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ヒトの性決定に関与する遺伝子の同定とその解析

人类性别决定相关基因的鉴定和分析

基本信息

批准号：
11771495
负责人：
新家利一
金额：
$ 1.34万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771495/
关键词：
SRY遺伝子内分泌撹乱化学物質性分化性決定 SRY 機能的下流 differential display

项目摘要

Y染色体上の性決定因子であるSRY(sex determining region on Y)が発見され,それ以降いくつかの性決定に関与する遺伝子が同定されてきた。SRYはDNAに結合して,他の遺伝子の発現を調節することが予想されるが,SRY遺伝子が直接制御する遺伝子は未だ同定されていない。性分化カスケードを明らかにすることは内分泌攪乱物質の研究にもきわめて重要な意味を持つ。本年度は昨年度に引き続いて性決定のカスケードにおいて,SRYが制御する遺伝子の同定を目指した。ヒトSRYcDNAを強力なプロモーターを持つ発現ベクターpCXN2へ組み,これをヒトembryonal cell carcinaoma由来の細胞株であるNT2/D1 cell lineに導入した。抗生物質G418の存在下で恒常的にヒトSRYを過剰発現している細胞およびpCXN2のみをもつ細胞をクローン化した。性決定カスケードに重要な役割を担っていると考えられるSOX9,SF-1に関してはSRYの過剰発現による発現量の変化は認められなかった。生体内ではSOX9やSF-1はSRY発現以降,男性型の発現パターンを示すが,SRYのみがこれらの遺伝子発現に必ずしも重要ではないということが明らかになった。またSRYが他のタンパクと共役して標的遺伝子を調節する可能性を考え,酵母Two hybrid systemによってSRYと相互作用するタンパクの同定を試みた。SRYcDNAの全長をGAL4DNA binding domainの下流に接続し,精巣由来のcDNAで作成されているpreyライブラリーをスクリーニングし,14種類の陽性コロニーを得て現在解析中である。SRYの転写に環境ホルモンが影響を及ぼすことも考えられるため,エストロゲンの暴露実験を行ったが,RT-PCRレベルではSRYの発現量の変化は認められなかった。

The sex-determining factor on the Y chromosome, SRY (sex determining region on Y), is the same as the sex-determining factor SRY (sex determining region on Y). SRY's DNA is combined with it, and its remaining parts are adjusted and thought of.れるが. Sexual differentiation is a research on endocrine disrupting substances, which is important and means it is maintained. This year's last year's に cited き続いてのカスケードにおいて, SRY が control する伝子の Same decision を Object refers to した.ヒトSRYcDNA をStrong なプロモーターをhold つ発appears ベクターpCXN2 へgroup み, これをヒトembryonal cell carcinaoma origin のcell strain であるNT2/D1 Cell line is imported. In the presence of the antibiotic G418, the constant にヒトSRYをpassing and しているcell およびpCXN2 のみをもつcell をクローン化した. Sexual decision-making is important and important. SOX9, SF -1に关してはSRYのpass剰発现による発现quantityの変化はcognizeめられなかった. In vivo SOX9やSF-1はSRY appears and then falls, the male type appears in the body, S RYのみがこれらの缝子発 appear に必ずしもimportant ではないということが明らかになった.またSRYがhis のタンパクと同事して名的缝子をadjustable するpossibilityを考え, yeast Two hybrid systemによってSRYとinteractionするタンパクの同定をtestみた. SRYcDNA full length GAL4DNA binding domain's obscene and cDNA-based productionブラリーをスクリーニングし, 14 types of positive のpositive コロニーを得て are currently being analyzed. SRY's の転WRITING ENVIRONMENT ホルモンが Impact を和ぼすことも考えられるため, エストロゲンのviolence It's a good idea to use RT-PCR and SRY.