走化性を応用した内分泌撹乱化学物質検出システムの開発
利用趋化性开发内分泌干扰化学检测系统
基本信息
- 批准号:15750131
- 负责人:
- 金额:$ 1.86万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
- 财政年份:2003
- 资助国家:日本
- 起止时间:2003 至 2005
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究は、運動性細菌の有する走化性に基づく化学物質認識能力を応用した内分泌攪乱化学物質(環境ホルモン)検出システムの構築を目指している。昨年度までに環境ホルモンに疑いのあるビスフェノールA(BPA)、p-ニトロトルエン(PNT)、p-tert-ブチルフェノール(PBP)に対して走性を示す細菌(PNT1株)を分離し、その走化性プロファイルを作成することに成功している。そこで本年度は、新たに走化性応答を示す事が明らかとなったクレゾールを走化性プロファイルに追加し、さらにPNT1株の有する走化性センサー遺伝子の単離に関する基礎的知見を得たので報告する。1)走化性センサーの適応状態を利用して、ある誘引物質で適応させたPNT1株における別の誘引物質に対する走化性を測定することにより、両物質が同一の走化性センサーで感知されるかどうかを推定した。その結果PNT1株のp-クレゾールは、BPA、PNT、PBPを感知する全てのセンサーとも異なるセンサーで感知され、逆にニトロベンゼンはBPA、PNT、PBPを感知するいずれのセンサーとも相互作用していることが推察された。2)PNT1株の走化性センサー遺伝子の単離を行うために、塩基配列が既知の緑膿菌由来走化性センサー遺伝子をPCRにより増幅・合成し、それをプローブとしてPNT1株の染色体DNAに対するサザンハイブリダイゼーションを行った。その結果緑膿菌由来走化性センサー遺伝子と相同性を示すDNA断片が約20検出された。今後はこれらのDNA断片の単離、遺伝子破壊株の構築、更にはPNT1株との走化性プロファイルの比較を行い、内分泌攪乱化学物質検出システムの創成に関わる基礎的知見を蓄積する。なお以上の成果については1件の学会発表(荷方ら,日本生物工学会,2005年11月,つくば国際会議場)を行った。
This study は, motility bacteria の す る go sexual に basis づ く chemicals cognition を 応 with し た endocrine disrupting chemicals (environment ホ ル モ ン) 検 out シ ス テ ム の build を refers し て い る. Yesterday's annual ま で に environment ホ ル モ ン に suspected い の あ る ビ ス フ ェ ノ ー ル A (BPA), p - ニ ト ロ ト ル エ ン (PNT), p - tert - ブ チ ル フ ェ ノ ー ル (PBP) に し seaborne て go sexual を す bacteria (PNT1 strains) in を separation し, そ の go elasticity プ ロ フ ァ イ ル を made す る こ と に success し て い る. そ こ で は this year, the new た に go voltinism 応 answer を が す things in Ming ら か と な っ た ク レ ゾ ー ル go を voltinism プ ロ フ ァ イ ル に additional し, さ ら に PNT1 の strains have す る go voltinism セ ン サ ー posthumous son 伝 の 単 from に masato す る foundation of knowledge を た の report で す る. 1) walk voltinism セ ン サ ー の optimum 応 state を し use て, あ る attractive substance で optimum 応 さ せ た PNT1 strains に お け る don't の attractive substance に す seaborne る walk the sex determination of を す る こ と に よ り, struck material が same の go sexual セ ン サ ー で perception さ れ る か ど う か を presumption し た. そ の results PNT1 strains の p - ク レ ゾ ー ル は, BPA, PNT, PBP を perception す る full て の セ ン サ ー と も different な る セ ン サ ー で perception さ れ, reverse に ニ ト ロ ベ ン ゼ ン は BPA, PNT, PBP を perception す る い ず れ の セ ン サ ー と も interaction し て い る こ と が push examine さ れ た. 2) go PNT1 strains の elasticity セ ン サ ー posthumous son 伝 の 単 line from を う た め に, salt base with column が already know の pseudomonas bacteria origin walk voltinism セ ン サ ー heritage 伝 son を PCR に よ り rights of synthetic し, そ れ を プ ロ ー ブ と し て PNT1 strains の chromosome DNA に す seaborne る サ ザ ン ハ イ ブ リ ダ イ ゼ ー シ ョ ン を line っ た. そ の results pseudomonas bacteria origin walk voltinism セ ン サ ー posthumous son 伝 と identity を す DNA fragment in about 20 検 が out さ れ た. Future は こ れ ら の DNA fragment の 単 from, heritage 伝 broken 壊 strains の building, more に は PNT1 strains と の go voltinism プ ロ フ ァ イ ル の is line を い, endocrine disrupting chemicals 検 シ ス テ ム の chuang cheng に masato わ る basic knowledge accumulation of を す る. な お の results above に つ い て は 1 piece の learn 発 table (Netherlands ら, biological worker society in Japan, in November 2005, つ く ば international conference) line を っ た.
项目成果
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