 increases (paper submission).

项目成果

Yamaguchi,S.et al.: "Serine residue in IIIS5-S6 linker of L-type Ca^<2+> channel α_<IC> subunit is the critical determinant of the action of dihydropyridine Ca^<2+>channel agonist"J.Biol.Chem.. 275. 41504-41511 (2000)

Yamaguchi,S.et al.：“L 型 Ca^<2+> 通道 α_<IC> 亚基的 IIIS5-S6 连接子中的丝氨酸残基是二氢吡啶 Ca^<2+> 通道激动剂作用的关键决定因素”生物化学杂志 275. 41504-41511 (2000)

Naguro,I.et al.: "Ser^<1901> of α_<IC> subunit is required for the PKA-mediated enhancement of L-type Ca^<2+> channel currents but not for the negative shift of activatity"

Naguro,I.et al.：“α_<IC> 亚基的 Ser^<1901> 是 PKA 介导的 L 型 Ca^<2+> 通道电流增强所必需的，但不是激活负移所必需的”

Adachi-Akahane,S. and Nagao,T.: ""Ca^<2+>channnel antogonists"(Book chapter) in Pharmacology of Ionic Channel Function:Activators and Inhibitors."Editons:Endo,M,Kurachi,Y,and Mishina,M.Publisher:springer(in press). (2000)

足立赤羽，S.

Adachi-Akahane,S.et al.: "BAYK8644 modifies Ca^<2+> cross signaling between DHP and ryanodine receptors in rat ventricular mvowtes."Am.J.Physiol.. 45. H1178-H1189 (1999)

Adachi-Akahane,S.et al.：“BAYK8644 修饰大鼠心室 mvowtes 中 DHP 和兰尼碱受体之间的 Ca^2 > 交叉信号传导。”Am.J.Physiol.. 45. H1178-H1189 (1999)